实验土壤碱解氮的测定
(碱解扩散法)
一、目的和要求
掌握扩散法测定土壤碱解氮的方法。
二、内容与原理
土壤水解性氮或称碱解氮包括无机态氮(铵态氮、硝态氮)及易水解的有机态氮(氨基酸、酰铵和易水解蛋白质)。
用碱液处理土壤时,易水解的有机氮及铵态氮转化为氨,硝态氮则先经硫酸亚铁转化为铵。
以硼酸吸收氨,再用标准酸滴定,计算水解性氮含量。
三、主要仪器及试剂配制
主要仪器:电子天平、扩散皿、毛玻璃、恒温箱、半微量滴定管(5毫升)、皮筋
试剂:
(1)1.8molL-1Na0H:称取72克NaOH溶于水中,冷却后用蒸馏水稀释至1升。
(2)2%硼酸溶液:称取硼酸20克,用热蒸馏水(约60℃)溶解,冷却后稀释至1000ml,用稀盐酸或稀氢氧化钠调节PH至4.5(定氮混合指示剂显淡红色)。
(3)定氮混合指示剂: 0.5克溴甲酚绿和0.1克甲基红放入玛瑙研钵中,加入100毫升95%的乙醇研磨溶解。
然后用稀盐酸或稀氢氧化钠调节PH至4.5。
最后加水稀释至1000毫升,混合均匀贮于瓶中。
(4)特制胶水:将适量氢氧化钠溶于丙三醇中,搅拌均匀。
即可。
(5)硫酸亚铁(粉状):FeSO4.7H2O(三级)磨细,装入玻璃瓶中,存于阴凉处。
(6)0.01 molL-1盐酸标准溶液:将1 molL-1的溶液稀释100倍。
四、操作方法与实验步骤
1、称取通过1毫米筛的风干土样2克(精确到0.001克)和硫酸亚铁粉剂1克(一般适量即可)均匀铺在扩散皿外室,水平地轻轻旋转扩散皿,使土样铺平。
2、在扩散皿的内室中,加入2毫升2%硼酸溶液,并加入1滴定氮指示剂,然后在皿的外室边缘涂上特制胶水,盖上毛玻璃,并旋转之,使毛玻璃与扩散皿边缘完全粘合,再慢慢转开毛玻璃的一边,使扩散皿露出一条狭缝,迅速加入10毫升1.8molL-1NaOH液于扩散皿的外室中,立即将毛玻璃旋转盖严。
3、在实验台上水平地轻轻旋转扩散皿,使溶液与土壤充分混匀,并用橡皮筋固定;随
后小心放入40℃的恒温箱中。
24小时后取出,用微量滴定管以0.01molL-1的盐酸标准液滴定扩散皿内室硼酸液吸收的氨量,由蓝色滴定到淡红色。
记下盐酸用量。
另取一扩散皿,做空白试验,不加土壤,其他步骤与有土壤的相同。
五、作业
根据下列公式计算土壤中碱解氮的含量
C×(V-V0) ×14
土壤中水解氮(mgkg-1)=——-----------------———×1000
W(样品重)
C——盐酸标准液的浓度
V——样品测定时用去H2S04标准液的体积
V0——空白测定时用去H2S04标准液的体积
14——氮的摩尔质量
1000——换算系数
W——土壤重量(克)
六、注意事项
在测定过程中碱的种类和浓度、土液比例、水解的温度和时间等因素对测得值的高低,都有一定的影响。
为了要得到可靠的、能相互比较的结果,必须严格按照所规定的条件进行测定。
七、参考指标
土壤水解性氮(mgkg-1)等级
<25 极低
25——50 低
50——100 中等
100——150 高。