香蕉的组织培养与快速繁殖摘要香蕉，芭蕉科芭蕉属植物，又指其果实。
热带地区广泛栽培食用。
香蕉味香、富于营养，终年可收获，在温带地区也很受重视。
香蕉也是一种绿色开花植物，它如其他绿色开花植物一样，也会开花结籽儿。
野生香蕉中有一粒粒很硬的种子，吃起来极为不便。
因此，有人把野生香蕉树和四倍体的芭蕉杂交产生了三倍体的香蕉。
也就是现在的香蕉。
这样的香蕉中就没有种子了。
香蕉的种子退化了，人们常通过香蕉地下的根蘖幼芽来繁殖它的后代，现在随植物细胞工程的发展，植物组织培养及快速繁殖更加高效进行香蕉繁殖，同时为其优良品种的保存扩大提供有利条件。
关键词：香蕉；植物组织培养；快速繁殖；转化1•香蕉植物组织培养长期以来,香蕉生产上主要采用吸芽繁殖，用这种常规方法繁殖，不但故量有限，而且挖取吸芽还会伤及母株的地下真茎及挖断母株的根群，从而影响当年产量。
同时,挖取的种苗切口大，成活率低。
为了提供发展香蕉生产所需的大量种苗，应用植物组织培养技术，繁殖大量香蕉苗是非常必要的。
此外，通过组织培养还可加快优良品种的繁殖速度，以满足生产上品种更新的需要。
1.1香蕉组培苗的培育技术1.1.1品种的选择选用适宜当地栽培、高产、优质、抗逆性强的品种，选取剑状吸芽若干个进行脱毒。
1.1.2原种吸芽苗的选择选作吸芽的母株果梳应是果梳整齐、果大均匀、产量高、无病害症状、健壮的母株。
用作外植体的剑叶吸芽必须按株系进行编号并建立株系档案，必要时拍照全株相片。
1.1.3香蕉吸芽外植体的消毒与接种从田间取回来的吸芽用自来水冲洗干净后，用不锈钢刀将吸芽切去根和顶端，剥去外层包片并切成高2厘米X直径1.5厘米左右的圆锥体。
在超净工作台上,用75%酒精消毒2分钟，倒掉酒精，再用0.1%升汞，另加2〜3滴吐温80，消毒20〜30分钟。
消毒剂一定要浸过料，消毒过程中要经常摇动以便材料充分灭菌。
用无菌水清洗4次，使药液彻底洗净。
用解剖刀剥去外层叶鞘，留用5毫米左右的基座，并将此圆锥型外植体十字形切为4块，编号后，置入诱导培养基中培养，培养温度为27 C〜31C。
开始培养时，可只用自然弱光，待长小芽后光照采用800〜1000LXS。
1.1.4.继代苗的培养将已开始增殖的芽顶部叶片切除，切除的叶片可作为病毒检测的材料。
将基部切成含有2〜4个芽的小块，转接到继代培养基中培养。
培养温度27 C〜31C, 光照为800〜1000LXS，经检测不带生产上检定病毒的株系方可作为繁殖材料继代增殖。
20〜30天继代一次，继代培养次数不超过12代。
」1.1.5生根苗的培育将假茎生长至2厘米左右的无根继代苗转入生根培养基中培养，培养温度为27 T〜31 T，光照2500〜3000LXS，每天光照的时间为10小时左右。
1.1.6组培苗的炼苗培养将培养室内培养的约3厘米高以上的组培苗转换至外界自然光温条件下培 养，待叶片转浓绿色后（时间大约 7〜10天）开始移栽。
移栽时最好先打开塑料袋一个晚上，第二天用清水冲洗掉根部的培养基，并根据苗的大小进行分级。
1.1.7检疫性有害生物的检测和变异株的剔出 1.1.7.1病毒的种类主要检测束顶病（BBTV ）和花叶心腐病（CMV ）。
1.1.7.2检测方法采用血清学DAS-ELISA 法检测。
1.1.7.3变异株的剔出按香蕉组培检定苗质量标准中规定的 6种变异株予以剔出。
变异株的6种类型:①假茎和叶片、叶脉变红；②假茎变青、叶片尖形，叶柄细长；③假茎矮粗，叶 距较密集、叶片短圆（矮变）；④叶片卷曲对称；⑤叶片出现黄、白色条纹或缺 绿斑块；⑥植株生长特快，和一般的植株不一样，叶片特大，杆特粗（高变）。
1.2不同植物生长调节剂对香蕉组织培养的影响以MS+3%蔗糖+0.6%琼脂作基 本培养基，每个处理3次重复，每个 重复10株（块）,接种后置于室内日光 灯下培养,光照强度为1 500~2OOOIx,每天光照12 h,培养温度为 （28 ± 2）°C 。
诱导培养于第二代接种 后30天、分化培养于接种后20天、 生根培养于接种后 30天进行调查 观察，计算各处理的芽诱导率、增殖 率（倍）和生根率。
诱导培养试验设NAA 添加浓度 为 0、0.02、0.04、0.06、0.08 mg/L和6-BA 添加浓度为2.5、5.0、7.5、10.0、12.5 mg/L 共 25 个处理。
