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18
结果评价
按下列规定确定原发性刺激指数(PII)。 将每只动物在每一规定时间试验材料引起的
红斑与水肿的原发性刺激记分相加后再除以观 察总数(总数为6:2个计分类型和3个观察期)。 当用0.9％氯化钠注射液对照时，计算出对照 原发性刺激记分，将试验材料原发性刺激记分 减去该记分，即得出每只动物原发性刺激记分。 使用24h、48h和72h的观察数据进行计算。 试验之前或72h后的恢复观察数据不用于计算。 每只动物的记分相加后除以动物总数即为原 发性刺激指数。
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9
试验方法
试验前用75％的(V/V)乙醇擦拭背部去毛区域， 等变干后根据供试品的不同性状选用不同的 方法进行操作。 Nhomakorabea精选ppt
10
粉剂或液体样品
取0.5g或0.5mL的试验材料，直接涂 抹到剃毛皮肤部位。 粉剂使用前用少量 的水制成糊状，有利于涂抹。
用25mm×25mm透气性好的敷料敷贴 涂抹样品的皮肤部位, •然后敷料外层用 纱布包裹，再用半封闭性包扎带固定敷 料和纱布4h以上。接触期结束后依次取 下包扎带、纱布及敷料, 对接触部位进行 标记,用温水清洗并擦干。
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4
试验动物
应使用清洁级健康、初成年的、未使用过 的试验用（新西兰）兔，雌雄兼用, 同一品系, 同一饲养条件，体重应不低于2kg。
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5
试验用兔的抓取固定方法
试验用兔比较驯服不会咬人，但脚爪较尖应避 免兔抓伤。进行刺激试验时，只需将兔抓牢或 按住即可，抓兔的方法是用右手把两耳轻轻地 拿在手心，抓住颈后部的皮厚处，提取兔，然 后用左手托住臀部，使兔的体重大部分落在左 手上，不能单提两耳、捉拿四肢、提抓腰部和 背部。
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6
预试验
试验材料应使用1只动物进行初试。 如 动物出现清晰红斑或水肿时，不必再进 行其他试验。
如试验动物没有出现清晰的红斑或水肿 反应时,应至少再选用2只动物进行试验。
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7
试验步骤
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8
动物准备
试验前一天, 将试验用兔人工固定或固 定到固定装置上，然后把背部脊柱两侧 的被毛用手术剪粗剪后再用推子小心的 把被毛去除干净(约10cm×15cm区域),作 为试验和观察部位。去毛过程应确保动 物皮肤健康无损伤。
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11
固体样品
研成粉末，试验材料可用水充分湿化以 保证与皮肤良好的接触性。
用25mm×25mm的透气性好的敷料块覆 盖材料接触部位, 然后敷料外层用纱布包 裹，再用半封闭性包扎带固定敷料和纱 布4h以上，依次取下包扎带、纱布及敷 料, 对接触部位进行标记,用温水清洗并 擦干。
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1
水肿清晰(肿起, 不超出区域边缘)
2
中度水肿 (肿起约1mm)
3
重度水肿(肿起超过1mm, 并超出接触区)
4
刺激最高记分
8
注: 记录并报告皮肤部位的其他异常情况。
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17
表15皮肤刺激试验结果评价
反应类型
极轻微 轻度 中度 重度
平均记分
0.0 ～ 0.4 0.5 ～ 1.9 2.0 ～ 4.9 5.0 ～ 8.0
试剂称量用
精度 50g
试验用兔称量用
兔固定装置、手术剪刀、推子、游标卡尺、 称量瓶、吸管、移液管、包扎带、医用纱布、 烧杯、压力蒸汽灭菌器。
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3
试剂与器具灭菌
试剂 75%(V/V)乙醇、0.9％氯化钠注射液或其它规
定的浸提介质。 器具灭菌 与供试品接触的所有器具应采用可靠的方法
灭菌，置压力蒸汽灭菌器内121℃恒温20分 钟，或置电热干燥箱内160℃干烤2h。
精度 0.1或1mg
试剂称量用
精度 50g
试验用兔称量用
兔固定装置、手术剪刀、推子、称量瓶、 吸管、移液管、注射器（2mL）、注射 针（5＃、8＃）、烧杯、压力蒸汽灭菌 器。
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21
试剂
75%(V/V)乙醇、0.9％氯化钠注射液、植物油 或其它规定的溶剂。
器具灭菌
与供试品接触的所有器具应采用可靠的方法灭 菌，置压力蒸汽灭菌器内121℃恒温20分钟， 或置电热干燥箱内160℃干烤2h。
12
药包材：
铝质软胶管：取试样5 支，向每支加入标示 容量的0.9％氯化钠注射液，振荡5分钟后， 合并提取液备用。
一般材料：取平整部位表面积600cm2剪碎， 加入氯化钠注射液100mL，70℃放置24小时 后取出冷却备用。
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13
0.9％氯化钠注射液及其浸提液
将浸提液滴到25mm×25mm的4层纱 布块上(每块约0.5mL), 按下图所示部位 敷贴于动物背部两侧。将滴有0.9％氯化 钠注射液的纱布块敷贴在对照接触部位。
刺激试验
刺激是不涉及免疫学机制的一 次、多次或持续与试验材料接触所 引起的局部炎症反应。
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1
皮肤刺激试验
评价材料在试验条件下产生皮 肤刺激反应的潜在性。
家兔为首选，预期无反应，可 直接使用3家兔。
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2
试验材料与仪器
天平
精度 0.01或0.1g
供试品称量用
精度 0.1或1mg
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19
皮内刺激试验
简述
评价材料通过皮内注射浸提液产生刺激 反应的潜在性。
应排除的试验材料
任何对皮肤、眼、粘膜组织有刺激的材 料或产品, 如具有腐蚀性的强酸或强碱材 料(pH≤2或≥11.5)不应再进行本试验。
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20
试验材料与仪器
天平
精度 0.01或0.1g
供试品称量用
按下表规定的分类系统, 描述每一接 触部位在每一规定时间内皮肤红斑和水 肿反应情况并评分, 记录结果以出具试验 报告。
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16
表14 观察损伤情况及评分标准
反应
记分
红斑和焦痂形成
无红斑
0
极轻微红斑(勉强可见)
1
红斑清晰
中度红斑
2
重度红斑(紫红色) 至焦痂形成
3
水肿形成
4
无水肿
0
极轻微水肿(勉强可见)
然后敷料外层用纱布包裹，再用半封闭 性包扎带固定敷料和纱布4h以上，依次 取下包扎带、纱布及敷料, 对接触部位进 行标记,用温水清洗并擦干。
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14
供试品部位 对照部位
头部
尾部
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去毛的背部区域 对照部位
供试品部位
15
结果观察
在除去敷贴物后1h、24h、48h和72h 记录各接触部位情况。如存在持久性损 伤有必要延长观察时间, 以评价这种损伤 的可逆性或不可逆性,但延长期不必超过 14d。