吐哈石油医院2015 年消毒灭菌效果监测实施方案医院消毒是预防医院内感染的重要措施之一，消毒效果的监测是评价其消毒设备运转是否正常、消毒药剂是否有效、消毒方法是否合理、消毒效果是否达标的唯一手段。

为规范消毒效果监测，依据卫计委《医院感染管理办法》、《医院感染监测规范》、《医院消毒技术规范规范（ 2012版）》特制定哈密地区中心医院消毒灭菌效果监测实施方案。

一、监测项目：1. 空气消毒效果的监测；2. 手和物体表面的消毒效果监测；3. 牙科用水的监测；4. 内镜消毒及灭菌效果的监测；5. 使用中消毒剂及灭菌剂的监测；6. 压力蒸汽灭菌效果监测；7. 血液透析用水和透析液的监测8. 灭菌物品监测二、监测单的填写：1. 空气监测：采样地点、样品名称（空气）、采样时间、采样人，检验项目：细菌总数、致病菌（如金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌等）。

2. 物表监测：采样地点、物表名称（注明所采物品的名称和部位）、采样人、采样时间、检验项目、细菌总数、致病菌（如金黄色葡萄球菌等）。

3. 手监测：采样地点、被监测人姓名、采样人、采样时间、检验项目：细菌总数、致病菌（如金黄色葡萄球菌等）。

4. 其他物品的监测：采样地点、样品名称、检验项目、采样人、采样时间等。

（一）空气消毒效果的监测1. 监测科室：非洁净手术室、产房、血透室、消毒供应室等。

2. 监测频次：重点科室每季度一次，如有疑似感染发生随时采样。

3. 采样（沉降法）⑴ 采样时间：空气消毒后 4 小时内、操作前。

⑵ 平板暴露法：（非洁净手术室）暴露前先检查平板是否污染，是否有气泡及霉点。

将普通营养琼脂平板（直径为9cm）放在室内各采样点处，采样高度为距地面0.8m-- 1.5m，采样时将平板盖打开，斜扣放于平板旁，暴露15min，在放置、收取平皿时，手不能在暴露平皿的正上方移动。

⑶布点方法：室内面积w 30吊，设内、中、外对角线上的3点，内、外点布点部位距墙1M处；室内面积〉30斥，设4角及中央共5点，4角的布点部位距图1室内面积＜30m2布点图图2 室内面积〉30m2的布点墙壁1m处图4. 注意事项⑴ 采样前，关好门、窗，在无人走动的情况下，静止 10min进行采样⑵ 平板摆放如取一条对角线，避免离门近的一条。

⑶ 工作人员不要靠近自动门，以免影响监测结果。

5. 结果计算及报告⑴ 结果计算：空气中菌落总数=cfu （皿、暴露时间）⑵ 监测结果的判定及结果报告格式（见表 1）样品名称采样地点检验结果标准细菌总数致病菌细菌总数致病菌II类环境某某空气cfu/ 15min . 90 皿未检出<4 cfu/15min . 90 皿不得检出III类环境某某空气cfu/5min . 90 皿未检出<4 cfu/5min . 90 皿不得检出⑶注意事项检测结果为“ 0”时：细菌菌落总数应报告为0cfu/分钟数.皿（二）手、物体表面消毒效果监测1、监测重点科室：手术室、产房、导管室、重症监护病房、新生儿室、母婴室、血液透析病房、感染疾病科、口腔科、消毒供应中心等。

2、监测频次⑴ 重点科室物表每月监测，工作人员手每季度监测。

⑵有医院感染流行，怀疑与手卫生或医院环境卫生学因素有关时，应及时进行监测。

3、手消毒效果的监测⑴采样时间：在接触患者、进行诊疗活动前采样。

⑵采样方法：被检人五指并拢，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子在双手指屈面从指根到指端往返涂擦2次（一只手涂擦面积约30cm2），并随之转动采样棉拭子，剪去操作者手接触部位，将棉拭子投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，立即送检。

⑶检测方法：将采样管用力振打80次，用无菌吸管吸取1.0ml待检样品接种于灭菌平皿，每一样本接种2个平皿，平皿内加入已溶化的45C-48 C的营养琼脂 15ml-18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，置36C± 1C温箱培养48h，计数菌落数。

⑷结果判定及报告2 物体表面细菌菌落总数（cfu/cm ）=平皿上菌落的平均数采样液稀释倍数采样面积（cm2）①细菌菌落总数计算方法：细菌菌落总数（cfu/cm2）=平板上菌落数x稀释倍数/采样面积（co l）采样液的稀释倍数为10②判定标准及报告格式：一般医护人员手不得检出大肠杆菌、金黄色葡萄球菌；I类、U类区域工作人员手不得检出铜绿假单胞菌；母婴同室、新生儿室及儿科病房工作人员手不得检出沙门氏菌，溶血性链球菌。

