Invitrogen – Life Technologies,
LifeSensors
Ni-NTA (6His recomb. enzyme)
Kex-2
-Arg-X-Lys/Arg-Arg▼
Invitrogen – Life Technologies,
Ni-NTA (6His recomb. enzyme)
?Ni-NTA (6His recomb. TEV)
PreScission（PreScission蛋白酶）
Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln▼Gly-Pro
L-E-V-L-F-Q▼G-P
Amersham-Biosciences
GSTrap for GST fusion enzyme
TAGZyme（标记酶）
Factor Xa（Xa因子）
Ile-Glu/Asp-Gly-Arg▼?
I-E/D-G-R▼
Amersham-Biosciences,
New England Biolabs,
Roche
Benzamidine-Agarose
Enterokinase（肠激酶）
Asp-Asp-Asp-Asp-Lys▼
D-D-D-D-K▼
His-tag removal by Exoproteolytic Digestion
Qiagen
Ni-NTA (6His recomb. enzyme)
Intein Site（内含肽）
dithiothreitol cleavage（二硫苏糖醇清除）
New England BiolabsDTT eliminati源自n by dialysis?（透析）
常用融合蛋白切割位点
PROTEASE
COMPANY
Protease Capture
Thrombin（凝血酶）
Leu-Val-Pro-Arg▼Gly-Ser
L-V-P-R▼G-S
Amersham-Biosciences, Novagen,
?SIGMA, Roche
Benzamidine-Agarose
HRV 3C Protease（3c蛋白酶）?
Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln▼Gly-Pro
L-E-V-L-F-Q▼G-P
Novagen ??
Ni-NTA (6His recomb. enzyme)
SUMO Protease
recognize the tertiary structure of the ubiquitin-like (UBL) protein, SUMO
KEX2对arg的专一性高，要求最重要。
Arg前为lys效率最高，不切-Arg-lys，Pro影响KEX2切割
羧肽酶
羧肽酶B可以切割C端的Lys或Arg；羧肽酶A可以切割C端除了Lys、Arg、Pro的氨基酸，但如果倒数第二个氨基酸为Pro两种羧肽酶均不能作用
1.胰蛋白酶属肽链内切酶，能把多肽链中Lys和Arg残基中的羧基侧切断。
New England Biolabs,
?Novagen, Roche
Trypsin Inhibitor-Agarose
TEV protease（烟草蚀纹病毒蛋白酶）
Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln▼Gly
E-N-L-Y–F-Q▼G
Invitrogen – Life Technologies
2.胰凝乳蛋白酶（亦称糜蛋白酶）属肽链内切酶，主要切断多肽链中的芳香族氨基酸（Phe、Trp、Tyr）残基的羧基一侧。
3.羧肽酶（分A和B型），一般的题目中没有特别指明的话就是两种类型的功能都具备，可以从羧基端切除氨基酸（若羧基端的第1个或第2个氨基酸为Pro的则不能切除）。
4.溴化氰处理，专一性的切割甲硫氨酸羧基端的肽键。