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4.4.1 液-固吸附色谱
固定相：固体吸附剂，如硅胶、氧化铝等，较常使 用的是5～10μm的硅胶吸附剂。
流动相：各种不同极性的一元或多元溶剂。 基本原理：组分在固定相吸附剂上的吸附与解吸； 适用于分离相对分子质量中等的油溶性试样，对具有 官能团的化合物和异构体有较高选择性。
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阳离子交换：R—SO3H + M+ = R—SO3 M + H + 阴离子交换：R—NR4OH +X- = R—NR4 X + OH-
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基本原理
平衡时，平衡常数为
K B/A
[R B][A] [B][R A]
对于磺酸型阳离子交换树脂，一价阳离子的KB/A值顺序：
Cs+>Rb+> K+>NH4+> Na+>H+>Li+
二价阳离子的KB/A值顺序：
Ba2+>Pb2+> Sr2+>Ca2+> Cd2+>Cu2+
对于季胺型阴离子交换树脂，一价阴离子的KB/A值顺序：
ClO4-> I-> HSO4-> SCN-> NO3-> Br-> NO2-> CN-> Cl-> BrO3-> OH-> HCO3-> H2PO4-> IO3-> CH3COO-> F-
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离子交换分离实例
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4.4.4 离子色谱
ion chromatography
离子色谱是在20世纪70年代中期 发展起来的一种技术，其与离子交 换色谱的区别是其采用了特制的、 具有极低交换容量的离子交换树脂 作为柱填料，并采用淋洗液抑制技 术和电导检测器，是测定混合阴离 子的有效方法。 有关内容将在本章第五节中讲授。
附得多，吸附作用强，该组分的保留时间长，分配系数也
大。吸附平衡常数K可以由吸附等温线数据求出。
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等温吸附线与色谱峰形：
拖尾峰(凸形等温吸附线)： 被吸附分子首先占据强吸附力
的点。低浓度时，主要被强吸附 力的点吸附，保留时间长。
浓度高时，较多溶质分子被吸附力弱的点吸附，造成色 谱峰中心部分运动速率较快，峰前移，而后沿部分吸附力 相对较强，运动速率较慢，形成拖尾峰。
系数存在差异，导致在固定相中滞留时间不同，从而实现
色谱分离。
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离子对的容量因子k可表示为：
k
DX
VS VM
K XY
[Y
]水相
1
则组分的保留时间：
tR
L u
(1
KXY [Y ]水相
1）
保留值随KXY和[Y-]水相的增大而延长，而KXY取决于对 离子和有机相的性质，则控制流动相中加入的对离子特性
基本原理：
流动相中的溶质分子（X）与溶剂分子（S）在固定相 吸附剂上的竞争吸附：
Xm + nSa = Xa + nSm 下标m、a分别表示流动相和固定相，n是被吸附的溶剂分子
数。达到吸附平衡时，吸附平衡常数（K）可表示为：
K
பைடு நூலகம்
[Xa ][Sm ]n [Xm ][Sa ]n
K分配系数，但K值大，表明该溶质分子在固定相上被吸
第四章 高效液相色谱法和 超临界流体色谱法
High performance liquid chromatography and Supercritical fluid chromatography
第五节 液相色谱中的 主要分离类型
main separating types in LC
4.4.1 液-固吸附色谱 4.4.2 液-液分配色谱 4.4.3 离子交换色谱 4.4.4 离子色谱 4.4.5 离子对色谱 4.4.6 空间排阻色谱 4.4.7 亲和色谱
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分析实例：
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4.4.3 离子交换色谱
固定相：阴离子交 换树脂或阳离子离子交 换树脂。
流动相：阴离子交 换树脂作固定相，采用 酸性水溶液；阳离子交 换树脂作固定相，采用 碱性水溶 。
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离子交换基本原理
组分与离子交换剂之间亲和力的大小与离子半径、电 荷、存在形式等有关。亲和力大，保留时间长。
和浓度可以调整组分保留时间，达到提高色谱分离选择性
的目的。
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分析实例：
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4.4.6 排阻色谱
size- exclusion chromatography
固定相：凝胶(具有一定大小孔隙分布)。
原理：按分子大小分离。小分子 可以扩散到凝胶空隙中通过，出峰 最慢；中等分子只能通过部分凝胶 空隙，中速通过；而大分子被排斥 在外，出峰最快；溶剂分子小，故 在最后出峰。
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基本原理：
形成的离子对化合物X+Y-，在两相间进行分配：
平衡常数：
X+水相 + Y-水相 = X+Y-有机相
K XY
[X Y ]有机相 [X ]水相[Y ]水相
溶质在两相间的分配系数DX为：
DX
[X Y ]有机相 [X ]水相
K XY
[Y ]
不同待测离子与反离子形成离子对的能力不同，分配
液-固吸附分离模式适用于分离相对分子质量中等的油溶 性试样，对具有官能团的化合物和异构体有较高选择性。
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4.4.2 液-液分配色谱
固定相与流动相互不相溶。 基本原理：组分在固定相和流动相上的分配。 流动相：亲水性固定液，采用疏水性流动相，即流动相 的极性小于固定液的极性(正相 normal phase)，反之流动相 的极性大于固定液的极性(反相 reverse phase)。正相与反相 的出峰顺序相反。 固定相：早期涂渍固定液，现已不采用。 化学键合固定相：将基团通过化学反应键合到硅胶（担 体）表面的游离羟基上，如C18柱（反相柱）。
全部在死体积前出峰。 相对分子质量在100～105范围内 的化合物按质量分离。
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基本原理：
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4.4.5 离子对色谱 ion pair chromatography
将一种(或多种)与溶质离子电荷相反的离子(对离子或 反离子)，加到流动相中与溶质离子结合形成疏水性离子 对，能够在两相之间进行分配。
阴离子分离：对离子常用烷基铵类，如氢氧化十六烷 基三甲胺。
阳离子分离：对离子常用烷基磺酸(己烷磺酸钠)。 反相离子对色谱：非极性的疏水固定相(C18柱)，含有 对离子Y+的甲醇-水或乙腈-水作为流动相，试样离子X-进 入流动相后，生成疏水性离子对Y+X-。