2010药典 2015药典
pH 7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液、 pH 7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲 pH 7.2磷酸盐缓冲液、TSB、pH 液、pH 6.8无菌磷酸盐缓冲液 稀释液 6.8无菌磷酸盐缓冲液（用于肠溶制 （用于肠溶制剂）或pH 7.6无菌 剂）或pH 7.6无菌磷酸盐缓冲液 磷酸盐缓冲液（用于结肠溶制剂） （用于结肠溶制剂） 名称 计数方法验证 细菌用三种菌株进行验证 大肠埃希菌、金葡、枯草 霉菌、酵母菌两种菌株 白念、黑曲霉 细菌：培养温度30~35℃ 48h 真菌：培养温度23~28℃ 72h 计数方法适用性试验
4 | Confidential
《中国药典》编制工作内容
2010版《中国药典》
o 一部
药材和饮片 植物油脂和提取物 成方制剂和单位制剂 附录（通则）
2015版《中国药典》
o 一部
药材和饮片 植物油脂和提取物 成方制剂和单位制剂
o 二部
化学药品 抗生素 生化药品 放射性药品 药用辅料 附录（通则）
16 | Confidential
计数方法的增修订内容
2010年版药典
o 平皿法：倾注法 o 薄膜过滤法
2015年版药典
o 平皿法 倾注法 涂布法：接种约 0.1~0.2ml供试液，涂 布 均匀，培养 o 薄膜过滤法 o 最大可能数法（MPN） 以细菌在TSB中生长后 的浊度比较作判断，精 确度较差，仅适用于无 适宜方法时的需氧菌总 数计数，不适用于霉菌 计数。
纯化水及注射用水微生物限度修订
2010年版药典二部 2015年版药典二部 o 纯化水：取本品不少于1ml，采 o 纯化水：取本品，采用薄膜过 用薄膜过滤法处理后，采用R2A 滤法处理后，依法检查，细菌、 霉菌和酵母菌总数每1ml不得 琼脂培养基，30-35°C培养不少 过100个。 于5天，依法检查，1ml 供试品 o 注射用水：取本品至少200ml， 中需氧菌总数不得过100cfu。 o 注射用水：取本品不少于100ml， 采用薄膜过滤法处理后，依法 检查，细菌、霉菌和酵母菌总 采用薄膜过滤法处理后，采用 数每1ml不得过100个。 R2A琼脂培养基，30-35°C培养 o 培养基：NA及RBA 不少于5天，依法检查，100ml 供试品中需氧菌总数不得过 10cfu。 o 培养基：R2A
供试液直接加入平皿中 （不加菌液） 直接加入菌液到平皿中 供试液，以稀释液代替菌液， 按照试验组操作进行试验
供试品对照组 菌液对照组
取不含中和剂、灭活剂稀释 液加入规定量的菌液
含中和剂、灭活剂的相应稀 释液替代供试液按试验组操 作加入规定量菌液
中和剂对照组
稀释剂对照组
20 | Confidential
2015年版药典
o 按计数方法适用性试验确认 计数方法进行供试品中需氧 菌总数、霉菌及酵母菌总数 的测定 o 胰酪大豆胨琼脂平板在 30~35℃培养3-5天沙氏葡萄 糖琼脂平板在20~25℃培养 5-7天 o MPN法和供试品接种，所 有试验管在30~35℃ 培养35天
23 | Confidential
o 二部
化学药品 抗生素 生化药品 放射性药品
o 三部
生物制品
o 三部
生物制品 附录（通则）
5 | Confidential
o 四部
药用辅料 附录（通则）
《中国药典》编制工作内容
2015版《中国药典》四部
o 药典通则编码修订
中国药典附录原编码已不能满足新通则的不断增加和药典附 录整合的需要 药典通则编码是药典中收载的各通则的专用身份证，是在药 典和所有药品标准中引用通则的代号
8 | Confidential
制药用水的质量控制
制水系统应经过验证，并建立日常监控、检测和报告制度，有 完善的原始记录备查 制药用水系统应定期进行清洗与消毒，消毒可以采用热处理或 化学处理等方法 采用的消毒方法以及化学处理后消毒剂的去除应经过验证。
9 | Confidential
制药用水的质量控制
菌种
总需氧菌计数用五种菌株试验 金 葡、枯草、铜绿、白念、黑曲霉
培养条件
19 | Confidential
细菌：培养温度30~35℃不超过3天 真菌：培养温度20~25℃ 不超过5 天
计数方法—适用性试验
平皿法 2010药典 2015药典
试验组
供试液中加入规定量的菌液， 使每1ml供试液或每张滤膜 供试液和菌液同时加入平皿中 所滤过的供试液中含菌量不 大于100cfu
修订后
固体、液体培养基 不大于100cfu TSA、TSB/30~35℃ 不超过3天 SDA/20~25℃ 不超过5天 固体标准：与对照培养基相比， 菌数比值在0.5~2范围液体标准： 生长良好
可接受标准
15 | Confidential
培养基适用性检查
胰酪大豆胨琼脂（TSA）
