试验植物总黄酮的提取与测定
摘要本实验采用紫外分光光度法测定芹菜体内总黄酮含量，利用黄酮类化合物与铝盐反应生成红色络合物。

以芦丁为标准品在510nm处测定吸光度。

得出标准曲线，然后计算样品的黄酮量。

下面会就本实验出现的一些状况作出详尽想分析。

材料与方法
材料新鲜芹菜叶
方法
试剂的配制
标准品芦丁；甲醇；石油醚；磷酸；95%乙醇；硝酸铝；亚硝酸钠；氢氧化钠；去离子水
步骤
1 总黄酮提取称取新鲜芹菜叶子10.0g，研磨后于回流装置中用70ml 95%乙醇回流2h，过滤，然后用石油醚做溶剂萃取1~2次去脂溶物。

溶剂用量为提取液的1/2，除脂后浓缩并定容至50ml。

2 芹菜黄酮含量的测定吸取10ml置25ml容量瓶中，加30%乙醇2.5ml，再加入5%亚硝酸钠溶液0.75ml摇匀，放置5min，加10%硝酸铝液0.75ml，摇匀，放置5min，再加1mol/L NaOH溶液10ml，摇匀，加30%乙醇至刻度，放置10min，在510nm波长处测定吸光度。

同时，取上述稀释液10ml，置于25ml容量瓶中，
加30%乙醇至刻度，作为对照溶液。

根据测得的吸光度得出标准曲线
3 标准溶液配制精确称取与120℃真空干燥至恒重的芦丁标准品20mg，置100ml容量瓶中，加60%乙醇溶液，稀释至刻度，精确量取25ml，置于50ml容量瓶中，稀释至刻度，摇匀既得每1ml 含芦丁0.1mg的标准溶液。

4标准曲线制作精确量取标准溶液0。

0，2.5,5.0,7.5,10.0,12.5ml，分别置于25ml容量瓶中，加30%乙醇补足至12.5ml，加5%亚硝酸钠溶液0.75ml摇匀，放置5min，精确加入10%硝酸铝液0.75ml，摇匀，放置5min，再精确加入1mol/L氢氧化钠液10ml，用30%乙醇稀释至刻度，以第一管为空白，与510nm波长下测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准溶液。

结果
标准：A1=0.000;A2=0.121;A3=0.266;A4=0.394;A5=0.530;A6=0.673
样品：A（1）=0.000；A（2）=0.036
由标准曲线图可得样品中黄酮的含量为0.042
分析
1 在实验之前，必须要仔细检查实验仪器的密封性，如萃取瓶，回流装置的密封性。

前者的疏忽会导致萃取液的泄漏，后者的疏忽会导致乙醇的泄漏，使芹菜叶不能很好地进行回流提取。

2 这次的样品并不是像以往那样的有标准溶液作为对照，而是运用样品作为对照，因为这次的样品是有颜色的，如果再用标准溶液做对照，会导致数值太大，测不准。

3这次是用紫外光测定吸光度，所以要用专用的硅比色皿，普通的玻璃比色皿会吸取紫外光，所以不可用。

4这次的芦丁标准溶液的配制是在通风处完成的，即其有一定的毒性，做实验时要做好防护的措施。

5黄酮类化合物的生理活性：抗氧化等或是具有一些抗发炎反应功效。

也被认为有抵抗或是减缓肿瘤的形成。

（资料来源于互联网）
6 黄酮类化合物的种类黄酮、黄烷醇、总黄酮、黄酮醇、和花青盐。

（资料来源于互联网）。