臭氧灭菌效果验证报告
臭氧灭菌效果验证
目录
一、证小组成员名单
二、验证方案批准
三、验证方案
四、验证报告
五、验证报告批注书
一、验证小组成员名单
三、验证方案批准
三、臭氧灭菌效果验证方案引言
1、概述
2、目的
3、适用范围
4、验证判定标准
验证条件确认
1、验证用仪表检验清单确认
2、文件或资料确认
3、检验方法确认
验证内容及步骤
1、臭氧浓度分布测试
1-1、臭氧浓度-时间分布测试
1-2、臭氧浓度-空间分布测试
2、微生物挑战性实验
3、沉降菌测试
验证结果记录及分析
验证结论及再验证
验证计划
引言
1、概述
臭氧（O3）是氧的同素异形体，由三个氧原子（O）组成，由于臭氧分子结构不稳定容
易把多出的一个氧原子抛出而成为氧分子—“新生氧”。
臭氧的氧化能力非常强，对微生物有极强的杀灭能力，它与微生物细胞中多种成分产生反应，从而产生不可逆转的变化而灭亡。
臭氧消毒是利用HVAC系统的循环风作为臭氧的载体，即将臭氧发生器产生的臭氧体由HVAC系统中的净化风机产生的压力风源扩散至整个洁净区域，同时对HVAC系统（净化空调，初、中效过滤器，送回风管道，高效过滤器等）起到杀灭菌和霉菌的效果。
共有3台臭氧发生器，放置在空调机内中效过滤器后面。
消毒时，打开空调机及臭氧发生器，关闭新风和出风，使洁净区内空气保持内循环。
按《臭氧灭菌标准操作程序》进行房间灭菌，连续三次进行微生物挑战性实验、沉降菌测试、测试房间臭氧浓度随时间变化情况。
2、目的
检查并确认臭氧灭菌效果是否符合要求。
3、适用范围
本方案仅适用于臭氧灭菌效果验证。
4、验证判断标准
臭氧浓度—时间分布的标准：在臭氧发生器开启后4min后，所有洁净区域中臭氧浓度
达到10ppm，并且在发生器关闭之前不得低于此浓度。
臭氧浓度—空间分布的标准：在臭氧发生器开启后40min后，所有所有洁净区域中臭氧浓度不低于10ppm。
微生物挑战性实验标准：臭氧发生器开启后，暴露于洁净中的微生物杀灭率应大于90％。
沉降菌标准：微生物最大允许数15个/皿。
严正条件确认
1、验证用仪表检验清单确认
2、文件或资料确认
3、检验方法确认
验证内容及步骤
1、臭氧浓度分布测试
1-1、臭氧-时间分布测试
1-1-1、采样地点：选取距离空调风箱送风口最远且送风口分布最稀少的房间，选择胶囊铝塑包装间。
1-1-2、采样方案
胶囊铝塑包装车间：臭氧开启后40min后，每30min采样一次采样量1.0L （采样器0.1L/次，拉手柄10次），连续检测3hr，臭氧发生器关闭，空调送风时采样一次，20min后采样一次（测在空调送新风时臭氧浓度衰减），采样量1.0L （采样量0.1L/次，拉手柄10次）。
1-2、臭氧浓度-空间分布测试
1-2-1、采样地点：选取如下关键房间
粉碎间、制粒间、双锥混合间、压片间、片剂铝塑包装间、双锥干燥间、胶囊填充间、胶囊铝塑包装间。
1-2-2、采样方案
—从臭氧发生器开启50min后依次采样
—采样量1.0L（采样量0.1L/次，拉手柄10次）
1-3、每一采样点同时采两个平行样。
1-4、采样时采样人员应戴防毒口燥，防止臭氧中毒。
1-5、检验方法及数据处理
1-5-1、具体测定法见附录1
1-5-2、两个平行样臭氧浓度的平均值作为该采样点的臭氧浓度。
2、微生物挑战性实验
2-1、生物指示剂制备
2-1-1、取金黄色葡萄球菌，活化48hr后稀释成1200个/ml的菌液。
2-2-2、臭氧发生器开启后同时打开注入菌液并使之在培养表面均匀分布。
2-3、实验程序
2-3-1、选择压片间进行微生物挑战实验。
2-3-2、臭氧发生器开启同时打开注入菌液的培养皿的上盖。
