电化学发光原理及优势
超过85项检测项目
80 60
40
20
0 cobas e analyzers Access II ARCHITECT Centaur IMMULITE VISTA LOCI VITROS ECiQ
由于 ECL 技术能适合多种免疫反应原理,其特有 的优势使得罗氏能够开发出大量的检测试剂。
试剂稳定
开瓶有效期长
标本检测时间(分钟)
为什么选择电化学发光技 术
ECL优势
快速的检测时间 可控的反应体系
宽广的检测范围
高精密度和 高灵敏度
低标本检测用量
参考网站
可控的反应体系
信号产生迅速
75 60 ECL信号强度 (‘000 counts) 45 30 15 0 电压 ECL 2.0 1.6 1.2 .8 .4 0 电压(V)
0
0.5
1.0 时间(秒)
1.5
电压作为反应的启动开关能有效的消除由于试剂添加或混匀所带 来的问题从而保证反应稳定而可控的进行
可控的反应
信号产生均一而稳定
化学发光技术 反应启动不均一
电化学发光技术 电压启动反应 信号均一稳定
为什么选择电化学发光技 术
ECL优势之二
快速的检测时间 可控的反应体系
宽广的检测范围
高精密度和 高灵敏度
低标本检测用量
高精密度和高灵敏度
生物素-链霉亲和素特异性亲和作用
生物素作为第二标记物与包被链 霉亲和素的微磁珠结合 生物素与链霉亲和素特异间的特 异性亲和作用是目前已知的最牢固 的非共价生物结合作用 最大限度的捕获待测免疫复合物 大大提高ECL反应的灵敏度
标本检测用量 (ul)
ECL技术因其灵敏度很高,所以标本检测用量很低。
低标本检测用量
患者的痛苦更小
600μl
400μl
NT-proBNP / BNP Troponin T/I Myoglobin CK-MB
0 200μl
ARCHITECT
Vista LOCI cobas e systems
为什么选择电化学发光技 术
为什么选择电化学发光技术
ECL优势之三
快速的检测时间 可控的反应体系
宽广的检测范围
高精密度和 高灵敏度
低标本检测用量
低标本检测用量
与市场上主要产品的比较
cobas e analyzers Architect Access II Centaur Vista LOCI Immulite VITROS ECiQ 0 50 100 150 200 Max. Ave. Min.
ECL优势之四
快速的检测时间 可控的反应体系
宽广的检测范围
高精密度和 高灵敏度
低标本检测用量
宽广的检测范围
更少的复检
8 6 Log (ECL 4 intensity (counts)) 2 0 -14
稀释复检
-12
-10
-8
-6
-4
log ((Ru(bpy)32+)/M)
宽广的检测范围
与市场上主要产品的比较
低标本检测用量
为什么选择电化学发光技术
ECL优势之一
快速的检测时间
可控的反应体系
宽广的检测范围
高精密度和 高灵敏度
低标本检测用量
ECL技术采用磁场分离待测组分,使用电
压而不是化学品来控制化学发光反应。
可控的反应体系
采用磁场分离待测物
施加磁场,吸附磁 性微珠 加入ProCell溶液分 离绑定磁珠的免疫 复合物
最重要的组成部分
测量池 抗原/抗体 生物素 亲和素包被的磁性微粒子 ProCell M solution (TPA – 三丙胺) CleanCell M solution (KOH- 清洗液) 电压 铂金电极 磁铁 光电倍增管
信号的检测
光电倍增管检测信号
丰富的免疫检测项目
去除影响信号检测 的因素显著提高检 测结果灵敏度
将没有磁珠绑定的组分分离出反应系统后光电倍 增管才能准确检测发射光信号,否则,游离的 其他组分会影响信号的检测。因此,这一过程 对反应的控制和信号的检测是很必要的。
可控的反应体系
施加电压启动电化学发光 反应
电压的应用是ECL反应可控性 的关键:
三联吡啶钌和三丙胺正常状 态下非常稳定,只有电压存在 的情况下才会被激活 ECL技术的特点:施加电压启 动电化学发光反应
标本检测时间(分钟)
快速的检测时间
最迅速的急诊项目检测时间
cobas e analyzers Access II ARCHITECT Centaur Immulite Vista LOCI VITROS ECiQ 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 PTH NT-proBNP / BNP Myoglobin CK-MB Troponin hCG
