配合的成分，是输血前确保受血者输血安全必不 可少的试验 包括：主侧配血和次侧配血 主侧是受血者血清与供血者红细胞相配的一侧 次侧是受血者红细胞与供血者血清相配的一侧。
交叉配血的主次侧
（一）盐水介质交叉配血试验
• 本质凝集反应，直接凝集试验
• 检测IgM类抗体
• 方法：试管法
• ABO同型配血，主侧和次侧均无凝集及溶血，表示
抗球蛋白配血方法
患
者
37 ℃
主 侧
献 血 者

次 侧
37℃ 水浴30分钟
三洗
抗球蛋白方法配血方法
加 抗 球 蛋 白
阳 性
离心 看结果
阴 性
结果判读
• 直接抗球蛋白试验 • 阳性对照管凝集，阴性对照管不凝集，被检管 凝集，判定为阳性 • 阳性对照管凝集，阴性对照管不凝集，被检管 不凝集，需要做阴性确认后判定结果（无凝集 的被检管中加入IgG抗-D致敏红细胞后离心， 出现凝集判阴性，否则重新试验 • 阳性对照管不凝集和（或）阴性对照管凝集， 结果不可信不发报告，分析原因重做
结果判读
• 间接抗球蛋白试验
• 阳性对照管呈现凝集反应，阴性对照管未呈现
凝集反应，被检管呈现凝集反应为阳性结果，
被检者血清内含有抗体，如果自身对照无凝集 ，同种抗体；如果被检者结果阴性，被检者血 清中未被查出意外抗体。 • 阳性对照管不凝集和（或）阴性对照管出现凝
• （二）盐水介质玻片法
• （三）微柱凝胶血型定型检测卡法
• （四）质量保证：试管法、玻片法、卡式 • （五）方法学评价 • （六）临床应用 • （七）不一致原因及解决方法
ABO血型鉴定原理
正向定型：已知的特异性抗体（标准血清）检查红细胞的未知抗原
A抗原 B抗原 A和B抗原
无A和B抗原
反向定型：已知的血型的标准红细胞检查血清中的未知抗体
先加红细胞悬液，再加血浆或抗体试剂 红细胞悬液和血浆各加50ul 按照说明书操作
（五）方法学评价
试管法：常用，广泛，较玻片法灵敏，结果准确，反应时间短， 结果不能保存，人为因素大 玻片法：操作简单、无需特殊仪器，适用于血型普查；灵敏度差
，反应时间长，不能用于反定型，结果不能保存，人为因素影响大
重新采集献血者与受血者血液标本
查询受血者既往病史及输血史和用药史等
多次洗涤标本红细胞
应用抗-AB、抗-A1、抗-H检测红细胞
ABO正反定型不一致的原因
技术和 操作 受血者 红细胞 或血清
错加试剂或标本
试剂失效或污染
细胞与血清间 比例不适当
溶血现象未能识 别 漏加试剂 结果记录或判断错 误
血清异常 红细胞致敏 近期输血 疾病导致抗原 减弱 抗体减弱 不规则抗体 年龄 近期进行大量 血浆置换治疗
主要内容
ABO血型鉴定 RhD血型鉴定 交叉配血试验 红细胞抗体筛查及鉴定 血型鉴定和交叉配血自动分析 吸收放散试验
教学目标
• 掌握ABO和Rh血型鉴定、交叉配血试验原理、方
法和质量控制 • 熟悉红细胞不规则抗体筛查及鉴定方法 • 了解吸收放散试验
一、ABO血型鉴定
• （一）盐水介质试管法
RhD定型及其常见问题
1.Rh定型 RhD定型，试管法最经典，多使用微柱凝胶卡 2.RhD阴性确认 IgM抗-D阴性
三个厂家IgG抗-D进行 确认
抗人球蛋白法进行确认
三种IgG抗-D试剂均为阴性，报RhD阴性
一种或一种以上IgG抗-D试剂为阳性，报弱D
三、交叉配血试验
概念：检测受血者和供血者血液中是否含有不相
体
• 间接试验：是检查血清中游离的不完全抗体
抗人免疫球蛋白 自身抗体
直接Coombs试验
同种异型抗体
抗人免疫球蛋白
间接Coombs试验
抗人球蛋白交叉配血法示意图
1红细胞彼此之间有一定的间距
2不完全抗体可以结合在红细胞 表面,但是不能和两个红细胞 同时结合（致敏）。 3加入抗人球蛋白
4抗人球蛋白可以同时和两 个不完全抗体的FC段结合， 从而把红细胞连接在一起
，易发生血液污染 微柱凝胶血型定型检测卡法：特异性强、灵敏度高，结果准确， 保持时间长，标本和试剂用量少，操作可以标准化、自动化，减少 了医源性污染，但需要专门离心设备和试剂卡，成本较高
ABO正反定型的临床意义
输血治疗的首要步骤
组织器官移植
新生儿溶血病
ABO正反定型不符分析基本程序
首先重复试验
结果判定
新乡医学院第三临床检验教研室
微孔板法
（四）质量保证
试管法 标记 加样量、加样顺序 溶血是一种阳性反应 玻片法 标记 正定型 显微镜阴性确认

（四）质量保证

微柱凝胶血型定型检测卡

血清标本应完全取出纤维蛋白，血浆标本建议
EDTA-K2或枸橼酸盐康宁

C、粘液：亲和柱中有一层粘液，作用与“试剂 或盐水层”相同。
原理：凝胶分子筛和亲和效应
微柱凝胶柱中填充凝胶（葡聚糖），及相应试 剂（抗体或抗原）。凝胶分子间的间隙只允许游 离红细胞通过，分子排阻层析原则将发生凝集反 应的红细胞阻滞于凝胶之内，而未凝集的游离红 细胞则穿过微孔运动到管底，从而判定有无凝集 反应。
5
试管法
红细胞凝集强度判断标准
试管法结果判定
瓷板法
结果判定
凝胶技术的原理
反 应 室 反 应 室 底 孔 外管壁 亲和凝 胶
内 套 管壁
特殊粘液
试剂或 盐水 凝胶或 玻璃珠
凝胶技术的原理：
A、反应室：下端底孔很小，液体在孵育过程中 不会流入下方微柱中。 B、试剂或盐水层：红细胞在离心力作用下穿越 该层，红细胞与反应室中的血清分离并与该层 液体中的试剂反应。
抗A抗体 抗8/11/24
4
ABO血型鉴定结果判断
正向定型 （标准血清+被检者红细胞） 抗A + + 抗B + + -
反向定型 （标准红细胞+被检者血清） A型红细胞 B型红细胞 O型红细胞 + + + + -
结果判断 A B AB O
2018/11/24
无输血禁忌，可以输血
盐水介质配血方法
患 者
主 侧 献 血 者 侧
阳 性
离心 次 看结果
阴 性
（二） 抗球蛋白介质交叉配血试验
抗人球蛋白试验：又称Coombs试验，是一种检
查不完全抗体的敏感方法
分类：直接抗球蛋白试验和间接抗球蛋白试验
抗球蛋白试验原理
• Coombs利用抗球蛋白抗体作为第二抗体，连接 与红细胞表面抗原结合的特异抗体，使红细胞 凝集。 • 直接试验：是检查被检红细胞上有无不完全抗