分子生物学-08 转录
-10区:较保守,为TATAAT,称为TATA box,又叫Pribnow框, 为RNA Pol牢固结合的位点,简称结合位点。 -35区:大部分启动子为TTGACA序列,为RNA Pol的σ亚基识别 位点,又称Sextama框。RNA Pol全酶可同时覆盖-35区和-10区, 长度为70bp。
共有序列 色氨酸操纵子 酪氨酸tRNA 乳糖操纵子 λPL NP9621(stx2eB)
第八章 RNA的转录及转录后的加工
以 DNA 为 模 板 合 成 RNA ( 核 糖 核 酸 ) 的 过程称为转录(transcription)。
RNA的合成和DNA的合成从核苷酸水平 上看,二者是很相似的,但生物学意义不同: DNA的合成仅是基因组的精确复制,并且固定 不变,RNA的合成涉及许多性状的遗传和表达, 并在多级水平有调控。
3、tRNA 运送氨基酸,成熟的tRNA为三叶草结构,富含稀 有碱基。
一、RNA聚合酶与启动子
1、RNA聚合酶 原核生物的RNA聚合酶只有一种,可催化三种RNA的合成。
E.coli RNA聚合酶由6个亚基组成,即α2ββ’ ωσ,
α、β、β’、σ四种亚基的分子量分别为36.5, 150,160,16KD,
-35 TTGACA TTGACA TTTACA GCGCAA TTGACA TGAACA
-10 TATAAT TTAACT TATGAT CATGAT GATACT TATATA
不保守的序列较多,多数只有3个碱基与共有序列 一样
共有序列之间相距17bp时的转录效率最高
Escherichia coli isolate NP9621 Shiga-like toxin IIe variant A B genes, complete AUTHORS Wang,J.F., Ran,X.Q. and Wu,Y.J.
单顺反子
多顺反子
SD序列 起始码
终止码
SD序列 起始码
终止码
AGGAGG ATG
TGA
AGGAGG ATG
TGA
弱化子
spacer
2、rRNA 参与核糖体组装,合成蛋白质之地。原核生物的 rRNA有3种:5S rRNA,16S rRNA,23S rRNA,分 别含有120,1541,2904个核苷酸。
source 1..1299
/organism="Escherichia coli“
/mol_type="genomic DNA“
/serotype="O121:HNT“
/isolate="NP9621"
/isolation_source="swine with edema disease“
/db_xref="taxon:562"
核心酶:与DNA具有很高的亲合 性,但不能识别启动子,它与 DNA的结合是随机的,只有与σ 因子结合形成全酶后才能启始 特定的RNA的合成。
2、启动子
起始RNA合成的一段DNA序列称启动子(Promotor),在启动子 序列中,有两个特殊的序列,以编码RNA的第一个DNA核苷酸定 为+1,在其上游-10bp和-35bp处, 有两个6个核苷酸组成的共 有序列(consensus sequence),为-10区和-35ote="SLT IIe subunit A; N-glycosidase; ribosome-inactivating protein“
/codon_start=1
/product="Shiga-like toxin IIe variant subunit A“
/protein_id="AAQ17546.1“
/db_xref="GI:33391900"
/translation="MKCILLKWILCLLLGFSSVSYSQEFTIDFSTQQSYVSSLNSIRTAISTPLEHISQGATSVSVINHTPPGSYISVGIRGLDVYQERFDHLR
LIIERNNLYVAGFVNTTTNTFYRFSDFAHISLPGVTTISMTTDSSYTTPQRVAALERSGMQVSRHSLVSSYLALMEFSGNTMTREASRAVLRFVTVTAEA
Structure of a transcription unit
DNA
+1
promoter
Transcribed
ATACG
TATGC
region terminator Antisense strand
RNA AUACG
Transcription
第一节、原核生物RNA及其合成
一、原核生物RNA的结构及种类 1、mRNA:原核生物mRNA的寿命较短,半衰期仅几分钟;
转录的共性
1、选择基因中的编码区转录 2、转录单位:启动子、转录区、终止子 3、DNA的2条链(正链、负链),
负链(即反义链、无义链)为转录的模板链, 正链(即有义链、编码链)序列与RNA完全一样 4、RNA合成的方向为5`-3`方向,与模板链反向互补;原 料为NTP 5、 RNA聚合酶,可从头合成RNA,没有反方向的外切 校对功能
全酶分子量为465KD, α、β、β’、σ分别 是rpoA,rpoB,rpoC, rpoD的产物。
α2ββ’ω形成的聚体称为核心酶(core enzyme), σ( Sigma因子)与核心酶结合不紧密。在同一个 原核生物中,核心酶相同,但σ因子不同,不同细 菌的σ因子也不同 σ因子作用:识别不同的启动子,转录出不同的RNA。
在mRNA的起始码AUG上游4-13 bp之前的一段嘌 呤序列AGGAGG,称Shine-Dalgarno序列,简称SD 序列,为mRNA与核糖体的结合位点。
有些mRNA前导区中含有一个调节区称弱化子 (attenuator),多顺反子mRNA分子还含有顺反 子间序列,称隔离序列、间隔区(spacer)。 原核生物mRNA的5`端和3`端没有特殊序列。
常在转录过程中就开始翻译。 mRNA的碱基序列从起始密码到终止密码以3个碱基为一
组读码,3个为一组的碱基称为密码子。每一密码子对应一 个氨基酸或一个终止信号。 对应一条多肽链的DNA片段加起始信号,终止信号称为顺反子 (Cistron) 只编码一条多肽链的mRNA称单顺反子mRNA,多见于真核 可编码几条多肽链的mRNA称多顺反子mRNA,所编码的蛋白常 常是一个代谢过程途径中的几种蛋白。多见于原核