6、举例说明蛋白质磷酸化如何影响基因表达。
①以络氨酸受体蛋白激酶磷酸化导致细胞癌变为例说明： 络氨酸受体蛋白激酶与表皮生长因子(EGF)相结合后，刺激了该受体蛋白的 激酶活性，引发一系列生理反应。原癌蛋白 ErbB 虽然没有正常络氨酸受体蛋
建议白收激酶藏的胞下外载结构本域，文其，胞内以结构便域随却具时有蛋学白习激酶！活性，刺激细胞持久分裂，
上以帮助这些多肽正确折叠、转运或防止它们聚集的蛋白质，其本身不参 与终产物的形成。 21、信号肽：常指新合成多肽链中用于指导蛋白质跨膜转移的 N-末端氨基酸序 列（有时不一定在 N 端）。 22、核定位序列：蛋白质中的一种常见的结构域，通常为一短的氨基酸序列， 它能与入核载体相互作用，将蛋白质运进细胞核内。 23、操纵子：是基因表达的协调单位，由启动子、操纵基因及其所控制的一组 功能上相关的结构基因所组成。操纵基因受调节基因产物的控制。 24、弱化子：当操纵子被阻遏，RNA 合成被终止时，起终止转录信号作用的那 一段核苷酸被称为弱化子。 25、安慰诱导物：如果某种物质能够促使细菌产生酶而本身又不被分解，这种 物质被称为安慰诱导物，如 IPTG（异丙基- β –D-硫代半乳糖苷）。 26、葡萄糖效应（代谢物阻遏效应）：有葡萄糖存在时，不论诱导物存在与否， 操纵子都没有转录活性，结构基因都不表达。 27、顺式作用元件：影响自身基因表达活性的非编码 DNA 序列。 28、反式作用因子：能直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列 上，参与调控靶基因转录效率的蛋白质。 29、基因家族：在基因组进化中，一个基因通过基因重复产生了两个或更多的 拷贝，这些基因即构成一个基因家族，是具有显著相似性的一组基因，编码相 似的蛋白质产物。 30、断裂基因：在一个结构基因中，编码某一蛋白质不同区域的各个外显子并 不连续排列在一起，而是常常被长度不等的内含子所隔离，形成镶嵌排列 的断裂方式。所以真核基因被称为断裂基因。
建议18收、S藏D 序下列：载mR本NA文中用，于以结合便原核随生时物核学糖体习的！序列。30S 亚基通过其
16SrRNADE 3'端与 mRNA5’端起始密码子上游碱基配对结合。这个富嘌呤区 被命名为 SD 序列。 19、同工 tRNA：代表同一种氨基酸的 tRNA 称为同工 tRNA。 20、分子伴侣：它是细胞中一类能够识别并结合到不完全折叠或搭配的蛋白质
12.SNP 技术是指？
SNP 技术：是单核苷酸多态性，指基因组 DNA 序列中由于单个核苷酸 （A，T，C 和 G）的突变而引起的多态性。一个 SNP 表示在基因组某个位点 上一个核苷酸的变化，这种变化可能是转换，也可能是颠换。 SNP 技术即 SNP 检测技术，因为只有进行了 DNA 序列分析才能确认所发现的 SNP，所以目前国际上最常见的仍然是通过 DNA 测序法获得新的 SNP。 基因分型是其中最常见的，它是指利用数据库中已有的 SNP 进行特定人群的序 列和发生频率的研究，主要包括基因芯片技术、Taqman 技术、分子信标技术和 焦磷酸测序法等。
7.如何克隆一个新基因（cDNA 的中间片段）？
在已知 cDNA 序列基础上克隆 5’或 3’端缺失序列的技术。根据已知序列设 计基因片段内部特异引物，由该片段向外侧进行 PCR 扩增得到目的序列。此技 术为 RACE 技术。 步骤：
1. 在反转录酶的作用下，以基因片段内部特异性引物（GSP1）启始 cDNA 第一条链合成。
8.肽链 每个循环包括：AA-tRNA 与核糖体结合、 肽键的生成 和 移位。 1.AA-tRNA 与核糖体结合需要消耗 GTP，并需 EF-Tu、EF-Ts 两种延伸因子 2.肽键的生成是由转肽酶/肽基转移酶催化 3.移位，核糖体向 mRNA3’端方向移动一个密码子。 4.需要消耗 GTP，并需 EF-G 延伸因子
2. RNase 降解模板链 mRNA，纯化第一链。 3. 用末端转移酶在 cDNA 链 3’端加入连续的 dCTP，形成 oligodc 尾巴。 4. 以连有 oligo dC 的锚定引物和基因片段内部特异引物 GSP2 进行 nest
PCR 扩增，得到目的基因 5'端片段并检测。
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1、 染色体：是指在细胞分裂期出现的一种能被碱性染料强烈染色，并具有一 定形态、结构特征的物体。 携带很多基因的分离单位。只有在细胞分裂中 才可见的形态单位。
2、染色质：是指细胞周期间期细胞核内由 DNA、组蛋白、非组蛋白和少量 RNA 组成的复合结构，因其易被碱性染料染色而得名。
2、比较 PCR 扩增和细胞内 DNA 复制的异同。
PCR 技术
DNA 生物复制
环境 体外复制， 加热，90 摄氏度左右 体内，温和的环境
模板 DNA 单链
DNA 单链
原料 4 种脱氧核糖核苷酸
4 种脱氧核糖核苷酸
