分布
❖ 同位素标记物的组织分布试验，应提供标记药物的放化 纯度、标记率（比活性）、标记位置、给药剂量等参数； 提供放射性测定所采用的详细方法，如分析仪器、本底 计数、计数效率、校正因子、样品制备过程等；提供采 用放射性示踪生物学试验的详细过程，以及在生物样品 测定时对放射性衰变所进行的校正方程等。尽可能提供 给药后不同时相的整体放射自显影图像。
血药浓度-时间曲线
采样点
➢ 给药前需要采血作为空白样品，观察血浆的基质效应； ➢ 为获得一个完整的血药浓度-时间曲线，采样时间点
的设计应兼顾药物的吸收相、平衡相（峰浓度附近） 和消除相。一般在吸收相至少需要 2-3 个采样点， 对于吸收快的血管外给药的药物，应尽量避免第一个 点是峰浓度（Cmax）；在Cmax 附近至少需要 3 个采样点；消除相需要 4-6 个采样点；
➢ 各个（和各组）受试动物血药浓度达稳态后末次给药的 血药浓度-时间数据和曲线，及其平均值、标准差和曲线；
➢ 比较首次与末次给药的血药浓度-时间曲线和有关参数； ➢ 各个（和各组） 平均稳态血药浓度及标准差。
吸收
➢ 对于经口给药的新药，应进行整体动物试验，尽可能 同时进行血管内给药的试验，提供绝对生物利用度。 如有必要，可进行在体或离体肠道吸收试验以阐述药 物吸收特性。
排泄
❖ 每个时间点至少有 5 只动物的试验数据。 ❖ 应采取给药前尿及粪样，并参考预试验的结果，设
计给药后收集样品的时间点，包括药物从尿或粪中 开始排泄、排泄高峰及排泄基本结束的全过程。
排泄
❖ 胆汁排泄：有的药物经胆汁排泄在肠中再次被吸收形成 肝肠循环，可使药物作用时间延长。一般用大鼠在乙醚 麻醉下作胆管插管引流，待动物清醒后给药，并以合适 的时间间隔分段收集胆汁，进行药物测定。
血药浓度-时间曲线
采样点
➢ 整个采样时间至少应持续到 3-5 个半衰期，或持续到 血药浓度为 Cmax 的 1/10-1/20；
➢ 为保证最佳采样点，建议在正式试验前，选择 2-3 只 动物进行预试验，然后根据预试验的结果，审核并修 正原设计的采样点。
血药浓度-时间曲线
➢ 口服给药：一般在给药前应禁食 12 小时以上，
药物选择
对于仿制药品申请，受试药品通常与可从市场 获得的参比药品相应的剂型比较。该药品已有多个上 市剂型时，如果能在市场上获得，推荐使用该药品最 初批准的剂型（它被用于临床药效学和安全性试验） 作为参比药品。
剂量选择
动物体内药代动力学研究应设置至少三个剂量组， 其高剂量最好接近最大耐受剂量，中、小剂量根据动 物有效剂量的上下限范围选取。主要考察在所试剂量 范围内，药物的体内动力学过程是属于线性还是非线 性，以利于解释药效学和毒理学研究中的发现，并为 新药的进一步开发和研究提供信息。
与血浆蛋白的结合
研究药物与血浆蛋白结合试验可采用多种方法，如 平衡透析法、超过滤法、分配平衡法、凝胶过滤法、光 谱法等。
根据药物的理化性质及试验室条件，可选择使用一种 方法进行至少 3 个浓度（包括有效浓度）的血浆蛋白结 合试验，每个浓度至少重复试验三次，以了解药物的血 浆蛋白结合率是否有浓度依赖性。
➢ 对于其他血管外给药的药物及某些改变剂型的药物， 应根据立题目的，尽可能提供绝对生物利用度。
分布
