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最新临床微生物标本处理及操作流程
• 急性支气管炎 • 社区获得性肺炎 • 院内获得性肺炎 • 免疫妥协患者肺炎
下呼吸道标本
Lower Respiratory Tract Specimen
自然咳痰
诱导痰 气管内吸取物 肺部组织
支气管肺泡灌洗液 保护性毛刷 支气管灌洗液
标本质量
脓痰
唾液or诱导痰 (?)
粘液样痰 带血痰
用革兰氏染色来评估 呼吸道标本是否合格
成双革兰氏阳性球菌,短链=肺炎链球菌 革兰氏阳性菌成群排列=金黄色葡萄球菌 革兰氏阴性球杆菌(小)=流感嗜血杆菌 革兰氏阴性杆菌大且肥厚=肺炎克雷伯菌或其他
肠道菌 革兰氏阴性双球菌=卡他莫拉菌
可能是肺结核,抗酸杆菌不能被革兰氏染色所染 色。
尿培养标本 Urine Culture
尿道感染
每年850万例尿路感染, 90%为女 性 1/2.5个妇女在一生中会得UTI 下行性感染:血流肾脏膀胱 (金黄色葡萄球菌,酵母菌,结 核分枝杆菌) 上行性感染:尿道膀胱肾盂 血流
临床微生物标本处理及操作流 程
Infection Control Team
The Role of the Clinical Bacteriology Lab
脑脊液 CEREBROSPINAL FLUID
严格无菌操作
soap
脑脊液
CEREBROSPINAL FLUID
无菌操作,腰椎穿刺采样 最少1 mL,最好>5 mL 打入3个小管中,以第二根小管送检培养 分枝杆菌培养标本需要2 mL以上,置于4℃保存 即时送检 绝对不能冷藏!
纯培养的机会致病菌 (查阅凝固酶阴性葡萄球菌的注释)
一种以上细菌生长
检出三种或以上的机会致病菌包括酵母菌 (病人的首份尿标本显示如此的培养结果 ,若重复的尿标本仍然培养出相同的细菌 ,则需要对菌株进行操作)
鉴定&药敏
多种肠道细菌或混杂的皮肤菌丛;重新采集清 洁标本
1-2种机会致病菌(查阅凝固酶阴性葡萄球菌的以上相同注释
用于尿液培养的标本
•肾活检或肾抽吸物(外科) •耻骨上膀胱抽吸物
(孕妇,婴儿,全膀胱)
•微导管尿(内部导管和外部导管)-老年人 •中段尿,清洁留取——急诊成年人 •留置导尿管中采集的标本(经常被三种以上细菌污染)
尿液标本
•采集中段尿时要先用肥皂清洗女性的外阴和男性的外
生殖器包括包皮内,然后用清水冲洗
多种肠道细菌或混杂的皮肤菌丛; 重新采集清洁标本.
进行鉴定和药敏,若数量< 104CFU/ml, 仍然对可能的致病菌进行操作
若为腐生葡萄球菌, 则处理与其他致病菌相同; 其他的凝固酶阴性葡萄球菌则视为污 染
评价尿培养的标准
纯培养的机会致病菌
➢1 organism
(查阅凝固酶阴性葡萄球菌的注释) ➢一种以上细菌生长
三种或以上的机会致病 菌包括酵母菌
ID & Suscept.鉴定&药敏
多种肠道细菌或混杂的皮肤菌丛;重新采集清洁标本
多种肠道细菌或混杂的皮肤菌丛;重新采集清洁标本
)1-2种机会致病菌 (查阅凝固酶阴性葡萄球菌的注释)
如何看待CSF的培养结果?
(1)如果同期送检的血培养大于3天报警,通常不是很紧急
(2)假如仍不确定,电话联系微生物室值日主管,了解革兰氏
染色涂片的相关情况。
(3)必须综合生化和血液学结果 (4)如果CSF常规检查报告中没有中性粒细胞或脑脊液的其他
指标正常,对报告的致病菌应保持怀疑,可能送检污染。
呼吸道标本 Respiratory Cultures
上呼吸道标本
Upper Respiratory Tract Specimens
下呼吸道标本 Lower Respiratory Tract Specimens
下呼吸道感染
Lower Respiratory Tract Infections
若为腐生葡萄球菌,则处理与其他致病菌相同; 其他的凝固酶阴性葡萄球菌则视为污染
进行鉴定和药敏,若数量< 105CFU/ml, 仍然对可能的致病菌进行操作
是
> 104 CFU/ml
导管尿
过夜培养
< 104 CFU/ml
继续培养;
否 随后观察;发送初步的培养阴性报告
24小时后仍不生长则发出 最终的生长阴性报告
几种细菌的混合形态,缺乏鳞状上皮细胞=混合厌氧菌感染。 如果是呼吸道标本可能是吸入性肺炎。报告临床医生“提示 吸入性肺炎”
你看见多少种形态?
呼吸道标本中未被染色的,有折射的杆菌=抗酸杆菌
呈链排列的革兰阳性球菌?或革兰阳性分枝杆菌?
肺中的结节吸出物,不规则“球菌”,分叉,无短链,链的末端的呈尖状,都 证明是分枝状的革兰阳性杆菌,可能是放线菌或诺卡菌(通常来自脑或肺组织 的标本)
呼吸道标本的涂片评估模
式 肺炎-可接受的
不合格标本
评述
很少的鳞状上皮细胞 <10个每低倍视野
许多鳞状上皮 >10个/低倍视野
可以在玻片上看到许多鳞状上皮细胞,说明在采 集时受到了上呼吸道分泌物的污染或口水的污染。
很多的中性粒细胞
很多中性粒细胞混合有形态多 样的细菌(革兰氏阴性杆菌, 纺锤形,革兰氏阳性球菌) 许多或中等量的中性粒细胞,
痰标本>10鳞状上皮细胞/每低倍视野=拒 收
有PMN的痰标本,中性粒细胞多,且鳞状上皮细胞特别 少=接受,进行培养
粘液丝
胞内细菌 ——提示感染 细胞内细菌
柱状纤毛上皮细胞
肺泡巨噬细胞
滑石颗粒
见于迁链排列的革兰阳性球菌和革兰阴性球杆菌。缺乏鳞状上 皮细胞提示混合厌氧菌感染
以一种形态的细菌为主
许多不着色的有折射的杆状细 菌
很少有或没有中性粒细胞 免疫抑制的病人也会出现 中性粒细胞减少
酵母菌样,酵母菌是一种 很少引起肺炎的细菌,常 由口腔污染
中性粒细胞和上皮细胞都很少的标本需要培养
吸入性肺炎标本革兰氏染色的典型形式,培养只 会培养出正常菌群,所以革兰氏染色是用于诊断 的方法。
•长期留置导尿管的患者应在更换新管时留取尿标本。 • 做厌氧培养时应耻骨上膀胱穿刺采集尿。
尿液运输方法
如不能及时送检,需冷藏。 4小时延迟送检,须废弃标本。
是
> 105 CFU/ml
自然排尿 过夜培养
< 105 CFU/ml
否
继续培养; 随后观察;发送初步的培养阴性报告
24小时后仍不生长则发出 最终的生长阴性报告