生化实验（4）
血浆蛋白 醋酸纤维膜电泳
实验目的

了解血浆蛋白质电泳分 离的基本原理、操作基本 方法及临床意义。
实验原理
电泳法 在外电场的作用下，带电颗 粒，将向着与其电性相反的电极
移动，这种现象称为电泳。
带电粒子在电场中移动的速 度取决于所带的电荷数量及质点 的大小和形状； 此外还受外界因素的影响如， 电场强度、溶液的PH、离子强度 等。
2、血浆蛋白： 血浆中蛋白质的PI小于7.0，在 PH8.6 Buffer中解离成负离子，在 电场中向正极移动。
以此种方法能将血浆蛋白分离 成:清蛋白、α1、α2、β、纤维蛋 白原和γ-球蛋白六条带
操 作
1、准备 （1）电泳仪的准备 （2）CAM准备 划线（毛面，距一端1.5cm， 铅笔划一横线） 放入巴比妥缓冲液中浸泡 20min,充分浸透源自1.5cm 杨8cm
2cm
2、点样 （1）无光泽面朝上，吸去多余Buffer, （2）用盖玻片蘸取少量血浆，垂直印 在划线处。 注意：不能超出边缘；不能重复点样； 必须与边缘平行
3、平衡：（5min) 无光泽面朝下，点样侧位于阴 4、电泳： 打开电源，U＝160V或I＝1.6mA t=45－50min；冬季1小时 5、染色：氨基黑10B 染色充分，5－10min 6、漂洗： 3－4个漂洗皿，洗去染料至背景无色