组织包埋步骤
一、 脱水
① 95%乙醇 Ⅰ 30 min
② 95%乙醇 Ⅱ 30 ~ 40 min
③ 100%乙醇 Ⅰ 20 ~ 30 min
④ 100%乙醇 Ⅱ 20 ~ 30 min
⑤ 100%乙醇 Ⅲ 20 ~ 30 min
⑥ 二甲苯 Ⅰ 20 min
⑦ 二甲苯 Ⅱ 30 min
二、 浸蜡包埋
⑧ 软蜡 30 min
⑨ 软蜡 30 min
⑩ 硬蜡 2 ~ 3 h (或过夜温度低2 ~ 3℃)
⑪ 包埋蜡
切片石蜡58 ~ 60 ℃;脱水、浸蜡过程可在温箱中进行。
常规HE 染色步骤
① 二甲苯 Ⅰ
② 二甲苯 Ⅱ
③ 95%乙醇 Ⅰ
④ 95%乙醇 Ⅱ ⑤ 80%乙醇 (可有可无)
⑥ 蒸馏水 (<10 min )
⑦ 苏木精染色 (10 ~ 15 min )
⑧ 流水稍洗去苏木精液 (1 ~ 3 s 流水冲组织背面)
⑨ 1%盐酸乙醇 (1 ~ 3 s 分化上下移动 去蓝色)
⑩ 流水冲洗 (15 ~ 20 min 去盐酸)
⑪ 蒸馏水过洗 (1min )
⑫ 0.5%伊红液染色 (1 ~ 3 min )
⑬ 95%乙醇 Ⅰ
⑭ 95%乙醇 Ⅱ
⑮ 95%乙醇 Ⅲ
⑯ 100%乙醇
⑰ 100%乙醇 ⑱ 二甲苯 Ⅰ (20 min )
⑲ 二甲苯 Ⅱ (20 min )
⑳ 二甲苯 Ⅲ (≥20 min )
21 中性树胶封固 (将周围液体吸去 加光学树胶1滴 盖片)
伊红染液配法
① 水溶性伊红0.5 g ,用最少量水(1 ~ 2 ml )溶解后
② 用冰醋酸滴加至完全沉淀(呈浆糊状)
③ 加95%酒精至100 ml
苏木素染液配法
④ 苏木素1g
⑤ 100%乙醇10 ml
⑥ 钾明矾 20 g
⑦ 蒸馏水200 ml
⑧ 氧化汞0.5 g ——加热离火后(1 min )缓慢少量沿杯加入氧化汞,
以免溢出伤人
1%盐酸乙醇(分色)
⑨ 盐酸1ml
⑩ 70%乙醇99ml
淡氨水—在400 ml 自来水中滴2滴
浓氨水—胞核蓝化。