6.还原糖的实验中，加入斐林试剂时必须要 A．先加入斐林试剂甲液，后加入乙液 B．先加入斐林试剂乙液，后加入甲液 CC ．将斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后再加 D．以上A、B、C三种操作方法都正确
7.鉴定蛋白质样品时加双缩脲试剂正确做 法是 A A．先加A液，混合后再加B液摇匀观察 B．先加B液，混合后再加A液摇匀观察 C．A、B液混合后加入，摇匀后观察 D．A、B液同时加入样液，摇匀后观察
实验
生物组织中糖类脂 肪和蛋白质鉴定
思考题：
1、糖类、脂肪、蛋白质鉴定的实验原理 2、常见的还原糖有哪些？取材的要求 3、斐林试剂的组成，使用时的注意事项 4、双缩脲试剂的组成，使用时注意事项 5、斐林试剂和双缩脲试剂的比较 6、脂肪鉴定中酒精的用法和作用 7、脂肪鉴定中能否直接观察颜色？借助 什么来观察？ 8、如何鉴定淀粉，颜色反应如何
先加双缩脲试剂A液1mL， 摇匀，再加双缩脲试剂B 液4滴
甲液和乙液等量混 合均匀后再加入 50-65℃水浴加热 砖红色沉淀
反应条件
不需加热，摇匀即可 紫色络合物
反应现象
蛋白质的鉴定原理：
蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫 色反应。
蛋白质分子中含有很多肽键， 在碱性溶液（即A液可造成碱性 环境）中能与双缩脲试剂中的 2+ Cu 作用，产生紫色络合物。
1.实验原理：
化学试剂+有机化合物→特定的颜色 (1) 还原糖 + 斐林试剂 水浴加热砖红色 沉淀 (2) 脂肪+苏丹Ⅲ→橘黄色 脂肪+苏丹Ⅳ→红色 (3) 蛋白质 + 双缩脲试剂 → 紫色
2、常见的还原糖有哪些？取材的要求
还原糖：可被氧化充当还原剂的糖。 (常见的有：葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖、 半乳糖) 注意：蔗糖不是还原糖
注：①样液浓度不宜过高，以免实验后黏住试 管壁，洗不干净。 ② B 液不能过量，多余的 B 液会与 A 液反应 成蓝色，而掩盖生成的紫色。
5.比较斐林试剂和双缩脲试剂
斐林试剂 甲液 乙液 双缩脲试剂 A液 B液 0.01g/m LCuSO4
成分
鉴定物 质 添加顺 序方法
0.1g/mL 0.05g/m 同甲液 NaOH LCuSO4
4、双缩脲试剂组成，使 用时注意事项
（1）蛋白质 + 双缩脲试剂 → 紫色
双缩脲试剂组成： A液：0.1g/mL的NaOH溶液 B液：0.01g/mL的CuSO4溶液
使用注意事项： 先加A液1mL于样液中， 再加B液4滴于样液中
2步骤：
（1）试管中加样液2mL （ 2 ）加双缩脲试剂 A 液 1mL （造成碱性环 境）， 摇匀 （3）加双缩脲试剂B液4滴，摇匀 （4）观察颜色变化（紫色）
8、如何鉴定淀 粉，颜色反应 如何
4、淀粉 + 碘→蓝色
用试管取2mL待测组织样液，向试管 内滴加1～2滴碘液，观察颜色变化。
加1~2滴碘液
1.鉴定生物组织中可溶性还原糖的试剂 A ．斐林试剂 B．双缩脲试剂 A C．苏丹Ⅲ染液 D．苏丹Ⅳ染液 2.能与斐林试剂反应产生砖红色沉淀的是 A．淀粉 B ．果糖 C．蔗糖 D．纤维素 B 3.下列哪个实验用到显微镜（ C ） A可溶性还原糖的鉴定 B．蛋白质的鉴定 C．脂肪的鉴定 D．淀粉的鉴定
还原性糖 等量混合后 再加入
蛋白质
先加A液1mL，摇匀， 再加B液4滴
反应条 50-65℃水浴加热 件 砖红色沉淀 反应现
不需加热，摇匀 紫色络合物
6、脂肪鉴定中酒精的用 法和作用 7、脂肪鉴定中能否直接 观察颜色？借助什么来 观察？
3.脂肪+苏丹Ⅲ→橘黄色 脂肪+苏丹Ⅳ→红色
（2）步骤 材料的选取：含脂肪量高的组织，如花生的子叶。 ①取材： 取一粒浸泡过的花生种子，去掉种皮 ②切片 ③制片：（切片越薄越好）将最薄的花生切片放 在载玻片中央 ④染色：滴2～3滴苏丹Ⅲ染液，染色3min，用吸 水纸吸去染液，再滴体积分数50%的酒精洗去浮 色，再用吸水纸吸去多余的酒精（苏丹Ⅲ易溶于 酒精中，避免影响实验结果），滴1～2滴清水于 材料切片上→盖上盖玻片 ⑤镜检观察：光学显微镜对光→低倍镜寻找着色 圆形小颗粒→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒
3、斐林试剂的组成，使用时注意事项
斐林试剂：甲液：0.1g/mL的NaOH溶液 乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液
• 使用注意事项：等量混合，现配现用 （ NaOH+CuSO ）
1.点拨： 水浴 还原糖 + 斐林试剂 加热 砖红色沉淀
可溶性还原糖与斐林试剂发生作用，可生 成砖红色的Cu2O沉淀。 （放在盛有50-65℃温水的大烧杯）
颜色变化：浅样液2ml于试管中
(2) 加入新配制的斐林试剂 1ml （甲液 和乙液等量混合均匀后再加入）盛有
样液制备:（取材5g，加入石英砂和 5ml水）
50-65℃温水的大烧杯）
(3)水浴加热2min左右(（4）观察颜色 变化（浅蓝色→棕色→砖红色）
注意事项：（1）材料的选取：还原糖含 量高，白色或近于白色，如苹果》梨》 白萝卜。 思考：西瓜、甘蔗、甜菜可以吗？为 什么？ （2）试剂：斐林试剂(等量混合、现配现 用) 甲液：0.1g/mL的NaOH溶液 乙液：0.05g/ml的CuSO4溶液
4.用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时，溶 液颜色的变化过程为（ D ） A．无色一砖红色（沉淀） B．浅蓝色一砖红色（沉淀） C．浅蓝色一蓝色一砖红色（沉淀） D．浅蓝色一棕色一砖红色（沉淀）
5.下列物质中，能被苏丹IV染液染成 红色的是（ ） B A马铃薯块茎 B．浸软的蓖麻种子 C．蛋清液 D．苹果
还原糖的鉴定原理：
• 即：还原糖中的醛基（–CHO） 被 • Cu(OH)2氧化， Cu(OH)2被还原 成砖红色的Cu2O沉淀
还原糖+斐林试剂——砖红色沉淀
5.比较斐林试剂和双缩脲试剂
斐林试剂 甲液 乙液 A液 双缩脲试剂 B液
成分
鉴定物质 添加顺序方 法
0.1g/mL的 NaOH溶液
0.05g/mL 0.1g/mL 0.01g/m 的CuSO4 的NaOH LCuSO4 溶液 溶液 溶液 还原性糖 蛋白质