实验一四氧嘧啶剂量对小鼠糖尿病模型的影响
一、实验原理
化学性糖尿病动物模型诱发方便、来源广,是目前较广泛的模型。
化学物质诱导糖尿病动物模型是应用化学物质损伤胰腺β细胞,从而引起动物发生糖尿病。
目前常用的药物有链脲菌素和四氧嘧啶,其作用机制是选择性损伤胰腺β细胞,引起部分细胞坏死,导致血胰岛素不同程度下降伴随血糖升高。
但是链脲菌素和四氧嘧啶的实验条件很难掌握,直接影响其造模功能。
为此,我们进行本研究,探究不同给药剂量及小鼠性别的不同方案以获得最佳实验条件,建立一种经济、稳定的高血糖动物模型。
二、材料与试剂
动物:雄性小鼠,体重18~22g。
仪器与器具:血糖测定仪、天平、注射器及针头、鼠笼。
试剂:临用前用生理盐水配制成1%(10mg/ml)的四氧嘧啶(ALX),四氧嘧啶分子量:142.07。
三、实验方法
1、将实验小鼠分组编号
将60只小鼠随机分成6组,其中第一组为对照组,后面五组为实验组,每组雌雄各半,并对其做好标记。
2、不同剂量四氧嘧啶糖尿病小鼠模型建立
给60只小鼠禁食24h(不禁水),腹腔分别注射四氧嘧啶160,180,200,220和240mg/kg(注射时应在30s内注射完成,注射越快越好),对照组腹腔注射生理盐水,72h后用快速血糖仪测血糖(测前禁食12h)。
饮食上给予低蛋白和高动物脂肪食物能增加糖尿病的发生率。
注意:大剂量四氧嘧啶可致大部分β细胞破坏,使犬、猫产生永久性糖尿病。
3、小鼠高脂血症模型的建立及检测:测前禁食4h ,72 h后测空腹血糖血糖 > 16.8mmol/L(300mg/dl)~10.00mmol/L(180 mg/dl)的小鼠为成功模型。
对实验结果进行统计学处理分析,得出实验结论。