酶 主要是 DNA 聚合酶
DNA 解旋酶，DNA 聚合酶，
DNA 连接酶等各种酶
引物 需要人工合成的引物 步骤 变性--退火--延伸 原则 碱基互补配对原则
13、基因敲除技术的基本原理。
基本原理：基因敲除又称基因打靶，该技术通过外源 DNA 与染色体 DNA 之间 的同源重组，进行精确的定点修饰和基因改造，具有专一性强、染色体 DNA 可与目的片段共同稳定遗传等特点。
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14.RNAi 技术的基本原理。
基本原理：RNAi 技术利用双链小 RNA 高效、特异性降解细胞内同源 mRNA 从而阻断靶基因表达，使细胞出现靶基因缺失的表型。
11、真核生物和原核生物在翻译的起始过程有哪些区别？
建议真收核生藏物：下起载始密本码子文A，UG以所便编随码的时氨基学酸习是 M！et，起始 AA-tRNA 为 Met-
tRNAMet。 原核生物：起始密码子 AUG 所编码的氨基酸并不是 甲硫氨酸本身, 而是甲 酰甲硫氨酸（fMet），起始 AA-tRNA 为 fMet-tRNAfMet
错配碱基 3'下游端开始切除单链 DNA 直到原切口，并在 Pol Ⅲ和 SSB 的作用 下合成新的子链片段。若错配碱基位于切口的 5'上游端，则在 DNA 外切酶Ⅰ
建议或收Ⅹ的藏作用下下载，从本错配文碱，基 5以'上游便端随开始时切除学单习链 D！NA 直到原切口，再合成
新的子链片段。
4.图示简要说明真核生物启动子的结构。
自己合成引物成分 解旋-起始-延伸-结束
碱基互补配对原则
3、细胞通过哪几种修复系统对 DNA 损伤进行修复？简述 DNA 错配修复的过
程。
DNA 修复系统
功能
错配修复
恢复错配
切除修复(碱基、核 切除突变的碱基和核甘酸片断
甘酸）
重组修复
复制后的修复，重新启动停滞的复制叉
DNA 直接修复
修复嘧啶二体或甲基化 DNA
10、真核生物的原始转录产物需要经过哪些加工才能成为成熟的
mRNA？
真核生物的原始转录产物需要经过的加工过程有： 1、在 5’端加帽。5’端的一个核苷酸总是 7-甲基鸟嘌呤核苷三磷酸（m7Gppp）。 mRNA5’端的这种结构称为帽子结构（cap）。 2、3’端加尾，多聚腺苷酸尾巴提高了 mRNA 在细胞质中的稳定性，由 poly（A）聚合酶催化。 3、RNA 的剪接。参与 RNA 剪接的物质有 snRNA（核内小分子 RNA）、 snRNP（与 snRNA 结合的核蛋白） 4、RNA 的编辑
诱发癌变。 ②以 cAMP 介导的蛋白质磷酸化为例说明 许多转录因子都可以通过 cAMP 介导的蛋白质磷酸化过程而被激活
这类基因 5’区有一个或数个 cAMP 应答元件，基本序列为 TGACGTCA 膜上受体与配体结合引起受体构象变化，并与 G 结合，激活与膜相关的腺苷酸 环化酶，导致胞内 cAMP 水平上升，活化 A 激酶，释放催化亚基入核内，实施 底物磷酸化。被磷酸化的底物可作为转录激活因子诱发基因转录。
3、核小体：染色质的基本结构亚基，由约 200 bp 的 DNA 和组蛋白八聚体所组 成
4、C 值谬误：一个有机体的 C 值与它的编码能力缺乏相关性称为 C 值矛盾 5、半保留复制：由亲代 DNA 生成子代 DNA 时，每个新形成的子代 DNA 中，
一条链来自 6、亲代 DNA，而另一条链则是新合成的，这种复制方式称半 保留复制 6、DNA 重组技术又称基因工程，目的是将不同的 DNA 片段（如某个基因或基 因的一部分）按照人们的设计定向连接起来，在特定的受体细胞中与载体 同时复制并得到表达，产生影响受体细胞的新的遗传性状。 7、半不连续复制：DNA 复制时其中一条子链的合成是连续的，而另一条子链 的合成是不连续的，故称半不连续复制。 8、引发酶：此酶以 DNA 为模板合成一段 RNA,这段 RNA 作为合成 DNA 的引 物（Primer)。 实质是以 DNA 为模板的 RNA 聚合酶。 9、转坐子：存在与染色体 DNA 上可自主复制和位移的基本单位。 10、多顺反子：一种能作为两种或多种多肽链翻译模板的信使 RNA，由 DNA 链上的邻近顺反子所界定。 11、基因：产生一条多肽链或功能 RNA 所必需的全部核甘酸序列。 12、启动子：指能被 RNA 聚合酶识别、结合并启动基因转录的一段 DNA 序列。
SOS 系统
DNA 的修复，导致变异
错配修复的过程：a、发现碱基错配；在水解 ATP 的作用下，b、MutS,MutL 与碱基错配位点的 DNA 双链结合；c、Muts-MutL 在 DNA 双链上移动，发现
甲基化 DNA 后由 MutH 切开非甲基化的子链；d、当错配碱基位于切口 3'下游 端时，在 MutL-MutS、解链酶Ⅱ、DNA 外切酶Ⅵ或 RecJ 核酸酶的作用下，从
13、增强子：能强化转录起始的序列 14、全酶：含有表达其基础酶活力所必需的 5 个亚基的酶蛋白复合物，拥有 σ 因子。