结果报告及判定标准见表2。

检测结果为“ 0”或细菌菌落总数不足“ 1 ”时：应报告为v 1cfu/ cmf;当细菌菌落总数有小数时，按四舍五入计数。

女口 1.2cfu/ cmf报1cfu/ cm2,1.5cfu/ cvm 报 2cfu/ cmf。

⑸注意事项：①洗手后不要接触未消毒的物品。

②用消毒巾擦干，或控干手上的水分。

4. 物体表面消毒效果的监测⑴ 物体表面的采样：用5cm x 5cm的灭菌规格板，放在被检物体表面，采样面积》100 cm l，连续采样4个，用浸有含相应中和剂或生理盐水采样液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返涂擦各5次，并随之转动棉拭子，剪去手接触部位后，将棉拭子投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内。

门把手等不规则物体表面用棉拭子直接涂擦采样。

⑵注意事项①被采样本表面积v 100cm取全部表面；被采样本表面积》100c卅，取100c卅。

②不规则物体表面的采样，尽量准确估算实际面积。

③小型物体表面的结果计算，用cfu/件表示，（国家现无评价标准，可估计面积计算菌落总数，参照一般物表的标准进行评价）。

④若消毒因子为化学消毒剂，采样液中应加入相应中和剂。

⑶结果判定及报告①结果计算：采样液的稀释倍数为10;物体表面面积》100cm的物表，按照100cm2计算②判定标准及报告格式：样品名称采样地点检验结果标准一般的物体表面不得检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌；母婴同室、早产 儿室、新生儿室及儿科病房的物体表面不得检出沙门氏菌。

结果报告及判定标 准见表3。

表3 物体表面的结果报告及判定标准样品名称采样地点检验结果 标准 细菌总数致病菌细菌总数致病菌I 类环境w 5 cfu/ 2 cmn 类环境w 5 cfu/2cm 不得检出治疗台面某某科cfu/ cm 未检出川类环境w10 cfu/ cmw 类环境w 15 cfu/ 2 cm检测结果为“ 0”或细菌菌落总数不足“ 1 ”时：应报告为v 1cfu/ cm 2；当 细菌菌落总数有小数时，按四舍五入计数。

女口 1.2cfu/ cmf 报1cfu/ cn i ,1.5cfu/ cn i报 2cfu/ cnf 。

（三）灭菌物品的监测1、 灭菌物品不做常规监测，如怀疑医院感染与灭菌物品有关时，可按下列方 法进行监测。

2、 采样:⑴ 采样时间：在灭菌处理后，存放有效期内采样。

⑵采样方法：用无菌操作打开器械包（敷料包），用沾有无菌洗脱液的棉拭子 反复涂抹手术钳、镊子等医疗器械（手术敷料），将棉拭子投入10ml 无菌洗脱 液中，将采样液混匀。

⑶ 检验方法：吸取被检样液1.0mL 接种15m 需一厌氧培养管（共6管，其中1 管作阳性对照），接种量为1ml/管，30C -35 C 培养5天。

再取1.0mL 接种15m 霉菌 培养管（共4管，其中1管作阳性对照）25C 培养7天。

⑷ 结果判定：阳性对照在24h 内应有菌生长，阴性对照在培养期间应无菌生 长，如需-厌氧菌及霉菌培养管内均为澄清或虽显混浊但经证明并非有菌生长， 判为灭菌合格；如需-厌氧菌及霉菌培养管中任何1管显混浊并证实有菌生长，应 重新取样，分别同法复试2次，除阳性对照外，其他各管均不得有菌生长，否 则判为灭菌不合格。

⑸注意事项：① 送检时间不得超过6h ，若样品保存于0 C 〜4C,则不得超过24h 。

② 灭菌物品采样，应严格遵守无菌操作，避免微生物污染。

③ 无菌检验应该在洁净度为100级单向流空气区域内进行采样，对单向流向空 气区域及工作台面，必须进行洁净度验证。

4.检测结果判定及报告可参考以下格式表（四）内镜消毒、灭菌效果的监测1. 监测时间：每季度进行2. 采样⑴ 采样时间：在消毒灭菌后、使用前进行采样。

⑵采样方法：消毒后内镜内腔面：取清洗消毒后内镜，采用无菌注射器抽取50ml含相应中和剂的洗脱液，从内镜活检口注入冲洗内镜管路，并全量收集进行检验。

3. 检验方法：吸取1.0mL被检样液接种平皿；将剩余洗脱液在无菌条件下采用滤膜（0.45微米）过滤浓缩，将滤膜接种于营养琼脂平板上。

4. 结果判定及报告菌落数/镜=2个平皿菌落数的平均值X 20⑴消毒后的内镜：细菌总数w 20cfu/件，并未检出致病菌为合格。

表5 消毒后内镜的检验结果及报告注：致病菌指金黄色葡萄球菌、沙门氏菌，并不得检出大肠杆菌。

⑵ 平板菌落数为“ 0”时，细菌菌落总数应报告为v 10cfu/件。

⑶ 灭菌后内镜：未检出任何微生物为合格。

（五）使用中消毒、灭菌剂的监测1. 监测时间⑴化学监测：根据消毒、灭菌剂的性能设定监测时间，如含氯消毒剂、过氧乙酸等易挥发产品每日监测；戊二醛监测每周不少于一次。

⑵生物监测：消毒剂与灭菌剂每季度一次。

2. 结果的报告可参考以下格式：表6戊二醛有效含量的结果报告3. 使用中消毒液染菌量测定⑴监测样品：碘伏、安尔碘、戊二醛、含氯消毒液等。