中药血清药物化学研究概况及其理论和方法拓展闫广利，孙晖，张爱华，韩莹，王萍，吴修红，孟祥才，王喜军*（黑龙江中医药大学国家中医药管理局中药血清药物化学重点研究室，黑龙江哈尔滨150040）［摘要］中药血清药物化学是从中药/方剂口服给药后的血中移行成分中筛选药效物质基础的研究设计，其理念及方法符合中药整体作用模式，并体现了人体对药物的代谢、转化作用和药物在体内的相互作用，现已成为公认并被普遍应用的研究中药药效物质基础的有效方式。
该文对以往中药血清药物化学的研究内容和研究方法进行梳理，在进一步认识中药复方给药形式的特殊性及方证对应疗效的专属性基础上，提出整合系统生物学的中药血清药物化学新研究策略：以证候为切入点，以方剂为研究对象，在利用系统生物学方法阐明证候生物标记物的前提下，评价方剂整体效应，在有效的状态下，筛选与效应生物标记物高度关联的中药血清移行成分，发现并确定中药的药效物质基础。
通过整合系统生物学方法，中药血清药物化学的理论与方法进一步扩展，将开启诠释中医药理论的新篇章。
［关键词］中药血清药物化学；药效物质基础；方剂；系统生物学；未来发展［收稿日期］2015-04-21［基金项目］国家自然科学基金重点项目（81430093）；国家自然科学基金面上项目（81173500，81373930，81473584）；国家自然科学基金青年基金项目（81202639，81302905）［通信作者］*王喜军，教授，博士生导师，研究方向为中药血清药物化学及中医方证代谢组学，Tel /Fax ：（0451）82110818，E-mail ：xijunwangls @［作者简介］闫广利，副研究员，博士，研究方向为中药血清药物化学，E-mail ：gancaosuan@ Progress of serum pharmacochemistry of traditional Chinese medicine andfurther development of its theory and methodYAN Guang-li ，SUN Hui ，ZHANG Ai-hua ，HAN Ying ，WANG Ping ，WU Xiu-hong ，MENG Xiang-cai ，WANG Xi-jun *（National Traditional Chinese Medicine Key Laboratory of Serum Pharmacochemistry ，HeilongjiangUniversity of Chinese Medicine ，Harbin 150040，China ）［Abstract ］Serum pharmacochemistry of traditional Chinese medicine （TCM ）is designed to screen the efficacy material base of TC-Ms from the constituents absorbed into the blood after oral administration.The theory and method is in accordance with the effect char-acteristics of TCMs ，and reflects the interaction between the body and the drugs ，has become an effective pathway for researching the efficacy material base of TCMs which has been recognized and used widely.In the paper ，the previous research contents and methods of the serum pharmacochemistry of TCM were reviewed ，and on the basis of the further validity of the special administration form of the TCM for-mula and the corresponding property to TCM syndrome ，the new strategy of serum pharmacochemistry of TCM integrating the metabonomics technologies was put forward.According to the strategy ，we take the biological characters of TCM syndrome as a research starting point ，tak-ing TCM formula as object ，using the metabolic biomarkers of syndromes or disease to evaluate the therapeutic effect of formula and screen the compounds of TCMs in serum which are highly correlated with the metabolic biomarkers through the correlation analysis ，and by further bio-logical validation to finally confirm the efficacy material basis of TCMs.Integrating with the systems biology technologies ，the theory and method of serum pharmacochemistry of TCM will further develop ，and open a new chapter in the interpretation of the theory of TCM.