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仪器分析实验-高效液相色谱法

分几个系统? 和GC有何不同?
高压泵工作原理? GC是如何进样的? 记录系统和GC一样 吗?
高压泵工作原理(单向阀)
➢ 高压液体有危险吗? ➢ 高压泵如何改变流速?
高压泵工作原理(单向阀) 六通阀工作原理(流路切换)
➢ HPLC进样针与GC有何不同? ➢ 为什么HPLC与GC进样要求不同?
五、 RP-HPLC测定烷基苯化合物原理
感谢聆听仪器分析实验-高效液相色源自法三、 HPLC仪器和实验技术
➢ HPLC仪器的基本组分? ➢ 主要部件的工作原理? ➢ HPLC和GC仪器的比较 ➢ HPLC和GC实验技术的比较 ➢ 有人认为色谱分析实验很简单,就是打一 针样品而已,你是怎么认为的?你是否给病 人打过针?为什么没有?
四、高效液相色谱仪的基本组成
二、色谱实验条件
A组:Waters HPLC仪
色谱柱:Nova Pak C18 (3.9×150mm, 4μm) 流动相:CH3OH-H2O (70/30, v/v) 流速:0.8 mL/min 检测波长:254nm 进样体积:20μL
B组:TSP HPLC仪
色谱柱:Hypersil BDS C18 (4.0×200mm, 5μm) 流动相:CH3OH-H2O (80/20, v/v) 流速:0.8 mL/min 检测波长:254nm 进样体积:20μL
➢ 什么是正相色谱?什么是反相色谱? ➢ 什么是键合固定相? ➢ 预测一下苯和甲苯在C18反相柱上的保留 顺序? ➢ 什么是反相色谱疏水机理? ➢ 本实验的主要色谱分析条件有那些? ➢ 流动相组成对保留时间有何影响?举例说 明? ➢ 改变检测波长对色谱图有何影响?
HPLC的溶剂选择
➢ 本实验采用什么流动相? ➢ 什么是HPLC级甲醇、乙腈溶剂? ➢ 如何获得超纯水? ➢ 本实验所用的流动相如何配制? ➢ 流动相为什么要除气?如何除气?
六、实验部分
一、溶液配制 1 配制标准系列溶液
三组分混标液:每mL溶液分别含1.00mg苯、甲苯 和乙苯。 分别准确移取0.40、0.80、1.20、1.60和2.00mL 三组分混标液于10mL容量瓶中,用流动相溶剂定容。
2 流动相的配制、过滤和除气。
五组分混标液:含适量苯、甲苯、乙苯、丙苯和丁苯。 标准苯测试液。 未知样品1号、2号和3号。
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