霉菌培养与形态观察
第I部分
霉菌形态观察
• 目的要求
1. 学习并掌握观察霉菌形态的基本方法。 2. 了解常见霉菌的基本形态特征。
霉菌(Molds)：
霉菌是一些“丝状真菌(filamentous fungi)”的统称 ，不是分类学上的名词。凡是在基质上长成毛状、棉絮 状或蜘蛛网状的丝状真菌统称霉菌。
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2、将一个PDA培养基平板放在你选定的采样地点，移去皿盖， 使培养基表面暴露在空气中，若干时间（30分钟）后盖上皿盖，
下周带回实验室培养。
注意皿盖朝下
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周四班课外工作----接种培养
微生物 接种方法 培养温 接种 分组中单号同学 度℃ 时间
酵母菌
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显微镜使用简介
1、 旋动粗调螺旋，将载物台降至最低。 2、 将玻片放在载物台上，练习前后左右推进螺旋。 3、 转动物镜转换器（不要直接扳动镜头），选择10倍镜头，将载 物台升至最高。 4、 打开电源，调节底部光亮度。 5、调节瞳距拉板，至合适瞳距（双目图像完全重合），用粗调缓 缓降低载物台（注意方向不可相反），至可以看见物象。 6、改用微调，调节至图像清晰。
3、青霉
• 营养菌丝有横隔 • 分生孢子梗有横隔 • 无顶囊，成帚状分枝
• 小梗顶串生分生孢子（球形、 椭圆或短圆柱状）
• 观察青霉菌 丝和分生孢 子着生情况：
1.单轮生青霉群；2.对称二轮生青霉群； 3.多轮生青霉群；4.不对称生青霉群
青霉的显微形态
青霉的显微形态
青霉
4、链格孢霉
又称黑霉菌，半知菌类真菌，植物病害霉菌，分生孢子瓶形有分隔。
霉菌形态比细菌、放线菌复杂，个体比较大(直径310µm)，具有分枝的菌丝体和分化的繁殖器官。
观察时要注意菌丝粗细，菌丝体有无隔膜，营养菌 丝有无假根，无性繁殖或有性繁殖时形成的孢子是哪一 种，孢子是怎样着生的。
霉菌可产生分枝的菌丝体，分基内菌丝和气生 菌丝 ，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，
由繁殖菌丝产生孢子。霉菌菌丝体及孢子的形态特 征是识别不同种类霉菌的重要依据。霉菌菌丝和孢 子的宽度通常比放线菌粗得多，用低倍镜即可观察。
霉菌的观察
直接制片观察法 在载玻片上加一滴乳酸石炭酸棉蓝染色液，用
眼科镊子从霉菌菌落(空气中曝皿)边缘处挑取少 量已产生孢子的霉菌菌丝于染色液中，小心将它 分散开，盖上盖玻片，镜检。
件，请将文件提交给教师，实验图片将上传至ftp供同学下载。
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6、实验完毕，关闭电脑和显示器，显微镜归位，关闭电源。
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第III部分
空气中的微生物检查
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1、在PDA大皿底用记号笔写上班级、姓名、日期及样品来源。
字尽量小些，写在皿 底的一边，不要写在 当中，以免影响观察 结果；
实验报告
• 4种霉菌的菌落形态照片及描述； • 4种霉菌插片培养典型特征观察照片及标注； • 4种霉菌直接观察典型特征照片及标注； • 分析说明2种观察方法的优缺点和你操作的心得体会；
第II部分
光学显微镜的使用
目镜WF16X 瞳距调节拉板
物镜转换器 物镜
光源、光亮 调节手轮 玻片推进器
光学显微镜的使用
如不能找到图像，请重复以上操作。 7、前后左右移动玻片，至找到合适的图像。 8、转到高倍镜(40倍)，调节微调钮和底部右侧光亮度调节手轮，至 图像清晰，可以绘图或计数。 9 、观察完毕，将载物台降至最低，更换玻片重复3-8步骤。 10、使用完毕，降下载物台，取掉玻片，光源调至最弱，关闭电源。
取教学切片，练习显微镜10、40倍镜使用，时间5min。
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Motic显微数码互动系统的使用
1、启动电脑，自动运行DigiLabII-C软件。 2、点击“登陆”，在D盘中新建文件夹，自己命名（显微镜编号贴在试剂架）。
拉出一定 程度，不 可用蛮力
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3、因感光系统与人眼有差别，待显微镜下图像清晰显示在软件中， 可进行处理，如白平衡或色彩调节。
视度调节圈
载物台 焦距粗\ 微调螺旋
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目镜WF16X 瞳距调节拉板
物镜转换器 物镜 载物台
光源、光亮 调节手轮 玻片推进器
图名 平行(折)线图注
照片示例
微镜的构造
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关于放大倍数？
聚光器 升降旋钮
聚光器 光源
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假根
匍匐枝
接合孢子
根霉
根霉孢子囊
假根
• 黑曲霉 Aspergillus niger
菌丝体：有横隔，常无色， 老熟时变为浅黄色至褐色， 有足细胞。 请辨认： 1、分生孢子梗 2、顶囊 3、小梗 4、分生孢子 5、足细胞
2、曲霉
分生孢子
小梗 顶囊 分生孢子梗
足细胞
有隔菌丝
黑曲霉的显微形态
黑曲霉
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4、得到满意的图像后，即可以jpg或bmp格式保存图片。
鼠标右键点击图片处或在工 具栏中选择“手动拍照”。
保存于D盘的文件夹。
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5、上传图片：选择工具栏中“作业提交”，将图片发送至教师端主机。
注意：学生电脑重启后恢复原有设置，禁止学生直接用U盘下载文
插片法染色观察 1划线接种\插片\培养 2.用镊子小心拔出盖玻片，擦去背面培养物.在载
玻片上滴一滴乳酸石炭酸棉蓝染色液，将有菌 的一面朝下放在载玻片上染液处，直接镜检。
1、根霉
• 黑根霉（匍枝根霉）
Rhizopus nigricans
• 菌落：初期白色，老熟后灰褐 色
孢子囊
• 显微形态：匍匐枝无色，假根 发达呈褐色。孢子囊簇生，可 形成球状接合孢子。
亮度调 节手轮
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低倍镜观察
将标本置于载物台上，标 本夹夹住，移动推进器使观 察对象处在物镜的下方。上 升载物台，使其接近标本， 用粗调节器慢慢下降载物台， 使标本在视野中初步聚焦， 再使用细调节器调节图像清 晰。
必须先从侧面注视小心 调节物镜靠近标本，再用 目镜观察，慢慢调节使物 镜离开标本进行准焦，以 免误操作损坏镜头及玻片。
周二
1-16
PDA小皿 28 中午
分区域划线
12:00
-12:40
在培养箱里 放一杯水， 保持有水
周五班课外工作----接种培养
微生物 接种方法 培养温 度℃
酵母菌 PDA小皿 28
分区域划线
接种 分组中单号同学 时间
周三
1-16
中午
12:00
-12:40
在培养箱里 放一杯水， 保持有水
操作步骤
1、显微镜的安置: 取、放 显微镜时应一手握住镜臂， 一手托住底座，使显微镜 保持直立平稳，切忌用单 手拎提。使用时应双眼同 时睁开观察，以减少眼睛 疲劳。
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操作步骤
聚光器
2、光源调节 调节电压以获得适当的 照明亮度
3、聚光器的调节 聚光 器和虹彩光圈调节好后， 只需通过电源调节亮度， 基本不再调节聚光器。