参考文献
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东南大学吴健雄学院 2016.4.7
[2]田维毅, 王文佳, 李海峰, 等. 中性红法检测巨噬细胞吞噬功能的实验条件优化[J]. 贵阳中医 学院学报 , 2009, 31(2): 23-26. [3]黄忠奎, 陈平, 陈德宇. 黄芪加真武汤对免疫抑制小鼠血清溶血素的影响[J]. 华西医学, 2008, 23(4): 814-815.
•各组取实验一剩下的五只小鼠，在末次给药后次日，用电子天平 精确称取小鼠体质量，然后处死小鼠，取小鼠胸腺、 脾脏称重， 分别计算胸腺指数、 脾指数。 •胸腺指数或脾指数 = 胸腺或脾脏质量(mg)/ 体质量(g)。
四、T 淋巴细胞增殖能力的测定
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•将实验三中获得的脾脏研碎，200 目细胞筛网过滤，用 hank′s液洗涤两次，调整细胞浓度为
预期结果
•1、血清溶血素生成水平值：NS组>黄玉组>CY组>空白对照组。
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•2、通过镜检发现NS组的中性粒细胞吞噬功能强于黄玉组，而黄玉组的中性粒细胞吞噬功能
强于CY组。 •3、胸腺及脾脏指数： NS组>黄玉组>CY组。 •4、刺激指数： NS组>黄玉组>CY组>空白对照组。 •以上预计结果可以说明黄芪能提高被环磷酰胺抑制的小鼠胸腺指数和脾脏指数；使中性粒细 胞吞噬功能增加；使血清溶血素水平增高；拮抗环磷酰胺对小鼠的免疫抑制作用。
黄芪对免疫抑制小鼠细胞 免疫作用的影响
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目录
•血清溶血素水平的测定
•中性粒细胞吞噬功能的测定 •小鼠胸腺及脾脏指数检测 •T 淋巴细胞增殖能力的测定 •预期结果
•参考文献
一、血清溶血素水平的测定
ห้องสมุดไป่ตู้
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• 从各组分别随机取五只小鼠，于加药结束前 3 天腹腔注射 0.2 mL 5%绵羊红细胞致敏。
OD)×500。
二、中性粒细胞吞噬功能的测定
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•在完成实验一后在小鼠腹腔注射无菌肉汤1 mL/ 只，40分钟后从腹 腔注入菌液1ml/只，轻揉腹部 3 分钟，抽取腹腔液。 •将抽取的腹腔液滴在玻片上，待干后用瑞氏染色法染色，镜检。
三、小鼠胸腺及脾脏指数检测
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• 4 天后，取血，制备血清，稀释 500 倍备用。取稀释好的血清 1 mL，加 10%补体 0.5 mL，加 5%绵羊红细胞悬液 0.5 mL，混匀，置于 37 ℃孵育 30 分钟，0℃终止反应。 • 1500 r/min离心 5 分钟，取上清 1 mL，加蒸馏水 3 mL。 •另取 5% SRBC 悬液 0.25 mL 加蒸馏水至4 mL(作为 SRBC 半数溶血值)，摇匀静置 10 分钟，同时 设生理盐水空白组加生理盐水4ml。测量紫外分光光度计 570 nm 读取吸光度值（OD值）。 •计算血清溶血素生成水平值(HC50值)。计算方法：HC50=(样品管 OD÷SRBC 半数溶血
[4]薄华本, 邵红伟, 胡凌波, 等. 细胞活性检测方法优化[J]. 中国实用医药, 2008, 3(21): 1-2.
[5]李新翔, 李雪嫣, 桂曼曼, 张李峰, 程卫东, 胡燕. 复芪止汗颗粒对小鼠免疫功能影响的实验研
究[A]. 方药· 药学研究, 2012 Vol.25 No.11.
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1×107 个 /mL。将细胞悬液加入 96 孔培养板，每孔 100 μL，每个样本设 6 个复孔，其中三孔
加 ConA（终浓度为 5 μg /mL）各 100 μL，另外三孔不加 ConA，并用完全 培养基做空白对照。 •置 于37℃，5% CO2 培养箱内培养 60小时，取出培养板，向各孔加入 MTT20 μL(终浓度为5 mg/mL)，继续孵育 4 小时。 •培养结束后，每孔加入 100 μL10%SDS，吹打混匀，37℃放置过夜，于酶标仪 570 nm 处测定 OD 值。刺激指数计算方法：刺激指数 = 实验孔 OD 均值 / 对照孔 OD 均值。