免疫比浊法和免疫投射比浊法
1.定义:
(1)免疫比浊法:在一定量的抗体中分别加入递增量的抗原,经一定时间后形成抗原抗体复合物,用浊度计测量反应液体的浊度,并由此推算样品中的抗原含量。
(2)免疫投射比浊法:当光线通过一个浑浊介质溶液时,由于溶液中存在混浊颗粒,光线被吸收一部分,吸收的多少与混浊颗粒
的量成正比,这种测定光吸收量的方法称为透射比浊法。
一般
采用抗体对抗原定量的透射比浊法,称为免疫透射比浊法。
2.原理
(1)免疫比浊法是抗原抗体结合动态测定方法。
其基本原理是:当抗原与抗体在特殊稀释系统中反应而且比例合适(一般规
定抗体过量)时,形成的可溶性免疫复合物在稀释系统中的促
聚剂(聚乙二醇等)的作用下,自液相析出,形成微粒,使
反应液出现浊度。
当抗体浓度固定时,形成的免疫复合物的
量随着检样中抗原量的增加而增加,反应液的浊度也随之增
加。
通过测定反应液的浊度与一系列标准品对照,即可计算
出检样中抗原的含量。
(2)免疫透射比浊法是抗原抗体结合后,形成免疫复合物,在一定时间内复合物聚合出现浊度。
当光线通过溶液时,可被免
疫复合物吸收。
免疫复合物量越多,光线吸收越多。
光线被
吸收的量在一定范围内与免疫复合物的量成正比。
利用比浊
计测定光密度值,复合物的含量与光密度值成正比,同样当抗体量一定时,光密度值也与抗原含量成正比。
本法较单向琼脂扩散试验和火箭电泳等一般免疫化学定量方法敏感、快速简便,但要求免疫复合物的数量和分子量达到一定高度,否则就难以测出。
3.关系
4.免疫比浊法适用的仪器
紫外可见分光光度计
全自动生化仪
全自动生化仪常见的检测方法
终点法
连续检测法
比浊法
均相酶免疫分析。