实验室空气中细菌含量的测定
一.实验目的
测定实验室空气中沉降菌的含量,了解实验室的洁净程度。
二.实验原理
空气中漂浮着各种微生物,将盛有无菌培养液的平民放于监测点上,暴露5min,空气中的细菌便会落在培养基上,然后在37摄氏度的恒温培养箱中培养24h,计数每个培养皿表面的菌落数,由于一个菌落是由一个细菌繁殖而来,菌落总数便可认为是细菌总数。
三.实验材料
琼脂,锥形瓶,无菌水,电热炉,培养皿,卧室灭菌锅,烘箱,37℃生化培养箱,超净工作台
四.实验方法
称取2.35g琼脂,加热溶解到100ml无菌水,存放于锥形瓶中,用封口膜和牛皮纸包装好锥形瓶。
准备五个培养皿,用牛皮纸包好,和锥形瓶一起放进卧室灭菌锅中灭菌,温度121℃,时间30min。
于无菌工作台上,每个培养皿倒进10ml培养基,待冷却凝固。
分别置于室内同一平面五个不同的点(四角加中央),打开皿盖,暴露15min,盖好平皿盖,37℃恒温箱中培养24h,
五.计算方法
按照奥梅梁斯基氏计算法,面积为100平方厘米的培养基表面5min沉降下来的细菌数相当于10L空气中所含菌落数来计算
细菌数(m³)=N*100/A*5/T*100/10=50000N/AT
(A:平板面积cm2、T平板暴露时间min、N:平板菌落数)。