高效液相色谱仿真实验
一、实验概述：
以液体做流动相的色谱称为液相色谱。

人们把已经比较成熟的气相色谱理论应用于液相
色谱，使液相色谱得到了迅速的发展。

随着其他科学技术的发展，出现了新型的高压输液泵、
高效的固定相和柱填充技术、高灵敏度的检测器，加上计算机的应用，使得液相色谱实现了
高效率和高速度。

这种分离效率高、分析速度快的液相色谱称为高效液相色谱（High performanee liquid chromatography, HPLC ）。

二、实验装置：
Agilent（安捷伦）1100系列液相色谱系统简介：
Agile nt1100 系列HPLC组件和系统，将Agile nt长期的化学分析经验与领先的计算机技术结合，把网络技术引入了实验室。

从1996年以来，在全球已经安装了超过130,000台1100组件和55,000多套化学工作站数据处理系统，成为目前单一型号市场占有率最高的液
相色谱系统。

本仿真软件是模拟用Agile nt化学工作站的数据处理系统进行样品分析和数据采集（色谱图）的过程。

注：本软件只是模拟分析的过程和内容，并不涉及其原理，所以实验中的参数调节对结果并
没有影响，而真实实验结果是随参数的变化而变化的，这一点需要特别注意！
实验主界面:
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三］ 厂以貝读方式打开®
用鼠标左键点中你要做的实验，此文件名会出现在对话框的“文件名” 一栏的文本框 中，在此实验文件上面双击左键或者点击“打开”按钮打开实验文件。

三、实验操作： 第一步：选取实验
点击主菜单上的“实验选取”，会出现如下的对话框:
取消|
化学工作站界面:
第二步：确认操作条件
点击主菜单上的“操作条件”，会出现如下的操作条件列表:
邑谱
n週：25 1000 进样显：如I 木io«涪制乱申薛g 建动相潼
速;lal/Hiin
在实验调节过程中，请以此列表内的条件为准进行调节，否则不能正确输出色谱峰。

第三步：加入试剂
点击仪器上的自动进样器部分（当鼠标移到仪器的各部分时会出现相应的说明）
如下画面：
点击下面的试剂小瓶，会自动放置到自动进样器的托盘中。

完成后，点击主界面上的电脑启动化学工作站。

第四步：编辑方法
击主界面上的电脑启动化学工作站开始编辑方法。

所谓方法就是一个参数集，它包括分析一个样品所需要的所有的参数：数据采集参数、数据分析参数
和命令行或者宏指令。

点击菜单“方法T编辑方法”开始编辑方法（注意：此时不可以改变方法的参数，可改
,出现
然后会出现下面的窗口让你选择编辑方法的内容:
辑方袪
选择要编辑的项目M
17 OO;
17仗器/甑畫采集参数 17叛餐分析昜数 17运行肘伺表
开始方法编辑后，系统会根据你选择的内容分别依次显示每一部分的具体内容，
点击“确
定”按钮进入下一部分，点击“取消”按钮终止方法编辑。

完成方法编辑后，系统会回到主操作界面， 此时色谱柱已经开始升温， 在图形界面中会 有显
示，如下图中红色圆圈标示区域所示:
确定|
取消|
用鼠标点击复选框选择要编辑的方法的内容，
消”按钮终止方法编辑。

然后点击“确定”按钮开始方法编辑，点击“取
变的参数将在下面特别说明）
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文炖即isJEW （jj 论科（D 方准密库甥 a Ulffiqp
序止匕）Wib
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特别说明：
对于本实验要改变的参数，可以点击化学工作站软件界面中央的图示的进样器、 溶剂系
统、色谱柱、检测器等部分，会弹出各部分参数窗口，此时可以按照实验要求的参数进行调 节（实验参数可
以点击主界面上左边菜单中的“实验数据”按钮察看）。

进样器：
溶剂系统:
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施：
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色谱柱:
检测器:
编辑方法完成后，在启动系统之前，请返回液相色谱仪，打开二元泵系统，调节Purge阀, 观察使回路无汽泡。

第五步：调节Purge阀
点击仪器上的二元泵系统部分（当鼠标移到仪器的各部分时会出现相应的说明），出现如下画面：
图中蓝色方框部分就是 Purge 阀，此时是关闭的，用鼠标点击蓝色方框部分，会出现 阀的放大画面，然后点击 Purge 阀会自动逆时针方向旋转打开
Purge 阀。

打开Purge 阀后，右边的试剂瓶的导管当中会有气泡流出， 待没有气泡再流出之后， 再次点
击Purge 阀会自动逆时针方向旋转关闭 Purge 阀。

然后进行下一步"启 动系统”。

Purge
第六步：启动系统
完成方法编辑后，点击菜单“设备T 系统开”或者图中红色圆圈指示的按钮“开启系统”
启动系统后，在图形界面中会有显示，如下图中红色圆圈标示区域所示:
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方摆叩 序知料 H 閔② 彎止虻■前⑪ 真狀
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同时在色谱峰显示区域开始走基线， 开始的时候系统不稳定， 基线变化很厉害，等到基线走
平稳表示系统稳定后，可以开始进样运行方法。

第七步：进样、运行方法
等到状态指示栏显示“ Ready ”后，表明系统已经准备完毕。

点击菜单“运行控制宀运行方 法”开始进样和分析，或者点击图中红色圆圈所指示的“
Start ”按钮或者按“ F5”键:
色谱峰显示区域
方苗和匹冇程制
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匚…WATM
C:>1 OGB free
5»99序別：
«* DEF_LC. S
开始进样后，在图形界面中会有显示，如下图中红色圆圈标示区域所示:
待色谱图出完后，样品分析完毕。

样品外析芫毕?
第八步：完成实验报告
样品分析完成后，点击化学工作站界面上的红色方框部分, 的
或者点击主界面左边菜单中“实验数据”调出实验报告：
根据得出的保留时间、峰高、半峰宽等实验数据，可以计算分离度等相关参数。

如果计算机安装了打印机，可以点击右上角“打印报表”按钮打印实验报告。

第九步：实验完毕（仿真实验不作要求）
完成方法编辑后，点击菜单“设备T系统关”，系统就会自动关闭，不须人工干预。