❖ 选用大鼠或小鼠做组织分布试验较为方便。选择一个剂量 （一般以有效剂量为宜）给药后，至少测定药物在心、肝、 脾、肺、肾、胃肠道、生殖腺、脑、体脂、骨骼肌等组织 的浓度，以了解药物在体内的主要分布组织。
生物样品的药物分析方法
生物样品的药物分析方法包括色谱法、放射性核素 标记法、免疫学和微生物学方法。应根据受试物的性质， 选择特异性好、灵敏度高的测定方法。色谱法包括高效 液相色谱法（HPLC）、气相色谱法（GC）和色谱-质 谱联用法（如 LC-MS，LC-MS/MS，GC-MS，GCMS/MS 方法）。在需要同时测定生物样品中多种化合 物的情况下，LC-MS/MS 和 GC-MS/MS 联用法在特 异性、灵敏度和分析速度方面有更多的优点。
生物样品分析方法的建立和确证
❖ 准确度：在确定的分析条件下，测得值与真实值的接近程度。 ❖ 精密度：在确定的分析条件下，相同介质中相同浓度样品的一系列
测量值的分散程度。 ❖ 特异性：分析方法测量和区分共存组分中分析物的能力。这些共存
组分可能包括代谢物、杂质、分解产物、介质组分等。 ❖ 灵敏度：生物样品分析方法的灵敏度通过标准曲线来表征，主要包
❖ 记录药物自粪、尿、胆汁排出的速度及总排出量（占总
给药量的百分比），提供物质平衡的数据。
与血浆蛋白的结合
药物与蛋白的结合会明显影响药物分布与消除的动 力学过程，并降低药物在靶部位的作用强度。对蛋白结 合率高于 90%以上的药物，建议开展体外药物竞争结 合试验，即选择临床上有可能合并使用的高蛋白结合率 药物，考察对所研究药物蛋白结合率的影响。
试验动物
一般采用成年和健康的动物。常用动物有小鼠、大鼠、 兔、豚鼠、犬、小型猪和猴等。
动物选择的一般原则如下:
➢ 首选动物：尽可能与药效学和毒理学研究一致； ➢ 尽量在清醒状态下试验，动力学研究最好从同一动物多次采样； ➢ 创新性的药物应选用两种或两种以上的动物，其中一种为啮齿
类动物；另一种为非啮齿类动物（如犬、小型猪或猴等）。其 他药物，可选用一种动物，建议首选非啮齿类动物 ； ➢ 经口给药不宜选用兔等食草类动物。
血药浓度-时间曲线
多次给药药代动力学研究
当药物在临床上将连续多次应用时，需明确多次 给药的药代动力学特征。根据研究目的，应考察药物 多次给药后的稳态浓度（Css），药物谷、峰浓度的 波动系数（DF），是否存在药物蓄积作用和/或药酶 的诱导作用。
血药浓度-时间曲线
单次给药
➢ 各个（和各组）受试动物的血药浓度-时间数据及曲 线和其平均值、标准差及曲线；
➢ 各个（和各组）受试动物的主要药代动力学参数及平 均值、标准差；
➢ 对受试物单次给药非临床药代动力学的规律和特点进 行讨论和评价。
血药浓度-时间曲线
多次给药
➢ 各个（和各组）受试动物首次给药后的血药浓度-时间数 据及曲线和主要药代动力学参数；
➢ 各个（和各组）受试动物的 3 次稳态谷浓度数据及平均 值、标准差；
给药途径
所用的给药途径和方式，应尽可能与临床用药一 致。常用的给药途径有经口给药（口服、灌胃）、皮 下注射、腹腔注射和静脉注射。另外还有脑内给药、 直肠内给药、经皮肤给药等给药方法。
研究项目
❖ 血药浓度-时间曲线 ❖ 吸收 ❖ 分布 ❖ 排泄 ❖ 与血浆蛋白的结合 ❖ 生物转化 ❖ 对药物代谢酶活性的影响
血药浓度-时间曲线
受试动物数：
➢ 血药浓度-时间曲线的每个采样点不少于 5 个数据，最 好从同一动物个体多次取样。
