抗体介导的排斥反应研究进展
P-CEL-2015.06-020 Valid Until 2017.06 专业资料，仅供医学药学专业人员参考 制作单位：上海罗氏制药有限公司 1 地址：上海市浦东新区龙东大道1100号
目录
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AMR的定义和诊断 AMR的危害和不良预后预测因素 AMR的预防与治疗
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பைடு நூலகம்
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DSA的检测方法及应用范围
• 常用的检测方法为：补体依赖性淋巴细胞毒性(CDC )试验、酶联免疫吸附试验法(ELISA)、 流式细胞仪法(FC)和基于Luminex的检测方法(LUM)。
移植前基 本信息价 值 + + + 仅用于致 敏患者 + + + 移植后价 值 -/+ + -/+ ++ -/+ ++ +++
抗体介导的排斥反应(AMR)理论发展历程
• 20世纪50年代，对移植排斥的原因有过激烈的争论，焦点即为造 成移植物直接损害的到底是细胞还是抗体。
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1969年，Patel 等发现移植受者体内预存的供体特异性抗体（DSA） 可导致超急性排斥反应。
1970年，Jeanret 等在发生严重血管性排斥的肾移植受者 体内检测到了新产生的DSA。
抗体与血管内皮互作的证据，满足以下至少1项
肾小管周围毛细血管存在线性C4d染色 至少伴随中度的微血管炎症（g+ptc≥2） 经确认的活检组织基因转录表达增加，表征内皮损伤
急性AMR
DSA存在的血清学证据(HLA或其他抗原)
g：Banff肾小球炎评分；ptc：肾小管周围毛细血管；v： Banff动脉炎评分
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AMR的组织学诊断
A
B
急性AMR
A：单核细胞粘附肾小球内皮
B：肾小管周围毛细血管单核细胞浸润
C
D
慢性AMR
C：肾小球毛细血管增厚
Nankivell BJ, Alexander SI. N Engl J Med. 2010;363(15):1451-62.
慢性AMR
DSA存在的血清学证据(HLA或其他抗原)
Cg：Banff慢性肾小球病评分；TMA：血栓性微血管病； g：Banff肾小球炎评分；ptc：肾小管周围毛细血管；
Haas M. Curr Opin Organ Transplant. 2014;19(3):315-22.
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慢性组织学损伤的形态证据，满足以下至少1项
移植肾小球病（cg>0），排除慢性TMA 严重的肾小管周围毛细血管基底膜多层化(需电镜检查) 新发动脉内膜纤维化，排除其它病因
抗体与血管内皮互作的证据，满足以下至少1项
肾小管周围毛细血管存在线性C4d染色 至少伴随中度的微血管炎症（g+ptc≥2） 经确认的活检组织基因转录表达增加，表征内皮损伤
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+++ +++ -
方法价值评分从无价值（-）到非常有价值（+++） HAR ：超急性排斥反应； SPI：固相免疫测定； SAB：单抗原珠
Tait BD, et al. Transplantation. 2013;95(1):19-47.
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DSA 在AMR诊断中的作用和检测技术的进步
• • • • DSA可能针对HLA或其它内皮细胞抗原，包括移植前预存的和移植后新产生的DSA。 Banff 2013 标准中，DSA存在的证据对于急性或慢性AMR都是必需的。 固相免疫测定技术（SPI）的发展提高了移植领域DSA的检测精度，也为DSA在 AMR中作用的研究开拓了新的空间。 2013 移植协会（TTS）共识指南：移植HLA抗体和非HLA抗体相关问题的管理和 检测——该指南的发布为目前DSA的检测方法和临床应用提供了指导。
Haas M. Curr Opin Organ Transplant. 2014;19(3):315-22.
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Banff 2013 标准：慢性AMR的诊断
• 慢性AMR的诊断必须同时符合以下3方面特征：
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Banff 2013 标准：急性AMR的诊断
• 急性AMR的诊断必须同时符合以下3方面特征：
急性组织学损伤证据，满足以下至少1项
微血管炎症（g >0或ptc>0） 内膜或透壁动脉炎（V>0） 急性血栓性微血管病，排除其它病因 急性肾小管损伤，排除其它病因
Banff 2013 标准： C4d染色阳性但无明显排斥的诊断
• Banff 2013 标准的一项重要改动是不再将C4d染色作为AMR诊断的必要条件。同时 对C4d染色阳性但无明显排斥反应的诊断必须同时符合以下3方面特征：
肾小管周围毛细血管线性C4d染色
g =0, ptc=0, cg=0（光学或电子显微镜检 查）， V=0；无TMA，无肾小管周围毛细血 管基底膜多层化，无急性肾小管损伤
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1. Feucht HE, et al. Kidney Int,1993,43:1333. 2. Solez K, et al. Am J Transpl. 2007,7:518. 3. Halloran PF. Am J Transpl. 2003,3:639. 4. Haas M. Curr Opin Organ Transplant. 2014;19(3):315-22.
多形核细胞
DSA与细胞表面 抗原直接作用
补体结合途径
趋化因子 黏附分子（VCAM-1、ICAM-1、E-selectin）
增殖
补体抵抗
白细胞迁移 血栓形成 增殖 补体抵抗
趋化因子（IL-1、IL-6、IL-8、CCL5）
白细胞迁移、粘附
A. Djamali, et al. American Journal of Transplantation 2014; 14: 255–271
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AMR的机制：DSA通过多途径介导移植物内皮损伤
供体特异性抗体（DSA）可通过多种途径导致移植物毛细血管内皮损伤，包括：与细胞 表面抗原直接作用；补体结合途径或募集炎症细胞
炎症细胞募集，毛细血管炎
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1990s早期，Halloran 等明确了在移植肾急性排斥反应时伴有抗 HLA的新DSA产生,并初步提出了抗体所致免疫损伤的途径为“补 体-中性粒细胞途径。
1. Terasaki PI. Am J Transp,2003,3:665. 2. Patel R, et al. N Engl J Med. 1969,280:735. 3. Jeannet M, et al. N Engl J Med. 1970, 282:111. 4. 郭晖. 中华移植杂志(电子版). 2012(02):138-43.
方法 CDC/改良 CDC FC/改良FC 通用ELISA 特异ELISA 通用LUM 特异LUM LUM SAB
用途 预防HAR或早 期AMR 预防HAR或早 期AMR 检测HLA抗体 HLA抗体分类 检测HLA抗体 HLA抗体分类 HLA抗体分类
抗体筛查价值
交叉配型价值
特性 需要供者细胞 需要供者细胞 非敏感患者有效 敏感性低 检测抗体幅度和水平 敏感性低 检测基因座/等位基因
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AMR中肾小球及肾小管周围毛细血管C4d沉积（棕色）伴单核细胞浸润
Nankivell BJ, Alexander SI. N Engl J Med. 2010;363(15):1451-62.
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抗体介导的排斥反应(AMR)理论发展历程
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1993年， Feucht 等报道了移植物毛细血管内皮表面补体片段 C4d沉积与移植物失功的关系以及可以作为AMR的组织学指标。 2001年Banff会议AMR补充入病理分型标准。 2003 年, Halloran 等对同种异型抗体引起的排斥反应综合征 进行了明确定义； 同年，Terasaki 等提出了器官移植的体液性排斥反应学说，认 为抗体是导致移植物损伤的直接原因。 2007年和2013年Banff会议对AMB的诊断标准进行了进一步的 丰富和补充。
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AMR的分型诊断标准： Revised Banff 2013 criteria