试卷1《植物组织培养技术》试题(一)一、填空题(每空1分,共20分，)1、一般培养室控制的温度是__20-30℃____，培养基常选用的pH 值是__5.6-5.8___。

2、在组织培养中，培养基常用___高压蒸汽____法灭菌，不耐热物质用_过滤____法灭菌。

3、非洲菊的叶片__丛生___,故没有直立的茎，在组织培养的继代过程中用__花蕾外植体____法繁殖。

4、1962年，Murashige 和Skoog为培养烟草细胞设计了_MS__培养基，其特点是_无机盐__浓度较高，且为较稳定的__溶液__。

5、从单个细胞或外植体形成的愈伤组织，大致要经历__脱分化、_分裂_和＿再分化＿期。

6、6-BA / NAA 的高低决定着外植体的发育方向，其比值高时__诱导芽形成____，比值低时___诱导根形成____。

7、脱毒苗培养的常用两种方法是_茎尖培养脱毒__和_愈伤组织培养脱毒__。

8、菊花在生产实践中常用_脚芽扦插__法繁殖，在组织培养可用_茎尖、花蕾__作为外植体进行培养。

.9、草莓属于_____科植物，用微尖培养草莓主要使其＿＿＿＿，从而提高产量和质量。

二、判断题（每题2分,共10分，）（×）1、对外植体材料用酒精消毒目的只是灭菌。

（×）2、菊花属于球根花卉，而兰花属于宿根花卉。

？P53 （×）3、诱导愈伤组织重新脱分化出各种不同的器官和组织，这个过程称为脱分化。

（×）4、MS0培养基是没有激素的培养基。

（×）5、受精卵和体细胞都具有全能性。

?（动物体细胞的核）三、名词解释（每题2分，共10分）1、细胞全能性答：每个细胞都拥有该物种的所有遗传信息，并在条件合适的情况下能够发挥该物种的各种功能和有发育成为一个正常和完整的独立个体的能力。

2、灭菌答：采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施，称为灭菌。

3、玻璃化现象答：当植物材料进行离体繁殖时，有些培养物的嫩茎、叶片往往会出现半透明状和水渍状，这种现象成为玻璃化，玻璃化是试管苗的一种生理失调症状。

4、指示植物答：指示植物即接种某种病毒后表现特有症状的植物。

主要植物种类有：苋色藜、昆诺阿藜、大灰藜、巴西牵牛和千日红等。

5、驯化答：植物组织经长期培养，会发生一些变化。

开始继代培养要加入生长调节物质，其后加入少量或不加入生长调节物质就可以生长，这种现象成为驯化。

四、选择题（每题1分,共10分）（D）1、下列哪种不是原生质体分离所用的酶A纤维素酶B半纤维素酶C果胶酶D淀粉酶（）2、下列哪种不是组织培养常用的维生素A：维生素B2、B：维生素B1、C：维生素B6、D：维生素C（C）3、在花药培养中下列哪种不是花粉的发育过程。

A营养细胞发育途径B生殖细胞发育途径C胚状体发育途径D花粉均等分裂途径（③）4、下列哪种激素不属于生长素类①IAA②IBA③6-BA④NAA（）5、在未成熟胚胎培养中下列哪种不常见的生长方式A“胚性”生长B早熟萌发C先胚根后胚芽D先形成愈伤组织再分化（B）6 、适于花粉培养的最佳时期是＿＿A双核期B单核期C多核期D无核期（A）7、下面哪种是MS培养基大量元素所用药剂A硫酸镁B硫酸亚铁C硫酸锌D硫酸铜（D）8、下列哪种不是在MS培养基起作用的有机物A氨基酸B肌醇C维生素D琼脂（C）9、常见的组织培养程序包括①取材②接种③灭菌④做培养基A①②③④B①④③②C①③②④D①④②③（A）10、和组织培养相似的代名词是A克隆B有性生殖C孤雌生殖D单性生殖五、简答题（共50分）1、6-BA在组织培养中有何作用？(6分)细胞分裂素类激素是腺嘌呤的衍生物，常见的有6-BA、KT、ZT、2-ip等。

