土壤中微生物的分离
第一节 微生物生长的测定 以数量变化对微生物生长情况进行测定 通常用来测定细菌、 通常用来测定细菌、酵母菌等单细胞微生物的生长情况 或样品中所含微生物个体的数量(细菌、孢子、酵母菌) 或样品中所含微生物个体的数量(细菌、孢子、酵母菌) 培养平板计数法
采用培养平板计数法要求操作熟练 准确,否则难以得到正确的结果: 、准确,否则难以得到正确的结果: 样品充分混匀; 样品充分混匀; 每支移液管及涂布棒只能接触一个 稀释度的菌液; 稀释度的菌液; 同一稀释度三个以上重复,取平均值; 同一稀释度三个以上重复 取平均值; 取平均值 每个平板上的菌落数目合适, 每个平板上的菌落数目合适,便于 准确计数; 准确计数;
一个菌落可能是多个细胞一起形成, 一个菌落可能是多个细胞一起形成,所以在科研中一般用 菌落形成单位( 菌落形成单位(colony forming units, CFU)来表示,而 , )来表示, 不是直接表示为细胞数。 不是直接表示为细胞数。
实验步骤
• 将10g土样装入含 土样装入含100ml无菌水的锥形瓶中振 土样装入含 无菌水的锥形瓶中振 荡10min • 取1ml移入含 移入含9ml无菌水的试管中,吹吸均匀, 无菌水的试管中, 移入含 无菌水的试管中 吹吸均匀, 为稀释10倍的样品 为稀释 倍的样品 • 依次进行梯度稀释 • 倒培养基 • 取合适稀释度的样品1ml涂布 取合适稀释度的样品 涂布
实验五 土壤中微生物的分离
实验目的
• 掌握从样品中分离不同种类的微生物, 掌握从样品中分离不同种类的微生物, 并进行活菌计数 • 巩固无菌操作的方法
微生物生长: 微生物生长: 单位时间里微生物数量或生物量( 单位时间里微生物数量或生物量(Biomass)的增加。 )的增加。 个体计数 微生物生长的测定: 微生物生长的测定: 群体重量测定 群体生理指标测定 评价培养条件、营养物质等对微生物生长的影响; 评价培养条件、营养物质等对微生物生长的影响; 评价不同的抗菌物质对微生物产生抑制(或杀死 作用的效果 评价不同的抗菌物质对微生物产生抑制 或杀死)作用的效果; 或杀死 作用的效果; 客观地反映微生物生长的规律; 客观地反映微生物生长的规律;
实验安排
• 10-510-610-7稀释度为细菌培养 牛肉膏蛋白 胨培养基 • 10-310-410-5 稀释度为放线菌培养,注意培养 稀释度为放线菌培养, 基在倒入平板前先加入数滴重铬酸钾溶液 高氏一号培养基 • 10-210-310-4稀释度为真菌培养 马丁氏培养 基