加入物（ml） 空白管
标准管
S1
S2
测定管(U) U1 U2
血清
——
—— —— 0.15 0.15
133μ mol/L肌酐
标准应用液
——
0.15 0.15 —— ——
生理盐水

0.15
—— —— —— ——
R1
0.75
0.75 0.75 0.75 0.75
R2
0.75
0.75 0.75 0.75 0.75
八、临床意义
肌酐经肾小球滤过后不被肾小管重吸收，通过肾 小管排泄。只有当GFR下降到正常的1/3时，Scr才明 显上升，是反眏GFR减退的后期指标。 增高：见于各种原因引起的肾小球滤过功能减退：各种 肾病，急慢性肾衰竭、重度充血性心力衰竭、心肌炎 等。 降低：见于尿崩症、进行性肌萎缩、白血病、贫血等
一、实验目的
1.掌握血清肌酐的测定原理和方法。 2. 了解肌酐测定的参考范围及临床意义。
二、实验原理
在碱性条件下，血清中的肌酐（Cre） 苦味酸反应，生成橘红色的苦味酸肌酐复合物。 检测505nm波长处吸光度的变化，可知被测血 清中的肌酐的浓度。其反应式如下：
肌酐+碱性苦味酸 OH- 红色物质
九、方法学评价
1.化学法：即苦味酸法，该法成本低廉，方法简便， 但试剂具毒性和腐蚀性。
2. 酶法：准确度和灵敏度高，采用两点速率法，适 合于自动生化分析仪检测。
SUCCESS
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2020/1/21
实验五 苦味酸法测定血清肌酐
肌酐（CRE）是人体内肌酸代谢的最终产物， 由肾排出，少部分来自食物，大部分在体内生成， 血肌酐的浓度主要取决于GFR。 血肌酐的测定对中晚期肾疾病临床意义较大。 肌酐测定方法有化学法和酶法。 酶法主要有三种类型：肌氨酸氧化酶法、肌酐氨基 水解酶法和肌酐亚氨基水解酶法。
三、器材
1、主要器具
试管与试管架
微量移液器
三用水浴箱
可见分光光度计
四、试剂
1.试剂：R1：氢氧化钠

R2：苦味酸
工作液：将R1与R2按1：1的比例混合面成。
2.肌酐标准应用液(133μmol/L)
SUCCESS
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2020/1/21
五、操作步骤
取试管5支，按下表操作
混匀后，37度水浴箱放置，2分钟后，波长505nm处，空白管调零，
先读取S1、U1吸光度，5分钟后再读取S2、U2吸光度。
六、计算
血清肌酐（mmol/L）= ΔAU/ΔAS×133μmol/L
参考区间：男性：62-115μmol/L 女性：53-97μmol/L
七、注意事项
1.血标本无溶血，应及时处理。 2.工作液开盖混合后，应置2-8度避光保存，稳定期3天 。