［Key words ］serum pharmacochemistry of traditional Chinese medicine ；efficacy material base ；formula ；systems biology ；future developmentdoi ：10．4268/cjcmm20151715·6043·中药是在传统中医理论指导下应用的天然药物，具有性味归经、功能主治、方剂配伍等独特的药物理论。
随着中医药现代化和国际化的发展，解析中药在中医临床应用中发挥其独特疗效的药效物质基础已成为亟待解决的中医药学的关键科学问题［1］。
中药是一个复杂的化学巨系统［2］，传统的药效追踪分离及活性成分筛选的天然药物化学方法繁琐费时，虽然从中药中成功发现了一批确有疗效的活性成分，诸如抗疟新药青蒿素［3］、治疗老年痴呆病的石杉碱甲［4］、治疗心脑血管病的川芎嗪［5］等，但此方法是一条以发现新化合物和活性成分为主要目的的研究模式，而不能体现中药多成分协同作用发挥整体生物效应的特点，所获得的“活性成分”对于诠释中药的作用模式及特点仍十分有限。
根据现代药物学理论，中药发挥功效的前提应该是其活性成分能够被吸收进入血液（个别直接作用肠道的药物除外），进而被输送到作用靶点，然而这个过程涉及肠道菌群代谢、肝药酶代谢、跨膜转运吸收等生物过程，而且期间存在药物之间的相互作用，因此，中药真正发挥功效的活性成分与其所含的固有成分往往不同，只有从血中发现直接作用的活性物质及追朔前体化合物才能真正阐明表达中药临床疗效的药效物质基础。
基于此，20世纪90年代初，王喜军教授经过大量实践，率先提出了“中药血清药物化学”理论及研究内容，并将其内涵定义为：以经典的药物化学研究手段和方法为基础，运用现代分离技术及多维联用技术，分析鉴定或表征口服中药后人/动物血清中移行成分，阐明其活性与中药传统药效相关性，确定中药药效物质基础并研究其体内过程的应用科学［6-7］。
该理论及方法体现了机体对药物的作用（吸收、代谢）和药物之间在体内过程中的相互作用，研究结果不仅揭示中药药效物质基础，为解析方剂配伍规律、阐释中药药理学特性及创新药物设计等中医药关键科学问题提供了科学有效的方法［8-10］。
1研究概况1.1血中移行成分分析中药血清药物化学的根本任务是解析中药药效物质基础。
中药所含成分虽然复杂，但只有被吸收入血的成分才能发挥作用，这些成分包括中药所含成分的原形成分和代谢产物；通过分析中药口服给药后血液中的成分，确定中药的体内直接作用物质，是快速、准确地研究确定中药药效物质基础的有效途径。
由于技术手段的限制，早期主要是应用HPLC-DAD技术和柱色谱制备技术对中药血中移行成分进行分析、分离和鉴定［11］。
六味地黄丸血中移行成分的分析堪称是早期中药血清药物化学应用的典范。
首先利用HPLC-DAD技术对六味地黄丸及口服给予大鼠后的血中移行成分进行分析，建立含药血清HPLC-DAD指纹图谱，并通过与体外样品指纹图谱、空白血清指纹图谱进行比对，确定7个原形入血成分和4个代谢产物［12-13］。
为对血中移行成分进行鉴定，以建立的含药血清指纹图谱为导向从药材中靶向分离制备原形入血成分；收集足量给药大鼠的尿液，从中靶向分离制备代谢产物，通过质谱、核磁共振等光谱技术进行准确结构鉴定［14］。
随着液质联用技术，特别是超高效液相色谱串联高分辨质谱技术的快速发展和引入，中药血中移行成分的检测能力和鉴定速度得到迅速提升［15-16］，促进了中药血清药物化学的普及和深化。
作者首先利用UPLC-Q/TOF-MS技术分析了茵陈蒿汤化学成分及灌胃给予大鼠后的血中移行成分，根据精确质量匹配和二级质谱解析共鉴定了21个血中移行成分［17］，进一步经体内经时变化规律分析，优选出具有良好体内行为的药动学标志成分6，7-二甲氧基香豆素、京尼平苷和大黄酸［18］。
随后利用UPLC-Q/TOF-MS技术对茵陈四逆汤［19］、生脉散［20］、温心方［21］、开心散［22］、芍药甘草汤［23］、双黄连方［24］、知柏地黄丸［25］、酸枣仁汤［26］等中药方剂的血中移行成分进行了分析，确定了这些方剂的潜在药效物质基础。
国内很多学者也利用LC-MS技术进行了大量中药及复方的血中移行成分分析，例如黄连解毒汤［27］、麝香保心丸［28］、葛根芩连汤［29］、四逆汤［30］、少腹逐瘀汤［31］、四逆散［32］等中药方剂以及复方丹参片［33］、仙灵骨葆胶囊［34］等中成药，使从中药口服后被吸收进入体内的成分中筛选药效物质基础的研究思路和方法成为共识。