pH7.2 磷 酸 盐 缓 冲 液, 大豆酪蛋白消 化培养基, 乳糖液 体培养基
非水溶性 的制剂 （膏剂、 油剂）
其他
司盘80、单硬 脂酸甘油酯、 吐温-80 十四烷酸异丙 酯
不溶于水的膜 剂 肠溶胶囊制备
5 克 吐 温 -20 或 吐 温-80 十四烷酸异丙酯
供试液最终pH调 至7.0
吐温-20 其他助溶剂
乳糖液体培养基 35~37℃24~48h Mac 、 EMB 琼 脂 平板 35~37℃24~48h
+
2021/3/9
授课：XXX
8
7.大肠菌群
CP
BP
USP
检验量（g或 ml） 稀释剂
预增菌
1
pH7.0无菌氯化钠-蛋 白胨缓冲液
1 乳糖肉汤 35~37℃2~5h
增菌 分离 生化试验
0.1g,0.01g0.001g BL 培养基 35~37℃18~24h
气雾剂制备法 样品加稀释剂至培 养基时间不超过 1hr
2021/3/9
授课：XXX
4
4.制剂抑菌作用的确定（阳性对照试验）
CP
BP
控制菌阳 性菌加量 需气菌及 真菌计数
抑菌作用 处理方法 中和法
10~102个
50~100 回收率大小于 70%判断是否
有抑菌作用
+
102个
25~200个金葡、白念、枯 草、大肠菌在有无制剂存 在下生长的稀释级差别大 小判断是否有抑菌作用
+
凝固酶、

授课：XXDXNA酶
大豆酪蛋白消化培养 基
大豆酪蛋白消化培养 基 35~37℃24~48h
VJ(甘露醇氯化锂)琼 脂、MS(甘露醇氯化 钠 ) 琼 脂 、 BP 琼 脂 平 板 35~37℃24+~48h
11
10.沙门菌
CP
BP
USP
检验量
1 （g或ml）
稀释剂 增菌
09%氯化钠溶液、 pH7.0氯化钠蛋白
EMB或Mac.C琼脂平板
35~37℃ 18~24h
+
0.1g,0.01g,0.001g 乳 糖肉汤培养基 35~37℃24~48h VRB.琼脂平板 35~37℃ 18~24h
-
2021/3/9
授课：XXX
9
8. 铜绿假单胞菌
CP
BP
USP
检验量 稀释剂 增菌 分离
1 （g或ml）
09%氯化钠溶液 pH7.2 磷 酸 盐 缓 冲液
胨缓冲液
营养肉汤培养基 35~37℃18~24h
二 次 增 TTB培养基
菌
35~37℃18~24h
分离
生化试 验 2021/3/9
EMB 、 Mac.C 、 DHL 、 SS 琼 脂 平 板
35~37℃1+8~24h
10 （g或ml）
pH7.0氯化钠蛋白 胨缓冲液
大豆酪胨肉汤 35~37℃18~24h
预增菌
增菌
分离
生化试验
1
09%氯化钠溶 液
BL增菌培养基 35~37℃18~24 h
M-I
35~37℃5、24h
MI及IMViC
1
pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液
大豆酪胨肉汤 35~37℃18~48h Mac 肉汤 43~45℃18~24h Mac.琼脂平板 35~37℃18~72h
+
10 乳糖液体培养基
大豆酪蛋白 消化琼脂
含抗生素的沙 氏葡萄糖琼脂
大豆酪蛋白 消化琼脂
沙氏葡萄糖 琼脂
授课：XXX
6
5.需气菌和真菌计数(续)
稀释级的选 择 培养温度
3个连续稀释级 30~35℃23~28℃
培养时间 （天） 需气菌
2(5~7)
1个 30~35℃20~25 ℃
5
真菌
3(5~7)
5
计数结果
需气菌 真菌
结果报告
胆盐乳糖增菌培 养基 35~37℃18~24h
溴化十六烷基三 甲铵琼脂平板 35~37℃18~24h
生化试
5种
验 2021/3/9
1 （g或ml）
pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液
大豆酪蛋白消化培养基 35~37℃18~48h
Cetrimide琼脂，培养18~72h 大 豆 酪 蛋 白 消 化 培 养 基 41~43℃ 18~48h。薄膜过滤 大豆酪蛋白消化培养基18~48h， Cetrimide琼脂平板
四硫酸盐肉汤培养基
41~43℃18~24h
DC、XLD、BG.琼 脂平板 35~37℃18~72h
中国药典与美英药典微生物限 度检查法的比较
苏德模
2021/3/9
授课：XXX
1
1.收载的检查项目
CP BP
USP
需气菌
+
+
+
真菌
+
+
+
大肠埃希菌
+
+
+
沙门菌
+
+
+
铜绿色假单胞菌
+
+
+
金黄色葡萄球菌
+
+
+
梭菌
+
+
大肠菌群
+
+
+
肠杆菌科及其他某些革兰阴性杆菌
支原体
+
肠道菌、肠杆菌
+
科
分枝杆菌
+
病毒的其他因子
09%氯化钠溶液 pH7.0氯化钠-蛋白
胨缓冲液
pH7.0氯化钠 -蛋白胨缓冲 液
营养肉汤（或含亚 大豆酪蛋白
碲酸甲）培养基
消化培养基
35~37℃18~24h
35~37℃18~4
甘 露 醇 氯 化 钠 琼 脂 8BhP琼h 脂平板 平 板 、 卵 黄 氯 化 钠 35~37℃18~7
琼脂平板
2h
35~37℃24~48h
+
稀释法
+
+
薄膜过滤
+
法
离心沉淀
+
法
2021/3/9
* 0.4%l卵磷脂，4.0%吐温
+
授课：XXX
USP 105~106个 根据控制菌阳 性菌生长的结
果判断
+* + +
5
5.需气菌和真菌计数
方法 平皿法 试管法 薄膜过滤法 培养基
2021/3/9
CP
BP
USP
+
+（浇碟、涂
+
抹）
+
+
+
+
营养琼脂 玫瑰红钠琼脂
+
2021/3/9
授课：XXX
2
活螨
+
2.检验量 CP 取10g或10ml供试品 BP、USP 10g或10ml供试品数份
2021/3/9
授课：XXX
3
3.供试液制备
CP
BP
USP
一般制剂
0.9% 的 氯 化 钠 溶 液 pH7.0 无菌氯化钠蛋白胨缓冲液
乳糖肉汤 pH7.0 氯 化 钠 - 蛋 白胨缓冲液 其他合适培养基
一般30~300
30~100
不 生 长 按 〈10 个 /1g 或ml报告
1g或ml
〈300 〈100
1g或ml
2021/3/9
授课：XXX
2个 30~35℃20~25
℃
2~3 5~7
30~300 不生长按〈10个
/1g或ml报告
1g或ml
7
6.大肠埃希菌
CP
BP
USP
方法
MI法
I法
IMViC法
检验量（g或 ml） 稀释剂
1种（42±1）
授课：XXX
10 （g或ml）
大豆酪蛋白 消化培养基
大豆酪蛋白消 化培养基 35~37℃24~48 h
Cetrimide琼 脂 35~37℃72h
3种
10
9.金黄色葡萄球菌
CP
BP
USP
检验量
1 （g或ml）
1 （g或ml）
10 （g或ml）
稀释剂 增菌 分离
凝固酶 试验2021/3/9