Attune NxT流式细胞仪标准操作规程
一、启动Attune NxT流式细胞仪
1、依次打开电脑主机电源、显示器及仪器电源。
电脑用户名为INSTR-ADMIN，
密码为INSTR-ADMIN（全部大写）。
2、双击Attune软件图标，用户名为admin，密码为password1（全部小写）。
3、检查仪器内四个液体容器，清空“waste”桶中的废液，确认“Focusing fluid”、
“Wash solution”和“Shutdown solution”三个桶中的液体量是否满足实验要求（液面较高）。
4、点击startup，等待机器启动，整个过程大约需要3分钟。
仪器指示灯显示为
绿色，软件左下角出现绿色对勾即为启动完成。
5、点击performance test，在2mL鞘液中滴入3滴performance tracking beads，
混匀后上机，点击Run Performance test。
Performance test每天运行1次。
这个过程大约耗时3分钟。
二、检测样品
1、点击new experiment新建一个实验，选择tube或plate实验，输入实验名称，
采用默认的Workspace和仪器设置参数，输入Tube Groups和Tube Samples 的数量，点击OK。
2、双击软件右侧Experiment下的Compensation，在弹出的对话框中选择相应的
荧光通道，点击OK。
3、双击UC后上样，点击Run，并调节电压，电压调好后点击Record，依次将
每个单染色的样本上样，并点击Record记录其荧光信号。
4、荧光补偿调好之后双击sample，上样后点击Run即可得到样本的荧光信号。
根据需要建立散点图并建门。
三、关闭Attune NxT流式细胞仪
1、确认”wash solution”和”shutdown solution”桶中液面高度至少在桶高的一半以
上，清空“waste”桶。
2、点击shutdown，选择Quick、Standard或Full，样品管内加入3ml 10% bleach
液，点击next启动关机程序，此时请勿关闭软件或者终止shutdown过程，关
机程序大约需要35分钟，关机程序完毕后仪器将自动关机。
3、注：如果关机程序被提前终止，则需要强制重启整个系统，并重新跑一遍
startup程序。
四、Attune NxT流式细胞仪的日常维护
1、日常shutdown程序（每天执行）：同日常关机程序。
2、日常检查（每天执行）：检查上样针、鞘液桶及其连接处是否有漏液。
3、液路维护（每天执行）：
●De-bubble：点击De-bubble按钮，放下样品管托载器，按照提示点击next
将运行Rinse程序。
Rinse程序结束后，上样针处放置一管 1.5 ml的
Debubble液，点击next开始运行De-bubble程序。
De-bubble程序结束
后，放下样品管托载器，点击next关闭对话窗口，仪器将自动运行Rinse
程序。
●Unclog：点击Unclog按钮，上样针处放置一个干净的空样品管，点击next
开始运行unclog程序，待unclog程序结束后，取下空管，点击next关闭
对话窗口，仪器将自动运行Rinse程序。
●Sanitize SIP：点击Sanitize按钮，选择Sanitize Attune SIP，上样针处放置
一管3ml 10% bleach液，点击next开始运行Sanitize SIP程序。
●Rinse：点击Rinse按钮，放下样品管托载器，按照提示点击next将运行
Rinse程序。
●Deep Clean：点击Deep Clean按钮，选择Quick、Standard或Thorough，
放下样品管托载器，按照提示点击next将运行Rinse程序。
Rinse程序结
束后，上样针处放置一管3ml 10% bleach液，点击next将运行Deep Clean
程序。
●Decontaminate System：点击Decontaminate System按钮，点击next开始
运行Decontamination Phase 1，用去离子水冲洗所有鞘液桶，在“Focusing
Fluid”桶内加入500ml 10% Bleach液，其他鞘液桶保持空桶，连接鞘液
桶。
点击next开始运行Decontamination Phase 2，上样针处放置一个干
净的空样品管。
点击next开始运行Decontamination Phase 3，用去离子
水冲洗所有鞘液桶，在“Focusing Fluid”桶内加入500ml 去离子水，连接
鞘液桶，上样针处放置一个干净的空样品管。
点击next开始运行
Decontamination Phase 4，更换focusing fluid过滤器，用去离子水冲洗所
有鞘液桶，在每个鞘液桶内加入对应的液体，连接鞘液桶。
4、电脑维护（每月执行）：整理电脑硬盘并备份实验数据。
5、滤光片的维护（每月执行）
6、清洁系统（每季度执行）：点击Decontaminate System按钮，点击next开始
运行Decontamination Phase 1，用10% bleach液冲洗除waste桶以外的鞘液桶，分别在“Focusing Fluid”和“Shutdown”桶内加入500ml和125ml 10% Bleach 液，”Wash”桶内加入125ml Wash Solution，连接鞘液桶，上样针处放置一个干净的空样品管。
点击next开始运行Decontamination Phase 2，用去离子水冲洗除waste桶以外的鞘液桶，分别在“Focusing Fluid”和“Shutdown”桶内加入500ml和125ml 去离子水，连接鞘液桶，上样针处放置一个干净的空样品管。
点击next开始运行Decontamination Phase 3，更换focusing fluid过滤器，用去离子水冲洗所有鞘液桶，在每个鞘液桶内加入对应的液体，连接鞘液桶。
7、更换过滤器（每半年执行）
8、净化液路（每半年执行）：取下鞘液桶，弃去桶内所有液体，每个桶内加入
20ml去离子水，更换桶盖，颠倒混匀清洗鞘液桶，弃去液体。
每个桶内加入20ml 70%异丙醇或者100ml 10% Bleach液，更换桶盖，颠倒混匀清洗鞘液桶，静置10分钟后弃去液体。
翻转鞘液桶，待桶内液体挥发后，在每个鞘液桶内加入对应的液体，连接鞘液桶。
运行Startup程序。
9、更换上样注射器（每半年执行）。