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叶绿体中色素的提取和分离

“叶绿体中色素的提取和分离”的实验总结
吉林省东辽县第一高级中学校王艳华
高中生物必修教材中,对“叶绿体中色素的提取和分离”实验,学生按照教材的操作步骤都可以做成功。

但是在实验中也遇到了一些困惑,教材中又没有给予解释。

就这些问题本人谈一些自己的看法。

1.研磨为什么要加碳酸钙
因为叶绿体中的色素所处的环境具有微酸性。

由于研磨使细胞结构遭到破坏,细胞液中的有机酸流出,酸性的细胞液直接接触色素,导致叶绿素的分子结构遭到破坏,使叶绿素失去镁离子,变为黄色。

碳酸钙是一种强碱弱酸盐,虽然在水中的溶解度小,但仍有一部分溶解。

2.研磨时为什么要加入少许二氧化硅
因为二氧化硅就是石英砂,研磨时可增大强度,加快细胞叶绿体中的色素释放出来的速度。

所以加入二氧化硅是为了研磨得充分。

3.研磨时为什么要迅速
研磨时,当加入丙酮后,要迅速、充分研磨,迅速研磨可以防止丙酮挥发,因为丙酮有毒性。

充分研磨是为了使更多的色素溶解在丙酮中。

4.过滤为什么用单层尼龙布过滤
在获得滤时要进行过滤,过滤的目的实际上是为了获得含色素的溶液,去掉二氧化硅、碳酸钙、破碎的细胞。

因此可以在漏斗基部放一块单层尼龙布。

过滤时,不能用滤纸,要用纱布(或脱脂棉),因为滤纸可以吸附色素,降低滤液中色素的含量,使实验效果不明显。

滤液过滤到试管中后,应用棉塞将试管中塞紧,以防止丙酮挥发和色素遇到空气氧化。

5.滤纸条为什么要剪去两角
滤纸条必须干燥处理,防止水分因素干扰实验效果,在一端剪去两角的目的是让滤液色素分离时色素带平行,使得到的色素带整平。

若不剪去两角,色素在滤纸条上边缘的扩散速度就快,中间扩散的慢。

6.画滤液细线为什么要细而直
画滤液曲线,要细而直,以防止色素部分重叠,待一次干燥后再画第二次,这样可以增大滤液细线中色素的量,使色素带更加清晰。

7.分离色素为什么要用层析液
因为色素属于有机溶剂不溶于水。

可溶于层析液,且在层析液中的溶解度不同,溶解度高的色素随层析液在滤纸条上扩散的快,溶解度低的则扩散得慢,于是各种色素就在扩散中分离开来。

8.分离色素为什么不要让滤纸条上的滤液曲线接触到层析液
分离色素时,一定不要让滤纸条上的滤液曲线接触到层析液,以防止色素溶于层析液中,导致色素不清晰,影响实验效果。

由于层液易挥发,所以层析时烧杯上应盖养盖,防止层析液挥发。

[作者单位:吉林省东辽县第一高级中学]。

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