各 供试品种取嫩球茎，在自来水冲浴下 除去外层叶片,置于0.1% HgCI2溶 液中浸泡15 min,无菌水冲洗5次, 然后在超净工作台上沿球茎生长点 纵切成2~4块，每块大小约3 cm3, 分别接种到诱导培养基中进行培养， 每代培养30天。
分化培养试验设NAA 添加浓度为 0.0、0.1、0.2、0.3、0.4 mg/L 和6-BA 添加浓度为2.0、4.0、6.0、 8.0、10.0 mg/L 共25个处理,将经2 代培养并诱导成功的芽体分别转接到分化培养基进行分化培养，每代培养25天。
生根培养试验设NAA 添加浓度为0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mg/L 和 6-BA 添加浓度为 0、0.02、0.04、0.06、0.08 mg/L 共25个处理，将分化的丛芽切成单株，分别转接到生根培养基中进行培养。
6- BA NAA 诱导率｛怖、 普通衿苗 粉琵 贡苗2. 5 n 43 19 472. 5 0 02 47 272. 5 0. 04 42 36 壮 2,5 0.06 3M 30 402. 5 0 DM 31 22 305.0 0 W 37 SO5,0 D. 02 y? 4b丸 5.0 0 04 42 S750 0. Ofi 81 40 E55.0 0. 08 77 37 70 7,5 0667. 5 0 02 84 7092 7,5 0 04 so 74 S77. 5 0佃 6ft 72 617. 5 0 08 50 69 59 10.0 0 JO 77 42 10.0 0.02 45 79 44J0.0 0 04 45 M2 34 10.0 0. Ofi 37 80 32 10,0.如 76J2. 5 061 29 11. 5 0 02 31 70 39J2. 5 O. 04 29 73 33n. 5O. 06 20 60 23 12. 5 O OS 17 51 ig 表1 2 BA 与NAA 对各香蕾品种外植怵诱导威芽的影响注：衷屮数据为谨导培养第】代樓种后刃天的调奁结果.6- BA (iiig/ 1」N.X.X(tiiji/ L)增殖率〔倍、6- BA(m jr/ L){ iug/1 )普通涉蕉粉蕉页蕉普通再蕉粉点2.00 2. 811.卿ill00.2772.00. 1 2.67 2.71 1.9900.480«1 2,00.2 2.31 2.801飞2{)o.c9180B52. n0. 3 2.1J 2. 6K 1.00. &SX932. 00.41-99 1. S0 1.610 1.09589934. U0 3.07 2. J3 2.790. 02U.2H679854. 00. 1 3. 10 2. 31 2. 850.020.4N9K1SK 4.0U. 2£93 2.A4 2. BU0 020.692H490 4. 00. 3 2.斗] 2 “ 2. 4L0. 020. s g石9()944.00.4 1. 88 3.7S 1.980. U2 1.09()946 00 2.37 1.502,610. 040. 2如7[J so6. 0C). 1 2. 39 1.61 2.帆}0 04厲4S7恥W7 6. 0C). 2 2. 2()].66 2.770 04-0.69084甜6. 0(J. 3 1.如].79 2. 146.00.4 1.77L.34 2.010. W U. 892849Ua.o0工10L. 80 1. H00. 04 1.0时S4908,00. L 2. 19 1.91 1.91o nt>0.2797576no0.2 2. )0 2.02 1. 800 OS0.4S27878no0.3J.7O 2. L] 1 700.U飞877880H. U{).4 1.63].91 1.550. Oft® S⑷S0幻10. 0() 1.70].61 1.6(}0 06 1.0908079 10.0(L 1 2. 0071L750. UK U.2787166 10.00.2 1. K1 1.70J . «0 a. os0.4和71fiN 10.00.3 1.60 1.83J.70o ns0.67470 10.00.4 1. 