•对受体细胞无害
——便于进行筛选
常用种类 质粒、噬菌体和某些动植物病毒
质粒是最好和最常用的运载体
质粒
结构
能自主复制的小型双链环状DNA分子
分布 许多细菌及酵母菌等生物中。
最常用的质粒
是大肠杆菌的质粒，其中常
含有抗药基因
思考：质粒上存在的标记基
因有什么用途？
可以检测质粒是否导入了受体 细胞。
基因工程的诞生
基因工程，实施该工程的最终目的是
A. 定向提取生物体的DNA分子
【答案：D】
B. 定向地对DNA分子进行“剪切”
C. 在生物体外对DNA分子进行改造
D. 定向地改造生物的遗传性状
2、在基因工程中，切割运载体和含有目的基因的DNA片段，
需使用
A、同种限制酶
B. 两种限制酶
C、同种连接酶
D. 两种连接酶
不同DNA用同一限制酶 能够切出相同粘性末端
BamHI
识别GGATCC序列，并在G和G之间将其切开
G GA TC C C C T AG同一限制酶切出相同粘性末端
GCGAA T T CCC CG CT TA AGGG
EcoRI
A TGAA T T CAA TA CT TA AG TT
【答案：A】
3、基因工程又叫重组DNA技术。 假设以大肠杆菌质粒作为运载体，并以同一
种限制性核酸内切酶切割载体与目的基因，将 切割后的载体与目的基因片段混合，并加入 DNA连接酶。连接产物至少有 3 种环状DNA分 子，它们分别是：
运载体与运载体相连、目的基因与目的基 因相连、运载体与目的基因相连
注意： 限制性核酸内切酶和DNA连接酶的作用部位都
是磷酸二酯键，只是一个是切开，一个是连接
基因进入受体细胞的载体
作用
• 作为运载工具，将外源基因送入受体细胞
• 利用它在受体细胞内对外源基因进行大量复制
载体必须具备的条件
•能在宿主细胞内自我复制
——以便外源基因扩增和传递
•有一个或多个限制酶切点
•具有某些标记基因 ——以便外源基因插入到载体上
EcoRI
GCG
AATTCCC
CGCT TA A
G GG
ATG
AATTCAA
TACT TAA
GTT
GCGAA T T CAA CG CT TA AG TT
DNA连接酶
作用 将配对黏连后的两个相同的黏性末端连接起来
GCG AA T T CAA CG CT TA AG TT
连接部位 两条链的骨架部分，形成磷酸二酯键
EcoRI 大肠杆菌中的一种限制酶 切口
识别GAATTC 序列，并在G和 A之间切开
G AATT C C T TAAG
G
AATTC
C T T A A 黏性末端 G
切开的DNA两条单链的切口， 带有几个伸出的核苷酸，他们 之间正好互补配对，这样的切 口叫黏性末端
用特定内切酶可切取DNA 分子中的含基因片段
THANKS !
感谢聆听！
1972年，斯坦福大学， 完成首次DNA的人工重组
1973年，斯坦福大学， 首次完成细菌之间性状转移
A含四环素抗性 基因质粒
——标志基因工程诞生
取出
同一限制 性核酸内 切酶处理 B含卡那霉素抗 性基因质粒
移入大肠 杆菌
含相同粘 性末端
同时抗四环素和卡那霉素
练习
1、科学家们经过多年努力，创立了一种新兴生物技术——