(2)RNA污染可致DNA样品的比值高于1.8。
(3)比值为1.8的DNA溶液不一定是纯DNA溶液，可能兼有蛋白质、酚、RNA的污染。
(4)2.0是高质量的RNA的标志，但由于RNA二级结构的不同，其读数可能会在1.8〜2.1之间波动。
（5）RNA溶液的pH值会影响A260/A280的读数，在水溶液中A260/A280的比值比在Tris缓冲液（pH7.5）的读数低0.2〜0.3。因此，精确测定RNA的浓度应使用水溶液，精确 测定RNA的纯度应使用TrislOmmol/L （pH7.5）溶液。】
15•原核生物RNA聚合酶的特性有？
原核生物细胞屮只有1种RNA聚合酶，可参与合成mRNA、IRNA和rRNAo
RNA聚合酶催化聚合反应吋需要Mg”或Mn2\该酶无校正功能。
16.PCR反应的特异性取决于？
引物
17.DNA的变性是指？
在某些理化因索作用下，DNA双链解开成两条单链的过程。
变性后其它理化性质变化：
临床分子生物学检验
1.DVA的一级结构是由哪种化学键连接？
两条单链间：碱基氢键；相邻碱基间：范德华力；脱氧核背酸间：3,・亍磷酸二酯键
2•可以岀现在人体循环系统中的游离核昔酸是？
脱氧核昔酸，核糖核酸
3•原核生物DNA的复制方式是？0型半保留复制
4•核小体结构中的组蛋白是哪些蛋白？各自的作用有？
H2A、H2B、H3、H4：核心颗粒，形成核小体。H1：连接线上，锁定核小体、参与包装5.PCR体系中抑制Taq酶活性的物质有哪些？过量加入什么会减少Mg2+浓度导致Taq酶
11・实时荧光定量PCR技术中非特异性荧光染色技术？
SYBR GreenI
12•人类基因组DNA多态性的形式？
限制性片段长度多态性(RFLP)；短序列重复序列(STR);单核昔酸多态性(SNP)
13•常用于菌种鉴定的分子标志物是？
16sRNA14•真核生物染色体的DNA三级结构不是闭环双链超螺旋结构的是？
9. B—地中海贫血患者的基因缺陷主要是？
基因突变中的点突变
10・Taq酶的特性有？
有很高的耐热稳定性
酶量增加使反应特异性下降，酶量过少影响反应产量；
Taq DNA聚合酶无3’一5’外切酶活性，因而无校正功能，在复制新链的过程中会发生碱基 错配；
Taq DNA聚合酶在每次循环中产生的移码突变率为1/30000,碱基替换率为1/8000,因此扩 增的片段越长，错配的机率越高。
50ug/ml的双链DNAo（40ug/ml的单链DNA或单链RNA,33ug/ml的单链寡聚核昔酸） （紫外分光光度法，核酸浓度的鉴定）
计算公式:双链DNA= 50 XA260样本X稀释倍数
4- 1000 (ug/ul)
单链DNA/RNA= 40 XA260样本 X
稀释倍数十1000(ug/ul)
24•限制性内切酶的（通常指II类）特点是？（II类限制性核酸内切酶识别序列特点）
回文结构
GGTACC
CCTAGG
切口：
平端切口一平末端
粘端切口 -粘性末端
【同功异源酶：
來源不同的限制酶，能识别和切割同一位点。
同尾酶：
有些限制性内切酶虽然识别序列不完全相同，但切割DNA后产生相同的粘性末端】 例如：
(5)引物酶和引发体：启动RNA引物链的合成。
(6)DNA连接酶
19•第一个分离到的抑癌基因是？
视网膜母细胞瘤基因(Rb基因)
20.1978年简悦威采用Southen分子杂交技术检测出了什么疾病？
镰状细胞贫血症
21•核酸的分离和纯化中，沉淀DNA的常用试剂是?
常用的有机溶剂有：
乙醇、异丙醇、聚乙二醇 常用的盐类有：
淀粉液化芽胞杆菌
（Bacillus amyloliguefaciens） H株
第1种限制性内切酶，命名为Bam HI
25以mRNA为模板合成cDNA的酶是（RT—PCR内容）？
逆转录酶
26.Sanger法DNA测序时ddNTP（双脱氧核昔酸，少一个轻基）的作用是？
ddNTPs是反应终止剂，可以当作正常碱基参与复制，一旦链入DNA中，其后就不能再继 续连接。
23•对于等位基因突变位点已被阐明的一些遗传病，可以采用基因诊断的方法是？
直接诊断：
Southern印迹技术
多重PCR技术
PCR•限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）
等位基因特异性寡核昔酸（ASO）
DNA芯片技术（DNAchip）
单链构彖多态性（SSCP）
变性梯度凝胶电泳（DGGE）
DNA序列分析（DNAsequencing）
活性降低?
游离的Mg?+浓度；dNTP、引物和模板DNA等中的磷酸基团，螯合剂如EDTA均可与镁离 子结合减少浓度。
6.PCR扩增时，链的延伸从什么地方开始？对于引物是哪一端？模板链呢？
从引物的3,端开始,方向5倒3'；模板DNA序列的3,端;3,端
7•在波长260nm的紫外线下，A值=1时双链DNA的浓度大约相当于?
单链寡聚核昔酸DNA= 33 XA260样本
X稀释倍数 /1000(ug/ul)
&关于基因的定义正确的是？
能编码有功能的蛋白质多肽链或合成RNA所必需的全部核酸序列，是核酸分子的功能单位。 是遗传的结构和功能单位。
一个基因大都包插编码蛋白质多肽链或RNA的编码序列，保证转录和加工所必须的调控序 列（启动子，增强子），5,端、3,端非编码序列。
27Southern印迹法的步骤有？
1待测核酸样品的制备②琼脂糖凝胶电泳分离待测DNA样品③电泳凝胶预处理④转膜⑤ 探针标记⑥预杂交⑦Southern杂交⑧洗膜⑨放射性自显影检测
增色效应粘度下降
比旋度下降浮力密度升制的酶有哪些？
(1)DNA聚合酶
(2)拓扑异构酶：：兼具内切酶和连接酶活力，能迅速将DNA超螺旋或双螺旋紧张状态变 成松驰状态，便于解链。
(3)DNA解链酶
(4)单链结合蛋白(SSB)：结合在解开的DNA单链上，防止重新形成双螺旋。
酷酸钠、醋酸钾、醋酸钱、氯化钠、氯化钾、氯化镁等。
22•通过紫外分光光度法可对核酸纯度进行鉴定，怎么鉴定？反过来是否成立？否 通过A260与A280的比值來判断有无蛋白质的污染。
在TE缓冲液中：
纯DNA的A260/A280比值为1.8；
纯RNA的A260/A280比值为2.0
【注意事项:
(1)蛋白质及酚的污染均可使比值下降，可通过蛋白质在280nm的高吸收峰与酚在270nm的髙吸收峰来鉴别。