2-3-3、每隔30min取出2个培养皿，连续监测5hr。
2-3-4、全部培养皿放入37摄氏度环境中，培养48hr后进行菌落计数。
2-3-5、实验结果应记录。
3、沉降菌测试
按沉降菌测试标准操作程序取样。
验证结果记录及分析
验证结论及再验证
验证计划：验证工作应在8月23日至8月31日之间完成。
四、臭氧灭菌效果验证报告
概述
验证条件确认
1、验证用仪表检验清单确认
2、文件或资料确认
3、检验方法确认
验证结果记录分析
1、臭氧浓度分布测试结果
1-1、臭氧浓度-时间分布测试结果
1-2、臭氧浓度-空间分布测试结果
1-3、微生物挑站性实验结果
1-4、沉降菌测试结果
验证结论评价及再验证
概述
本报告的结论根据《臭氧灭菌效果验证方案》进行操作。
验证条件确认
1、验证用仪表检验清单确认
结果：符合要求。
执行人：日期：
复核人：日期：
2、文件或资料确认
结果：符合要求。
执行人：钟武峰日期： 2001-08-23
复核人：苏跃林日期： 2001-08-23
3、检验方法确认
结果：符合要求。
执行人：黄介日期： 2001-08-23
复核人：苏跃林日期： 2001-08-23
验证结果记录分析
1、臭氧浓度分布测试
1-1、臭氧浓度-时间分布测试
结果记录：见附表（一）
结果分析：测试铝塑包装车间的浓度随时间变化符合标准，并且臭氧浓度发生器关闭20min臭氧衰减完了。
方案实施：生产部：
质检部：
设备动力部：
车间：
日期：
1-2、臭氧浓度-空间分布测试
结果记录：见附表（二）
结果分析：在臭氧发生器开启50min后，主要房间的臭氧浓度达到要求。
方案实施：生产部：
质检部：
设备动力部：
车间：
日期：
2、沉降菌测试
结果记录：见附表（四）
结果分析：沉降菌未超过标准，臭氧灭菌后洁净厂沉降菌合格。
方案实施：生产部：
质检部：
车间：
日期：
验证结论评价及再验证
1、根据臭氧发生器产生浓度随时间分布测试符合标准，并且在臭氧关闭20min
后，几乎全部衰减完，对人体不造成伤害。
在臭氧灭菌2hr后，微生物挑战实验结果符合标准，并且尘降菌完全符合要求。
2、臭氧灭菌方法改变需要再验证。
五、验证报告批准书
此验证达到了验证目的，验证合格。
准予按报告指示进行控制投入使用。
批准人：日期：2001.08.29
附表（一）：
臭氧浓度检测方法
1、割断检测管两端封头。
2、将检测管插在采样器进气口上。
3、将采样器手柄拉至第2档位：前后拉一次，共采样100mi.待检测管中指示剂
颜色终止，即可从白色所到刻度读出可靠数据。
4、检测管前不加预防处理管。
5、100ml进气时间2~3min。
附表一：臭氧浓度-时间测试记录
测试时间：胶囊铝塑包装车间
测试时间：2001.08024 开始时间：19：10
检测人：复核人：
附表二：臭氧浓度-空间分布测试记录
测试日期：2001.08.24 开始测试时间：19：10
检测人：
复核人：
附表（三）：中国出口检验操作记录
检验项目及结果：
使用设备：SHH-150S恒温湿培养箱
结论：本次验证结果符合验证要求。
复核人：检验人：
中间产品检验报告单
请验：2001年8月25日报告：2001年8月27日
负责人：复核人：检验人：
附表（四）
沉降菌监测报告
测试单位：制剂车间检验编号：
环境温度： 23.7摄氏度培湿温度： 35+/-摄氏度
相对温度： 61﹪检测日期： 2001年8月24日
测试状态：静态报告日期： 2001年8月26日
测试依据：《药品生产质量管理规范》（1998年修订）GB/T16294-1996《医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法》。