过硫酸钾氧化紫外分光光度法
1 原理
总氮total nitrogen（TN），指可溶性及悬浮颗粒中的含氮量，包括水中亚硝酸盐氮、硝酸盐氮、无机铵盐、溶解态氨及大部分有机含氮化合物中氮的总和。

在60℃以上水溶液中，过硫酸钾可分解产生硫酸氢钾和原子态氧，硫酸氢钾在溶液中离解而产生氢离子。

分解出的原子态氧在120℃～124℃条件下，使水样中含氮化合物的氮元素转化为硝酸盐，采用紫外分光光度法于波长220nm和275nm 处，分别测定吸光度A220及A275，按以下公式计算校正吸光度A，
A＝A220－2A275
总氮（以NO3-N计）含量与校正吸光度成正比。

过硫酸钾分解反应式如下：
K2S2O8+H2O→2KHSO4+21O2
KHSO4→K++HSO4-
HSO4-→H++SO42-
本方法的有效测定范围为0.20mg/L～7.00mg/L。

2 实验用品
2.1仪器：1000ml容量瓶、100ml容量瓶、10ml比色管若干、最大量
程分别为5ml、1ml、0.2ml的移液枪一支、分光光度计；
2.2 药品：氢氧化钠、过硫酸钾、硝酸钾、浓盐酸（ρ（HCl）=1.19g/ml）、
浓硫酸（ρ（H2SO4）=1.84g/ml）；
2.3 试剂配制：
（1）碱性过硫酸钾溶液:称取40.0g 过硫酸钾，溶于600ml水中（可置于50℃水浴中加热至全部溶解）；另称取15.0g 氢氧化
钠溶于300ml水中。

待氢氧化钠溶液恢复到室温后，混合两
种溶液定容至1000ml，并存放在聚乙烯瓶内，可保存一周；
（2）硝酸钾标准贮备液：称取0.7218g硝酸钾，溶于适量水中，移至1000ml容量瓶中定容，混匀。

其中的总氮含量为
100mg/L。

加入1ml～2ml三氯甲烷为保护剂，在0℃～10℃
暗处保存，可稳定6个月；
（3）标准硝酸钾工作液：准确移取硝酸钾标准贮备液10.00ml至100ml容量瓶中定容，混匀，临用现配。

其中的总氮含量为
10mg/L；
（4）5mol/L NaOH溶液:称取20gNaOH，加水定容至100ml；
（5）硫酸溶液：取10ml浓硫酸加入350ml水中冷却备用；
（6）盐酸溶液：取10ml浓盐酸加入90ml水中冷却备用；
3 实验步骤
3.1标准曲线
取10支试管，按下列表格加入试剂显色，以蒸馏水为参比水样进行调零，并测定吸光值A220、A275
塞紧管口后，于高压蒸汽灭菌锅121ºC反应30min，冷却至室温盐酸溶液/ml 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4
用蒸馏水定容至10ml
对应各管中4ml溶液
0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0
总氮浓度（以NO3－N
计）/(mg/L)
A2750.011 0.010 0.014 0.010 0.014 0.012 0.015
A r= A220—2 A2750.053 0.132 0.245 0.322 0.382 0.470 0.561
A= A r—A r（0）—0.079 0.192 0.269 0.329 0.417 0.508 以编号1～7的数据作标准曲线，横坐标为对应各管中10ml 溶液总氮浓度（以NO3－N计）（mg/L），纵坐标为A；
(附图为3月28日数据)
3.2水样的测量
取0.2ml经处理过的水样（如有必要先稀释或减少用量）于10ml比色管，用氢氧化钠溶液或硫酸溶液调节pH至5～9，然后加入蒸馏水稀释至4ml后，分别加入2ml碱性过硫酸钾溶液，然后塞紧管口后，置于高温蒸汽灭菌锅121ºC加热30min，冷却至室温；之后分别加入盐酸溶液0.4ml，用水稀释至10ml；以蒸馏水为参比水样进行调零，并测定各管吸光值A220、A275，计算各个吸光值A r=A220—2A275各值减去空白试验（即标准曲线0号
管的吸光值A r(0)=A220(0)—2A275(0)）即为校正值A（此全过程应与标准曲线同时操作）；
3.3水中氨氮的浓度按下式计算：
ρN(TN)= [4×(A-a)/(b×V) ]×D
式中：
ρN(TN)——原水样中总氮的浓度，mg/L，以N 计；
A——试样校正后的吸光值；
b——标准曲线的斜率；
a——标准曲线的截距；
V——所取试样的体积，ml；
D——稀释倍数（水样未经稀释时此值为1）；
4 注意事项
实验中玻璃器皿应用硫酸溶液浸泡，用自来水冲洗后再用蒸馏水冲洗数次；
该方法可测量范围跨度很大，但也意味着溶液中总氮浓度过小会造成的误差几率也大，因此溶液所取量应尽量往高浓度方向进行；
出于对所用蒸馏水可能含有含氮物质的缘故，会令标准曲线测试样及水样的测得值大于实际值，因此以0号管消去去蒸馏水可能含有含氮物质所造成的误差，所以标准曲线不过原点。

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