肿瘤组织消化方案
1. 将保存在-80°的肿瘤组织取出后立即放在37°水浴锅内快速解冻，在超净台内将组织块吸出放入新的EP管中，离心去上清，加入1ml红细胞裂解液，混匀，室温裂解3min（如无血细胞污染可省略）；
2. 离心（500g, 5min）去上清，将组织置于60mm培养皿中，用刀片、眼科剪去除掉脂肪，然后切碎组织(2mm3)，加入1mlHBSS并转移至2ml离心管离心（500g, 5min）去上清。

乳腺癌
加入适量HBSS/细胞培养基配制的胶原酶III工作液（250U/ml），37°水浴消化3-4小时（消化过程中每15分钟轻弹混匀）。

膀胱癌
加入适量HBSS/细胞培养基配置的消化液（每含有30ul 50mg/ml的胶原酶I 和15ul 50mg/ml的胶原酶IV），37°消化2~3小时（消化过程中每15分钟轻弹混匀）
注：不同组织类型采用的消化酶和消化时间也不同，可查阅相关文献并摸索出最适的消化条件。

3. 消化完成后将细胞悬液用70um细胞筛网过滤，用1ml RPMI+20% FBS冲洗，收集滤过液；
4. 500g离心5min，小心去除上清液，保留管底沉淀；
5. 用1mlHBSS重悬细胞(如碎片较多可用PBS/HBSS/无血清培养基重复离心清洗，清洗时用300g离心)
附：建议尽量的去除脂肪组织，仅保留实体部分；减少HBSS的洗涤次数。