o 无菌性试验：取灭菌培养基注入无菌平皿中，30~35℃培养3~5天 ，应无菌落生长。 o 灵敏度试验：枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌于 30~35℃培养不超过3天，白色念珠菌、黑曲霉于20~25℃ 培养不超过5天。 涂布法：接种不大于100cfu试验用菌悬液于TSA平板表面 倾注法：接种不大于100cfu试验菌于平皿，注入培养基，摇匀 ，培养。 与标准培养基比较，菌数比值在0.5~2（50%~200%）范 围内。
试验菌株
o 修订前：大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念 珠菌、黑曲霉 o 修订后：铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色 念珠菌、黑曲霉
培养基适用性检查
修订前
适用范围 加菌量 培养基及培养温度 固体培养基 50~100cfu NA、NB/30~35℃ 48h RBA/23~28℃ 72h 70%
7 | Confidential
类别 制剂通则 其他原则 一般鉴别实验 光谱法 色谱法 物理常熟测定法 其他测定生物活性测定法 中药相关检测方法 生物制品相关检测方法 试剂与标准物质 指导原则
修订前： 编码原则 附录 + 罗马序号 （I,II….) + 字母 （A,B…) 采用BP的编号原 则
10 | Confidential
微生物限度检查法的特点
2010年版药典
o 一个通则 微生物限度检查法
2015年版药典
o 三个通则 非无菌产品微生物 限度检查：微生物 计数法 非无菌产品微生物 限度检查：控制菌 检查法 非无菌药品微生物 限度标准
11 | Confidential
供试品检查——计数
2010年版药典
o 细菌计数 营养琼脂培养基 o 霉菌及酵母菌计数 玫瑰红钠培养基 o 酵母菌计数 酵母浸出粉胨葡萄糖琼 脂培养基
《中国药典》编制工作内容
2015版《中国药典》四部----通则增修订 o 新增指导原则 加强检测环境要求 • 药品洁净实验室微生物监测和控制 检测技术多样性 • 微生物鉴定：为非无菌产品微生物限度控制菌检查 中疑似菌的鉴定，以及药物原料，辅料，中间体， 终产品和环境中检出微生物的鉴定。与欧盟基本统 一。 完善标准体系内容 • 药包材通用标准（首次纳入）
供试品检查——检验量
2010年版药典
1. 除另有规定外，一般供试品的检 验量为10g或10ml 2. 膜剂为100cm2 3. 贵重药品、微量包装药品的检验 量可酌减 4. 检验时，应从2个以上最小包装单 位中取供试品，大蜜丸不得少于4 丸，膜剂不得少于4片 5. 一般应随机抽取不少于检验用量 （两个以上最小包装单位）的三 倍量供试品。 6. 要求检查沙门菌的供试品，其检 验量应增加20g或20ml（其中10g 或10ml用于阳性对照试验）
12 | Confidential
控制菌检查法
2010年版药典 o 大肠菌群
o o o o o o 大肠埃细菌 沙门菌 铜绿假单胞菌 金黄色葡萄球菌 梭菌 白色念珠菌
2015年版药典
o o o o o o o 耐胆盐的革兰氏阴性菌 大肠埃细菌 沙门菌 铜绿假单胞菌 金黄色葡萄球菌 梭菌 白色念珠菌
o 药典通则引导图修订
根据国外药典要求
o 检测方法整合、规范、完善
制剂通则全部整合38 整合检定方法63个 修订通则28个 新增指导原则18个 新增生物制品总论3个
6 | Confidential
《中国药典》编制工作内容
2015版《中国药典》四部----药典通则编码修订
编码系列 0100系列 0200系列 0300系列 0400系列 0500系列 0600系列 0700系列 0800系列 0900系列 1000系列 1100系列 1200系列 2000系列 3000系列 8000系列 9000系列
17 | Confidential
计数法
2010年版药典
o 细菌数 营养琼脂（NA） o 霉菌及酵母菌数 玫瑰红钠琼脂(RBA)
2015年版药典
o 需氧菌总数 胰酪大豆胨琼脂（TSA） o 霉菌及酵母菌总数 沙氏葡萄糖琼脂（SDA）
18 | Confidential
微生物计数
环境要求
2010年版药典
o 应在环境洁净度10000级 下的局部洁净度100级的 单向流空气区域内进行。 o 检验全过程必须严格遵守 无菌操作，防止再污染， 防止污染的措施不得影响 供试品中微生物的检出。
2015年版药典
o 无菌环境下符合微生物 计数检验的要求，单向 流空气区域内进行。既 要最大可能防止微生物 污染，又要防止检验过 程对环境和人员造成危 害。活动区域的合理规 划及区分将提高微生物 实验室操作的可靠性。
2015版中国药典
《中国药典》编制工作背景----作用
中华人民共和国药典（CHP) Pharmacopoeia of the People’s Republic of China 由国家药品监督管理部门颁布，是国家为保证药品质量，保证 人民用药安全有效，质量可控而制定的药品法典。《中国药典 》对于保证药品质量，维护和保障公众身体健康及用药的合法 权益，促进我国医药产业健康发展，具有十分重要的作用。