罗氏Cobas e601全自动免疫分析仪检测人附睾蛋白4（HE4）的性能
验证
目的验证和评价罗氏Cobas e601全自动免疫分析仪检测系统人附睾蛋白4项目的分析性能。
方法参考美国临床实验室标准化协会（CLSI）系列文件和相关文献，对罗氏Cobas e601电化学发光免疫检测系统测定血清人附睾蛋白4（HE4）的精密度、准确度、分析灵敏度、分析测量范围、生物参考区间5大分析性能进行验证和评价，并将实验结果与厂商声明的性能或公认的质量标准进行比较。
结果测定均值为100.66pmol/L的质控样本，验证后S批内为0.827 ，S 总为1.679；测定均值为1296.60pmol/L的质控样本，验证后S批内为6.077，S 总为5.596 。
S批内≤1/4TEa，S总≤1/3TEa（CLIA’88）。
准确度在±1%以内，低于卫生部允许的偏差范围；分析灵敏度0.975，线性理想。
实测线性范围60.65pmol/L～1364.50 pmol/L；试剂盒线性范围15pmol/L～1500 pmol/L，符合性能要求（见表4）。
2.5 生物参考区间验证结果Roche公司提供的参考区间为0.00pmol/L～104.00 pmol/L ，20个健康人血清标本浓度范围32.04pmol/L～67.05 pmol/L，验证结果均在仪器说明的参考区间内，提示该95%生物参考区间可以接受。
3 讨论
人附睾上皮分泌蛋白4（human epididymis protein，HE4）是近年来研究较热门的一种新型肿瘤标志物，并拟在中国临床上推广应用。
HE4属于乳清酸性4-二硫化中心（WFDC）蛋白家族[1]，具有疑似胰蛋白酶抑制剂的特性。
此家族中的其它蛋白还包括SLPI，Elafin和PS20（WFDC1）。
HE4基因编码一段长度为13kD的蛋白，包括含有两个WFDC结构域的一条单链[2]。
卵巢癌是全世界范围内导致女性癌症相关死亡中的第四大常见原因，分泌型HE4在卵巢癌患者的血清中有高水平表達[3]，HE4检测用于监测上皮卵巢癌疾病复发或进展。
HE4结合CA125检测还可进一步用于评估存在盆腔肿瘤的停经前和绝经后女性罹患卵巢癌的风险[4]。
医学实验室认可是目前检验医学界讨论和关注的热点。
一个检测系统的分析性能能够满足临床的要求是实验室认证和”检验结果互认”得基本保证。
根据CLIA’88、ISO15189医学实验室认可、卫生部《三级综合医院评审标准实施细则》、《医学检验科管理规范》等文件的要求，凡检测系统在用于临床之前，必须对其主要分析性能进行验证，包括精密度、准确度、线性范围、分析灵敏度和生物参考区间等指标，证实其能够达到临床检测所要求的标准[5]。
Roche Cobas E601电化学发光分析技术是继放射免疫、酶免疫、荧光免疫、化学发光之后发展起来的新一代的更灵敏、更准确的小分子标记免疫分析技术，电化学发光免疫分析法，无论是灵敏度、准确性、精密度均优于放射免疫分析法和ELISA，并且克服了前带、倒钩等假阴性现象。
本研究对Roche Cobas E601
电化学发光仪检测系统测定血清HE4的分析性能进行验证，为该项目在本院的临床应用提供依据，也为临床化学发光免疫检验的方法学性能验证提供简便易行的方案和实验方法。
检验结果必须要有好的精密度，也即是好的重复性。
如果没有良好的重复性，准确性就无从谈起[6]。
该HE4项目测定均值为100.66pmol/L的质控样本，验证后S批内为0.827pmol/L，S总为1.679pmol/L，批内不精密度0.82%，总不精密度1.67%，符合厂商声明；测定均值为1296.60pmol/L的质控样本，验证后S批内为6.077pmol/L，S总为5.596pmol/L，批内不精密度0.47%，总不精密度0.43%，符合厂商声明。
S批内≤1/4TEa，S总≤1/3TEa（CLIA’88），可认为HE4项目精密度验证通过。
准确度验证结果的SE%为0～0.61%，SE%≤1/2CLIA’88 TEa，即认为该仪器测定HE4的准确度验证通过，满足临床需求，并可进行其他方法学验证。
实验结果显示，HE4的分析测量范围在60.65pmol/L～1364.50 pmol/L，与厂商提供线性范围15pmol/L～1500 pmol/L略有差异，原因可能是[7]：①样本选择的局限，样本浓度范围不够宽；②临床实验室条件和厂家检测条件存在差异，导致实验得出的分析测量范围与厂家略有不同。
20个健康人血清标本浓度范围在32.04pmol/L～67.05 pmol/L，验证结果均在仪器说明的参考区间内，提示该95%生物参考区间可以接受。
按照CLSI C28-A的要求，可直接使用厂商提供的参考区间。
本研究表明罗氏Cobas e601全自动免疫分析仪检测血清HE4的验证结果与厂商提供的分析性能基本一致，为临床应用该项目提供了详实、准确、可靠地依据，对规范电化学发光免疫检验，提高检验质量具有重要意义。
参考文献：
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[4]Partheen K，Krist jansdottir B，Sundfeldt K.Evaluation of ovarian cancer biomarkers HE4 and CA-125 in women presenting with a suspicious cystic ovarian mass[J].Gynecologic Oncology，2011：244-252.
[5]ISO15189，医学实验室质量和能力认可准则[S].
[6]万腊根，孔蕴源，罗清，等.定量检验系统临床可报告范围评价方法的探讨[J].现代检验医学杂志，2010，25（5），150-152.
[7]陈斌鸿，罗恒，李伟煊，等.奥林巴斯AU5400全自动生化分析仪检测尿素氮临床可报告范围的建立与评价[J].实验与检验医学，2011，29（2），117-120.。