cobas e analyzers
Access II ARCHITECT Centaur
Vista LOCI IMMULITE
VITROS ECiQ 0 10 20 30 开瓶有效期(天) 40 50 60
为什么选择电化学发光技 术
ECL优势
快速的检测时间 可控的反应体系
宽广的检测范围
高精密度和 高灵敏度
cobas e systems ARCHITECT Access II Centaur Vista LOCI Progesterone IMMULITE VITROS ECiQ 0% 25% 50% 75% 100% PTH anti-TPO CA 125 Estradiol HCG+b
以cobas e system试剂检测范围为基准的百分比
75 ECL
60
45 ECL 信号强度 (‘000 counts) 30
‘Flash’ CL 15
0
0
0.5
1.0 时间 (秒)
1.5
高精密度和高灵敏度
信号迅速生成且保持稳定
75 ECL ‘Glow’ CL
60
ECL信号强度 (‘000 counts) 45 30 15
0
0
15
30 时间(分钟)
45
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电化学发光底物三联吡啶钌N羟基琥珀酰胺(NHS)酯
抗原抗体结合
免疫复合物的形成
抗体
第一抗体标记生物 素(与微磁珠结合)
抗原
第二抗体标记 Ruthenium(产生光 信号)
生物素
Ruthenium
两种抗体皆能与靶 抗原特异性结合
免疫复合物
抗体
Байду номын сангаасSource: Roche Diagnostics Research and Development
电化学发光技术
ElectroChemiLuminescence (ECL)
结合 标记抗体
结合磁 性微珠
转移至 电极
施加电压 启动反应
信号检测
ECL 是罗氏在免疫检测方面的专利技术。 ECL 技术配以精心设计的免疫试剂,使得
罗氏能够给出精确而敏感的检测结果。 ECL 反应的过程:
– 标记Ruthenium的高特异性抗体与被测物结合后 与顺磁性微珠结合 – 利用磁场吸附磁性微珠;用ProCell溶液将结合了 磁性微珠的抗原抗体复合物与未结合的组分分 离。 – 施加电压启动反应 – 用光电倍增管检测发射光信号 – 发射光信号与被测物浓度成线性关系
电化学发光 原理及优势
Ajry Zhou
电化学发光原理
电化学发光免疫测定----ECLIA
Electro chemi luminescence immuno assay 是电化学发光(ECL)和免疫测定相结合的产物。 它的 标记物的发光原理与一般的化学发光(CL)不同,是一种在 电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应,实际上包括 了电化学和化学发光二个过程。 ECL与 CL 的差异在于 ECL是 电启动发光反应,而 CL 是通过化合物混合启动发光反应。 ECL 不仅可以应用于所有的免疫测定,而且还可用于DNA/ RNA探针检测。 是继放射免疫(RIA)、酶免疫(EIA)、荧光免疫(FIA)、化 学发光免疫(CLIA)测定以后的新一代标记免疫测定技术。
为什么选择电化学发光技 术
ECL优势之五
快速的检测时间 可控的反应体系
宽广的检测范围
高精密度和 高灵敏度
低标本检测用量
快速的检测时间
与市场上主要产品的比较
cobas e analyzers Access II ARCHITECT Centaur Immulite Vista LOCI VITROS ECiQ 0 10 20 30 40 50 60 70 Max Average STAT
高精密度和高灵敏度
信号循环放大并保持稳定
循环放大的过程是指 信号能不断生成且保 持稳定
光电倍增管准确检测 信号
•ECL反应中[Ru(bpy)3]3+ 与[Ru(bpy)3]2+之间的转化 循环发生,因此产生的信号不断增强并保持稳定,这 一过程我们称之为信号的循环放大。
高精密度和高灵敏度
信号迅速生成且保持稳定
讲稿中所引用的数据等信息均来自于以上网站(2009.7)
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