1 0.1 0.163
2 0.2 0.318
3 0.3 0.466
4 0.4 0.531
5 0.6 0.834
6 0.8 0.904
Y=-0.00832+0.65995X
R=0.99991
1.0
X：吸光度
0.8Biblioteka Y：糖浓度0.6Y Axis Title
0.4
0.2
0.0 0
B X Axis Title
浓盐酸预处理木质纤维素与 离子液体中预处理木质纤维素
报告人：于广益 时间：2013.9.26
DNS试剂配制与标准曲线的测定
将6.3克DNS和262ml 2mol/L氢氧化钠，加到500ml含有182克酒 石酸钾钠的热水溶液中，再加上5克重苯酚和5克亚硫酸钠，搅拌溶解， 冷却后加水定容到1000ml，即制成3,5-二硝基水杨酸试剂，贮于棕 色瓶中备用。
0
200 400 600 800 1000 1200 1400 1600
X Axis Title
水性离子液体中酶解木质纤维素
秸秆 pH 离子液体
2.0015g
酶
5.613
水
15ml
1.0385g 130ml
时间 min 10 20 30 60 90
吸光度
0.209 0.376 0.386 0.612 0.815
分别取葡萄糖标准液（1mg/ml）0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml 于50 ml比色管管中，用蒸馏水补足至2.0ml, 分别准确加入DNS试 剂1.5ml，沸水浴加热5min，流水冷却，用水补足到25ml刻度。在 520nm波长下测定吸光度。
DNS试剂配制与标准曲线的测定
试样 取样 吸光度
水
1.0385g 110ml
时间 min 10
30
60
144 0
吸光度
0.004 0.056 0.058 0.497
得糖率
-0.59% 2.99% 3.12% 16.82%
Y Axis Title
B
0.18
###
0.16
0.14
0.12
0.10
0.08
0.06
0.04
0.02
0.00
-0.02
-200
成纤维寡糖，纤维二糖和葡萄糖 活性：5万U/g（1min水解底物产生1ug葡萄糖的酶量为一个酶活
力单位） 反应条件：温度50℃，pH=4.8 加热方式：水浴
正常酶解木质纤维素
秸秆 pH
0.9836g
酶
5.013
水
1.0385g 50ml
时间 吸光度 min 10 0.204 20 0.376 30 0.406 60 0.628 90 0.875 150 0.497
DNS即二硝基水杨酸法是利用碱性条件下，二硝基水杨酸（DNS）与 还原糖发生氧化还原反应，生成3-氨基-5-硝基水杨酸，该产物在煮 沸条件下显棕红色，且在一定浓度范围内颜色深浅与还原糖含量成比 例关系的原理，用比色法测定还原糖含量的。因其显色的深浅只与糖 类游离出还原基团的数量有关，而对还原糖的种类没有选择性，故 DNS方法适合用在多糖（如纤维素、半纤维素和淀粉等）水解产生的 多种还原糖体系中。
X Axis Title
64h
75℃下浓盐酸预处理木质
时间·· 15mi 30mi 60mi 2h
n
n
n
取样 0.1ml
吸光度 0.954 1.020
得糖率 27.96% 29.92%
24h 48h 72h
0.152 4.14%
离子液体中预处理木质纤维素
制备离子液体[BMIM]Br,真空干燥后待用。 纤维素酶：由木霉代谢产生的固体粉末，能水解天然纤维素，生
得糖率 0.25
B ###
5.93%
0.20
Y Axis Title
10.97%
0.15
11.27%
0.10
18.10% 0.05
24.23%
0
20
40
60
80
100
X Axis Title
下阶段试验计划
：。。。。。。
时间 15mi 30mi 60mi 2h
n
n
n
24h 48h 64h
取样 0.1ml
吸光度 0.324 0.581 0.632 0.639 0.698 0.982 0.816
得糖率 9.25% 16.88% 18.39% 18.60% 20.35% 28.79% 26.5%
Y Axis Title
B ###
0.287887905 0.256
0.203546295 0.186024623
0.18394578 0.168799928
0.09247671
0
500 1000 1500 2000 2500 3000 3500 4000
X Axis Title
45℃下浓盐酸预处理木质
时间·· 15mi 30mi 60mi 2h
DNS试剂配制与标准曲线的测定 （补充）
波长
500nm
浓度
1.484
（0.8g/L）
浓度
0.916
（0.4g/L）
510nm 1.235
0.846
520nm 1.001
0.768
530nm 1.093
0.699
540nm 0.845
0.574
最终选取520-540nm作为测试波长
浓盐酸预处理木质
得糖率
5.78% 10.97% 11.88% 18.58% 26.04% 14.63%
Y Axis Title
B
###
0.25
0.20
0.15
0.10
0.05
0.00 0
20
40
60
80 100 120 140 160
X Axis Title
离子液体中酶解纤维素
秸秆 pH
2.0015g
酶
5.613
n
n
n
24h 48h
取样 0.1ml
0.05 ml
吸光度 0.579 0.612 0.632 0.639 0.515
得糖率 16.82% 17.80% 24.90% 26.65% 30.01%
normal 45
0.30
0.25
Y Axis Title
0.20
0.15
0.10
0
500 1000 1500 2000 2500 3000 3500 4000
原料：36%-38%浓盐酸100ml，秸秆（取自蒸汽爆破后）2g 反应容器：密闭锥形瓶 加热方式：水浴 参考文献：专利:HYDROLYSIS OF LIGNOCELLULOSE
MATERIALS WITH CONCENTRATED HYDROCHLORIC ACID--CA738946A
常温下浓盐酸预处理木质