55 1.BB 1.68o恥0. B B47572注：衣屮數据为分化培养接种厉20天的调査结聲.0. U8 1.08()7573注：去中数掘为上幄培菲按种后州天的调盘结果' 由上可得出普通香蕉(巴西蕉,AAA)诱导成苗为6-BA 5.0 mg/L+NAA 0.02 mg/L,继代增殖培养为6-BA 4.0 mg/L+NAA0.1 mg/L,生根培养为6-BA 0.02 mg/L+NAA 0.8mg/L;粉蕉(ABB)诱导成苗为6-BA 10.0 mg/L+NAA 0.04 mg/L, 继代增殖培养为6-BA 2.0 mg/L+NAA0.2 mg/L, 生根培养为6-BA 0.02 mg/L+NAA 0.8 mg/L;贡蕉(AA)诱导成苗为6-BA7.5mg/L+NAA 0.02 mg/L,继代增殖培养为6-BA 4.0mg/L+NAA 0.1 mg/L,生根培养为6-BA0.02 mg/L+NAA 0.8 mg/L。
植物生长调节剂的生理作用具有两面性，它既能促进生长、增殖，也能抑制生长,甚至杀死植物，其关键取决于植物生长调节剂的种类、浓度及植物细胞的年龄和器官的种类等，一般低浓度下促进生长，中等浓度下抑制生长，高浓度下致畸致死植物。
在普通香蕉、粉蕉、贡蕉组织培养生产中，如果植物生长调节剂的种类、浓度组合使用得当，完全能够获得满意的效果。
2.农杆菌介导的香蕉遗传转化对于大多数的香蕉产区，香蕉生产长期遭受着诸如香蕉束顶病、香蕉花叶心腐病、香蕉枯萎病、香蕉叶斑病和香蕉交脉蚜等病虫害的严重威胁，这些病虫害不仅使植株长势受到影响，甚至给香蕉生产带来毁灭性的灾难。
由于香蕉的种质资源相对缺乏，现有的香蕉品种中还未发现高抗病品种。
香蕉栽培品种绝大多数都是三倍体，难以采用传统的育种方法进行遗传改良，因此，利用转基因技术对香蕉进行遗传改良就显得尤为重要。
香蕉是作为生物反应器生产口服疫苗的理想材料，要将香蕉变成现实的生物反应器，实现香蕉的产业升级，必须建立有效的转基因技术平台2.1农杆菌介导的香蕉遗传转化研究受体类型品种丟基因型外源基因Explants Cultivars and genotypes Foreign genes尖分生组织Grand Nni门(/L彳/!)Shoot meristematic tipsGrand Nni门Williams (AAA)Mb w azirumc (A“4 A )n 茎尖分生组织BlnggocShoot meristematic tips TMPx2 796-5(^.-IZ,XTMPx548-9(.-l.-IZ,X AA}M LI SLI bulhi si an LI(胚性悬浮细胞Rtisihtili〔.丄J/T)GUSECS胚性悬浮细胞CEMSA (AA^)(SUS ECS N avolc an(j4 .5)胚性细胞Embr^'0genie cellsRast hall (AAB)HbxA^旺性细胞EnibQ'ogenie cells Rnsihali(AA/>}抗菌肽蛙皮義MugaininAP24, MN 丿L「质酶、閲S Grand Nni门(WN )Chili ntisc, GUS 几「质B, AP24肛性悬浮细胞Chili ntisc, AP24ECSNavolcan (AA/> }AP24, GUS 儿「质AP24 Chili nusc, AP24胚性悬浮细胞Grand )GUS ECS Three Hand Planty (AA^)m GUSObino 1'EwaiMJ^)m GUSOrishelc(JJ^)m GUS茎尖分生组织Shoot tipsAgbagba (AA^)GUS分生组织Grand Nain( J )nMeristem春蕉W)Musa /L4A group Tai jiao葡萄糖氧化酶粉蕉（朋鋼Glucose oxidase 茎微盘Musa AAff group FenjiaoCorm slices秦蕉〔.丄丄山k溶菌酶Musa /L 丄4 group Tai jiao Human lysozyme2.2影响农杆菌介导香蕉转化的几个重要环节2.2.1侵染过程用基因枪(轰击用的金微粒不包被外源DNA)轰击植物组织造成微伤，植物组织受伤后释放出的信号诱导分子，可以促进农杆菌对转化材料的吸附。