突和树突。
悬浮型
概念：培养时不贴附于底物而呈悬浮状态生长 来源：自血，脾或骨髓，尤以血中白细胞癌肿细胞 特点：在悬浮中生长良好细胞圆形，单个或小细胞团 优点：生存空间大，提供数量大，传代方便(不需消化)，
易于收获，可获得稳定状态 缺点：观察不方便，很多细胞不能悬浮生长 (尤以正常细
胞)
HL-60 分化细胞Giemsa染色
成纤维细胞
HUVECs人脐静脉内皮细胞
1.细胞种类：人脐静脉内皮细胞； 2.培养的天数：4d；原代培养； 3.放大倍速：倒置显微镜 X20； 4.培养基种类：DMEM+15％胎牛
血清； 5.细胞状态与特征简述：细胞呈梭
形，扁平形或多角形，贴壁生长。
骨髓间充质干细胞
1.细胞种类：人骨髓间充质干细胞原代； 2.培养天数：7天； 3.放大倍数：200倍，倒置显微镜； 4.培养基种类：DF12+10％FBS； 5.细胞状态与特征简述：使用 percoll 密度 梯度离心法分离人骨髓细胞。首次换液 48h， 这是7天后的骨髓间充质干细胞扩增情况。
细胞培养
2019/11/11 申艳娜
shenyannasina
? 教材 细胞培养 （Cell culture） 司徒镇强 ? 任教老师 申艳娜 shenyannasina
岳丹 yuedan1980yahoo 李晓蕾 leileili1225yahoo ? 授课 6次理论课+2次实验课
细胞培养
? 细胞培养(cell culture): 动植物细胞在体外培养 的条件下的存活或生长，此时细胞不再形成组织。
1. 细胞种类：HL-60； 2. 培养的天数：ATRA 1 微摩尔作用5天； 3. 放大倍速：倒置显微镜 X10； 4. 培养基种类：1640+8％胎牛血清； 5. 细胞状态与特征简述：悬浮细胞，分化的细胞核浆比例减小，核仁减少或
消失，胞核呈杆状或分叶状。
KU812
1.细胞种类：人嗜碱细胞性白血病细胞系； 2.培养的天数： 5d ； 3.放大倍速：倒置显微镜 X20； 4.培养基种类：RPMI1640+10%新生牛血清； 5.细胞状态与特征简述：细胞呈圆形，悬浮生长。
第一章 细胞培养的基本知识
1.掌握培养细胞的生长特点和生长条件。 2. 熟悉培养细胞的特性。
第二章 细胞培养室的设置、设备和准备工作
1.掌握细胞培养实验室的设备使用方法和保养。 2.掌握实验器材的清洗和消毒灭菌方法。 3.了解细胞培养实验室的设置。
细胞培养的基本知识
体外培养细胞的分型
贴附型
大多数培养细胞贴附生长，属于贴壁依 赖性细胞，大致分成以下四型：
HeLa细胞
1.细胞种类：人HeLa细胞传代培养； 2.培养的天数： 7d ； 3.放大倍速：倒置显微镜 X200； 4.培养基种类：DMEM+10%小牛血清； 5.细胞状态与特征简述：细胞呈多角形，贴壁生长。
K562细胞
1.细胞种类：K562（人慢性红白血病细胞株）； 2.培养的天数：传代后 2天； 3.放大倍数：倒置显微镜 X10； 4.培养基种类：RPMI1640+10%胎牛血清，4mM Glutamine； 5.细胞状态与特征简介：悬浮生长，少数贴壁，喜爱成团悬浮。
3、游走细胞型：
呈散在生长，一般不连成片，胞质常突起，呈活跃游
走或变形运动，方向不规则。此型细胞不稳定，有时难以
和其他细胞相区别。
CNE1
1.细胞种类：高分化鼻咽癌细胞系； 2.培养的天数： 3d； 3.放大倍速：相差 100； 4.培养基种类： PMI1640+10%CS； 5.细胞状态与特征简述：贴壁细胞，
梭型成团生长。
4、多型细胞型
? 有一些细胞，如神经细胞难以确定其规律和 稳定的形态，可统归于此类。
SD大鼠神经元 原代
1.细胞种类：脑皮质细胞； 2.培养的天数：4-5天； 3.放大倍速：电镜 20000； 4.培养基种类：DMEM+10%小牛血清+10% 马
血清； 5.细胞状态与特征简述：贴壁细胞，有多量轴
? 细胞培养分为动物细胞培养和植物细胞培养， 其中动物细胞培养是指在体外无菌条件下，模拟 体内正常生理状态下的基本条件和环境，分离培 养机体组织细胞或建立细胞系，并使得细胞在体 外培养容器中长期生长或繁殖的方法。
应用领域广泛
? 病毒学 ? 免疫学 ? 遗传学 ? 肿瘤学 ? 分化及发育 ? 细胞毒试验 ? 临床医学及生物技术
? 成纤维细胞 ? 上皮型细胞 ? 游走细胞型 ? 多型细胞型
1、成纤维细胞型
名称：凡在培养中形态与成纤维细胞类似的 来源：由中胚层间充质组织起源的组织如：
真正的成纤维细胞，心肌，平滑肌，成骨细胞， 血管内皮 形态：胞体梭形或不规则三角形，胞质向外伸出 2—3个长短不 等 的突起，中有卵圆形核 生长特点：排列成放射状，漩涡状 细胞—细胞接触易断开而单独行动，游离的单独的成纤 维 样细胞，常有几个伸长的细胞突起
每代贴壁细胞的生长过程
? 游离期 ? 贴壁期 ? 潜伏期 ? 对数生长期 ? 停止期（平台期）
? 游离期
悬浮，胞质回缩，全部细胞变为圆球形。
? 吸附期
贴附底物，一般 24小时内贴壁。
? 潜伏期
此时细胞有生长活动，基本无增殖。 细胞株潜伏期一般为 6～24ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ时。
SKOv3 （卵巢癌细胞）
1.细胞种类：SKOv3（卵巢癌细胞） 2.培养的天数：传代后3d； 3.放大倍速：倒置显微镜 X10； 4.培养基种类：DMEM+5%胎牛血清； 5.细胞状态与特征简述：细胞贴壁生
长，生长速度较快。
CCL-149
1.细胞种类：大鼠肺泡上皮细胞； 2.培养的天数：1d（种在48孔板中）； 3.放大倍速：倒置显微镜 X20； 4.培养基种类：F12K+10%胎牛血清； 5.细胞状态与特征简述：细胞呈梭形，透 亮贴壁生长，3－4天传代一次，Giemsa 染色。
2、上皮型细胞
名称：仅形态上似体内，实际上不完全相同 来源：来源于外胚层、内胚层细胞, 如：
皮肤及其衍生物,消化道，乳腺，肺泡, 上皮性肿瘤 形态：类似体内的上皮细胞扁平，不规则多角形，中有圆
形核 生长特点：易相连成片，相靠—紧密相连—成薄层—铺石状
生长时呈膜状移动，很少脱离细胞群而单个活动
上皮型细胞