土壤硝态氮的测定
A 紫外分光光度法
1、方法提要
土壤浸出液中的NO-，在紫外分光光度计波长210n m处有较高吸光度，而浸出液中的其它物质，除OH、CO2-、HCO、NO-和有机质等外，吸光度均很小。

将浸出液加酸中和酸化，即可消除OH-、CO2-、HCO的干扰。

NO■■—般含量极少，也很容易消除。

因此，用校正因数法消除有机质的干扰后，即可用紫外分光光度法直接测定NQ「的含量。

待测液酸化后，分别在210nm和275nm处测定吸光度。

阳。

是NQ-和以有机质为主的杂质的吸光度；A275只是有机质的吸光度，因
为NQ-在275nm处已无吸收。

但有机质在275nm处的吸光度比在210nm处的吸光度要小R倍，故将A275校正为有机质在210nm处应有的吸光度后，从A。

中减去，即得NQ-在210nm处的吸光度（△A）。

2、适用范围
本方法适用于各类土壤硝态氮含量的测定。

3、主要仪器设备
紫外—可见分光光度计；
石英比色皿；
往复式或旋转式振荡机，满足180r/min ±20r/min 的振荡频率或达到相同效果；
塑料瓶：200mL。

4、试剂
溶液(1 : 9):取10mL浓硫酸缓缓加入90mL水中。

氯化钙浸提剂[c(CaCI 2)=・L-1]:称取2.2g氯化钙(CaCI? 化学纯) 溶于水中，稀释至1L。

硝态氮标准贮备液[p (N)=100mg - L-1]:准确称取0.7217g经105〜110C烘2h的硝酸钾(KNQ，优级纯)溶于水，定容至1L，存放于冰箱中。

硝态氮标准溶液[p (N)=10mg - L-1]:测定当天吸到硝态氮标准贮备液于100mL容量瓶中用水定容。

5、操作步骤
称取10.00g 土壤样品放入200mL塑料瓶中，加入50mL氯化钙浸提剂，盖严瓶盖，摇匀，在振荡机上于20 °C ~25 C振荡30min(180r/min ±20r/min) ，干过滤。

吸取待测液于50mL三角瓶中，加：9 H2SQ溶液酸化，摇匀。

用滴管将此液装入1cm光径的石英比色槽中，分别在210nm和275nm 处测
读吸光值(A210和A275)，以酸化的浸提剂调节仪器零点。

以NQ 「
的吸光值( △A) 通过标准曲线求得测定液中硝态氮含量。

空白测定除不
加试样外，其余均同样品测定。

NQ-的吸光值(△A)可由下式求得：
△A= A 210- A 275 X R
式中R 为校正因数，是土壤浸出液中杂质( 主要是有机质) 在
210nm和275nm处的吸光度的比值。

其确定方法为：
A210是波长210nm处浸出液中NQ-的吸收值(A210硝)与杂质(主要是有机质)的吸收值(A210杂)的总和，即A210= A 210 硝+ A210 杂，得出A210 杂= A 210-
A 210硝。

选取部分土样用酚二磺酸法测得NQ3 —N 的含量后，
根据土液比和紫外法的工作曲线，即可计算各浸出液应有的 值，即可得出A 210杂。

A 275是浸出液中杂质(主要是有机质)在275nm 处的吸收值(因为 NO -在
该波长处已无吸收)，它比A 210杂小R 倍，即A 210杂=R ・A 275,得 出校正因数R=A io 杂/ A 2750
各不同区域可根据多个土壤测定 R 值的统计平均值，作为其他
土壤测试NQ - — N 的校正因数，其可靠性依从于被测土壤的多少， 测定的土壤越多，可靠性越大。

标准曲线的绘制：分别吸取10mg ・L -1NQ 「一N 标准溶液0 ......... ,
用氯化钙浸提剂定容至 50mL 即为0 ............... L 的标准系列溶液。

各 取于50mL 三角瓶中，分别加 1mL1: 9 H 2SQ 溶液摇匀后测 阳。

，计 算A 210对NQ - — N 浓度的回归方程，或者绘制工作曲线。

6、计算结果
土壤硝态氮， mg- kg -1= (N)VD
式中：p (N)—查标准曲线或求回归方程而得测定液中
NQ - — N 的质量浓度，mg- L -1;
V —浸提剂体积，mL(50mL);
D —浸出液稀释倍数，或不稀释则
D=1; m —土壤质量，g 。

7、注释
⑴土壤硝态氮含量一般用新鲜样品测定， 氮反映无机氮含量，则可用风干样品测定。

⑵一般土壤中 NQ -含量很低，不会干扰
A 210 硝 如需以硝态氮加铵态
NQ -的测定。

如果NQ -
含量高时，可用氨基磺酸消除(HNO2+NH2SO3H=N2+H2SO4+H2O) ，它在
210nm处无吸收，不干扰NQ-测定。

⑶浸出液的盐浓度较高，操作时最好用滴管吸取注入槽中，尽量避免溶液溢出槽外，污染槽外壁，影响其透光性。

⑷大批样品测定时，可先测完各液(包括浸出液和标准系列溶
液)的A210值，再测A275值，以避免逐次改变波长所产生的仪器误差。

⑸如需同时测定土壤NH+—N,可选用2 mol • L-1KCI或1
mol • L-1NaCI溶液制备待测液。

但2 mol • L-1 KCI溶液本身在210nm 处吸光度较高，因此同时测定土壤NH+—N和NO「一N时，可选用吸光度较小的1 mol • L-1NaCI溶液为浸提剂。

⑹如果吸光度很高(A > 1时)，可从比色槽中吸出一半待测液，再加一半水稀释，重新测读吸光度，如此稀释直至吸光度小于。

再按稀释倍数，用氯化钙浸提剂将浸出液准确稀释测定。

⑺根据北京和河北石灰性15 个土壤样品的测定结果，校正因
素(R)的平均值为，不同土类的R值略有差异，各地可根据主要土
壤情况进行校验，求出当地土壤的R值。