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酪蛋白的制备
实验目的
掌握等电点沉淀法提取蛋白质的方法
学习从牛乳中制备酪蛋白的原理和方法
实验原理
牛乳中主要的蛋白质是酪蛋白，它是一
些含磷蛋白质的混合物，等电点为4.7利 用蛋白质在等电点时溶解度最低的性质， 将牛乳的PH调至4.7时，酪蛋白就沉淀出 来，用乙醇洗涤沉淀物，除去脂类杂质 后便可得到纯化的酪蛋白。
清液
沉淀
95%乙醇4ml洗涤离心， 10000转/分，5分钟(除脂)
清液
沉淀
乙醚 4ml 洗涤离心， 10000 转 / 分，5分钟(脱水)
清液
沉淀 0.1NNaOH2ml 加 水 至10ml
待测
思考题
请问用醋酸缓冲液、蒸馏水、乙醇、丙
酮洗涤沉淀的目的分别是什么？ 最后所得的沉淀中加入0.1N NaOH的作 用是什么？ 制备高产率 酪蛋白的关键是什么？ 请设计另一种提取酪蛋白的方法。
器材
离心机
水浴锅
试剂
牛乳
醋酸钠缓冲液0.2M,PH４.6
乙醇
乙醚 氢氧化钠
牛乳2ml 40℃水浴预热10分钟（HAC缓冲液同时预热）用滴管 加入HAC缓冲液约2ml（PH4.8）离心，10000转/分， 5分钟
清液
沉淀
用 4 m l 蒸 馏 水 洗 涤 离 心 ,10 0 0 0 转 / 分,5分钟(除沉淀中可溶物)
参考文献
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