实验食品中铁的测定——二氮杂菲分光光度法
【原理】
样品经过无机化处理后，在pH3～9条件下，亚铁离子与二氮杂菲生成稳定的橙红色配合物。

溶液颜色的深浅与亚铁离子的含量呈正相关。

通过比色，可对食品中的铁进行定量分析。

【仪器与试剂】
1.锥形瓶（150ml）、具塞比色管（50ml）、分光光度计、天平、电炉，瓷坩埚，50ml塑料容量瓶。

2.盐酸（20%）：取20ml盐酸，用水稀释至100ml。

3.硝酸溶液（50%）：取50ml硝酸，用水稀释至100ml。

4.盐酸溶液（1+1）
5.乙酸铵缓冲溶液（pH=4.2）：称取250g乙酸铵，溶于150ml纯水中，再加入700ml冰乙酸，混匀备用。

6.盐酸羟胺溶液（100g/L）：称取10g盐酸羟胺，溶于纯水中，并稀释至100ml。

7. 二氮杂菲溶液（1.0 g/L）：称取0.1g二氮杂菲，溶解于加有2滴盐酸的纯水中，并稀释至100ml。

此溶液1ml可与100ug的亚铁形成红色螯合物。

8.铁标准储备液[ρ（Fe=0.10mg/ml）]：称取0.7022g硫酸亚铁铵溶于少量纯水，加3ml盐酸于容量瓶中，用纯水定容至1000ml。

9.铁标准使用液[ρ（Fe=10ug/ml）]：吸取10.00ml铁标准储备液，移入容量瓶中，用纯水定容至100ml。

10.实验用水为三级水。

【操作步骤】
1.样品预处理：准确称取混匀的奶粉样品约5g（精确到0.0001g）于瓷坩埚中，在电炉上微火炭化至无烟，再移入马弗炉中，（490±5）℃灰化5小时。

若有黑色炭粒出现，待冷却后，滴加少许50%硝酸溶液湿润，在电炉上小火蒸干后，再移入马弗炉中，继续灰化成白色灰烬。

冷却至室温后取出，加入20%盐酸5ml，在电炉上加热使灰烬充分溶解。

冷却至室温后，转入50ml容量瓶中，用纯水定容至刻度。

同时处理空白试样。

2.标准曲线的绘制及样品测定：另取7个150ml锥形瓶，作标准系列、空白及样品，按下表加入试剂和操作，表中体积单位为ml。

于510nm波长处，用2cm比色皿，以蒸馏水为参比测量吸光度。

用excel绘制标准曲线，写出线性回归方程及R2值，从曲线上查出样品管中铁的含量。

【数据处理】
线性回归方程：
R2=
计算样品中铁的质量浓度（结果保留三位有效数字，单位用mg/kg表示，）。