实验动物生物材料采集和制备
1. 动物常用采血方法 2. 动物尿液的收集 3.实验动物血清与血细胞分离技术 4.匀浆制备技术
实验内容
1. 动物常用采血方法
(1) 大、小鼠鼠尾采血方法:适用于需血量少的实验。方法:将动物固定 后,把鼠尾浸入到45-50度得温水中使尾静脉充血,擦干皮肤后,再用酒 精棉球擦拭消毒。剪去鼠尾(约0.2-0.3厘米),拭去第一滴血,吸取一 定量尾血,然后用棉球压迫止血。
实验一:实验动物生物材料采集和制备
指导教师:冯斐斐
Email:feifeifeng@ 卫生毒理学教研室
实验意义
在卫生毒理学实验中,为研究实验动物接触毒物的毒效应,经 常需要测定血液、尿液、组织匀浆等实验动物生物材料中受试化合 物的浓度,确定其代谢产物的性质和含量,分析外来化合物质对组 织脏器的影响,实验动物生物材料采集和制备是卫生毒理学的重要 基础技术。
实验注意事项
1.抓取动物时应规范小心,避免被动物抓伤或咬伤。 2.应根据具体实验的用血量而决定采用何种采血方式。 3.实验动物每次采血量不能过多。
4.撰写实验报告。
需要采集的生物样品主要是血液和尿液及组织脏器,它是反映 受试物的生物学效应及物质在体内代谢情况的最为重要的途径。
实验目的
掌握常用的实验动物生物材料采集和制备方法。
仪器和器械
实验动物:大鼠、小鼠 器材:大小鼠固定板 实验剪刀 实验镊子 匀浆仪器 玻璃毛细管 大鼠代谢笼 试剂: 生理盐水 乙醚
实验内容住大鼠或小鼠颈部压 迫颈部两侧使眶后静脉丛充血(注意用力要恰当,以防止动物窒息死 亡),右手持玻璃毛细管从一侧眼内呲部以45度角刺入,捻转前进。如 无阻力继续刺入,直到出血为止。右手持容器收集血液后,拔出毛细管, 用干棉球压迫止血。
(3)断头采血法:该法可用于大、小鼠。左手握住动物,右手持剪刀,快速 剪断头颈部,倒立动物将血液滴入容器。注意防止剪断的毛发掉入接血的容 器中。也可用大鼠断头器断头后,倒立动物接血。
实验内容
(4)腹主动脉或股动(静)脉采血法: 为一次性采血方法。大小鼠麻醉后,仰卧位固定动物,剪开腹腔,剥离暴露 腹主动脉或股动(静)脉,用注射器刺入采血。
(5)家兔耳缘静脉采血法: 家兔在兔盒中固定,拔掉一侧耳缘部细毛,轻轻以手指弹耳,使耳缘静脉充 血,酒精消毒。左手压迫耳根,右手持阵刺破静脉收集血液;或直接用注射 器进针,耳缘静脉采血。
(6)心脏采血法: 将动物以仰卧位固定,于肋部近胸骨左缘出,手触心搏最强部位进针,采血。 采血毕迅速拔针,用酒精棉球压迫止血。
实验内容
2. 动物尿液的收集: 收集大动物与小动物的尿液,一般使用不同的代谢笼。代谢笼主要由备有动 物饮水和装饲料的笼体、粪尿分离器和收集尿液容器组成。一般笼体为金属 和铁丝制成,如实验要求防止金属污染时,则代谢笼应用玻璃或有机玻璃制 作。 兔、狗等大动物也可用导尿法收集尿液。 为了使收集的实验动物尿液满足实验需要,可在收集尿前给动物一定量的水, 如大鼠可先行灌胃1-5毫升的水。
实验内容
3.血浆制品的制配: (1)红细胞、白细胞制备 (2)血清制备 (3)全血,即抗凝血 (4)血浆制备
实验内容
4.匀浆制备技术: 1 小鼠断颈放血处死,迅速取其肝脏, 2 置冰冷的生理盐水中反复冲洗,剔除脂肪及结缔组织, 3 滤纸吸干表面水分后称重1克,(根据你需要来)。 4 放在平皿中加入适量的冷生理盐水(肝:生理盐水为 1:4), 剪碎,然后转移到匀浆器中,匀浆。