➢ 如由多只动物的数据共同构成一条血药浓度-时间曲线， 应相应增加动物数，以反映个体差异对试验结果的影响。
➢ 建议受试动物采用雌雄各半，如发现动力学存在明显的 性别差异，应增加动物数以便认识受试物的药代动力学 的性别差异。对于单一性别用药，可选择与临床用药一 致的性别。
分布
分布
Hale Waihona Puke 排泄❖ 尿和粪的药物排泄：一般采用小鼠或大鼠，将动物放入 代谢笼内，选定一个有效剂量给药后，按一定的时间间 隔分段收集尿或粪的全部样品，测定药物浓度。粪样品 凉干后称重（不同动物粪便干湿不同），按一定比例制 成匀浆，记录总体积，取部分样品进行药物含量测定。 计算药物经此途径排泄的速率及排泄量，直至收集到的 样品测定不到药物为止。
❖ 介质效应：由于样品中存在干扰物质，对响应造成的直接或间接的 影响。
❖ 分析批：包括待测样品、适当数目的标准样品和质控样品的完整系 列。一天内可以完成几个分析批，一个分析批也可以持续几天完成。
生物样品分析方法的建立和确证
❖ 标准样品：在生物介质中加入已知量分析物配制的样品，用于建 立标准曲线，计算质控样品和未知样品中分析物浓度。
药代动力学
PPT内容
药物选择
受试物：应提供受试物的名称、剂型、批号、 来源、纯度、保存条件及配制方法。使用的受试物 及剂型应尽量与药效学或毒理学研究的一致，并附 研制单位的质检报告。
参比物：必须引用参比药品的资料，该药品已经 在中国获得上市授权，具有全面的资料。申请者应 该对参比药品的选择说明理由。
❖ 质控样品：即 QC 样品，系指在生物介质中加入已知量分析物 配制的样品，用于监测生物分析方法的重复性和评价每一分析批 中未知样品分析结果的完整性和正确性。
生物样品分析方法的建立和确证
由于生物样品取样量少、药物浓度低、内源性物质 （如无机盐、脂质、蛋白质、代谢物）及个体差异等多 种因素影响生物样品测定，所以必根据待测物的结构、 生物介质和预期的浓度范围，建立适宜的生物样品析方 法，并对方法进行确证。
括定量下限和浓度-响应函数。 ❖ 重现性：不同试验室间测定结果的分散程度，以及相同条件下分析
方法在间隔一段短时间后测定结果的分散程度。 ❖ 稳定性：一种分析物在确定条件下，一定时间内在给定介质中的化
学稳定性。
生物样品分析方法的建立和确证
❖ 标准曲线：试验响应值与分析物浓度间的关系。应采用适当的加 权和统计检验，用简单的数学模型来最适当地描述。标准曲线应 是连续的和可重现的，应以回归计算结果的百分偏差最小为基础。
以排除食物对药物吸收的影响。另外在试验中应注意 根据具体情况统一给药后禁食时间，以避免由此带来 的数据波动及食物的影响，一般可以在口服给药3-4 小时后就可以给水给粮。 ➢ 注射给药：饮食饮水对血液中药物影响不大。
血药浓度-时间曲线
药代动力学参数
根据试验中测得的各受试动物的血药浓度-时间数据，求 得受试物的主要药代动力学参数。静脉注射给药，应提供 t 1/2（消除半衰期）、Vd（表观分布容积）、AUC（血 药浓度-时间曲线下面积）、CL（清除率）等参数值；血 管外给药， 除提供上述参数外, 尚应提供Cmax和Tmax （达峰时间）等参数，以反映药物吸收的规律。另外，提 供统计矩参数，如: MRT（平均滞留时间）、AUC (0-t) 和AUC (0-∞)等，对于描述药物药代动力学特征也是有意 义的。