其活性强弱为2-ip > ZT > 6-BA > KT。

作用：在植物组织培养中，细胞分裂素的主要作用是抑制顶端优势，促进侧芽的生长。

当组织内细胞分裂素／生长素的比值高时，有利于诱导愈伤组织或器官分化出不定芽；促进细胞分裂与扩大，延缓衰老；抑制根的分化。

因此，细胞分裂素多用于诱导不定芽的分化和茎、苗的增殖。

由于6-BA具有高效、稳定、廉价和易于使用等特点,因而被广泛采用,并且是组织培养者最喜爱的细胞分裂素。

BA的主要作用是促进芽的形成,也可以诱导愈伤组织发生。

可用于提高茶叶、烟草的质量及产量；蔬菜、水果的保鲜和无根豆芽的培育，明显提高果品及叶片的品质。

2、述活性炭在组织培养中有哪些作用及使用注意事项？(6分)在植物组织培养中经常要用到活性炭。

活性炭加入培养基中的目的1）主是利用其吸附能力，减少一些有害物质、生长抑制剂的影响，2)活性炭使培养基变黑，给培养物创造了暗环境，有利于某些植物生根3）对形态发生和器官形成有良好的效应，但活性炭对物质吸附无选择性，既吸附有害物质，也吸附有利物质，因此使用时应慎重考虑，不能过量，一般用量为1%~5%。

3.什么叫花粉看护培养法？原理是什么？(6分)花粉看护培养：是将诱导频率较高的一种植物裂开的花药接种在培养基上作为看护组织，再将另一种植物或同种植物的单花粉粒接种在花药里进行滋养培养，或在花药上放一小片滤纸，再让花粉粒接种在滤纸上培养，或将一种植物的愈伤组织作为看护组织，再接花粉粒培养。

由于完整的花药发育过程释放出有利于花粉发育的物质，并通过滤纸供给花粉，促进了花粉的发育。

4.茎尖培养脱毒的原理是什么？接种时应注意什么？感染病毒植株的体内病毒的分布并不均匀，病毒的数量随植株部位及年龄而异，越靠近茎顶端区域的病毒的感染深度越低，生长点(约0.1～1.0mm区域)则几乎不含或含病毒很少。

这是因为病毒运转速度慢，加上茎尖分生区域内无维管束，病毒只能通过胞间连丝传递，赶不上细胞不断分裂和活跃的生长速度。

在切取茎尖时越小越好，但太小则不易成活，过大又不能保证完全除去病毒。

剥离茎尖时，应尽快接种，茎尖暴露的时间应当越短越好，以防茎尖变干。

5、移栽驯化香石竹时怎样选用基质和搭配基质？(6分)适合于栽种试管苗的基质要具备透气性、保湿性和保肥的特点，且容易灭菌处理，一般可选用珍珠岩、蛭石、砂子等。

为了增加粘着力和一定的肥力可配合草炭土或腐殖土。

配制混合基质时需按比例搭配，一般用珍珠岩，蛭石，草炭土或腐殖土比例为1：1：0.5。

也可用砂子：草炭土或腐殖土为1：1。

此外，要根据不同植物的栽培习性来进行配制，这样才能获得满意的栽培效果。

移栽驯化香石竹时就可按上述比例选用和搭配基质进行筛选，选出最适合的基质。

6.接种室有哪些技术要求？(6分)接种室：接种室又称无菌室，是分离和移接菌种的小房间，实际上是扩大的接种箱。

在构造和设置上要求如下：①接种室应分里外两间，里面为接种间，面积5~6m2；外间为缓冲间，约2~3m2。

两间门不宜对开，出入口要求装上推拉门，以减少开关门时的空气扰动。

高度均为2~2.5m。

接种室不宜过大，不易保持无菌状态。

②房间里的地板、墙壁、天花板要平整、光滑，以便擦洗消毒。

③门窗要紧密，关闭后与外界空气隔绝。

④接种室的主要设备及用具有(1)接种箱(2)超净台(3)解剖镜(4)无菌操作用的器具如酒精灯、常用接种工具。

⑤工作台上方和缓冲间天花板上安装能任意升降的紫外线杀菌灯和日光灯。

因接种室面积大，所以紫外线消毒的时间需30min左右。

为提高接种成功率，进入接种室要穿戴经过消毒的衣、帽。

菌种制作大多采用接种箱操作。

7.用湿热法进行高压灭菌的大致步骤有哪些？(7分)湿热灭菌法是指用饱和水蒸气、沸水或流通蒸汽进行灭菌的方法，由于蒸汽潜热大，穿透力强，容易使蛋白质变性或凝固，是药物制剂生产过程中最常用的灭菌方法。

培养基用高压灭菌。

打开锅盖，加水至水位线。

把已装好培养基的三角瓶，连同蒸馏水及接种用具等放入锅筒内，装时不要过分倾斜培养基，以免弄到瓶口上或流出。

然后盖上锅盖，对角旋紧螺丝，接通电源加热，当升至0.05MPa时，打开放气阀放气，回“0”，后关闭放气阀。

当气压上升到0.10MPa时，保压灭菌20min，到时停止加热。

当气压回“0”后打开锅盖，取出培养基，放于平台上冷凝。

灭好的培养基不要放置时间太长，最多不能超过1周。

8、怎样用指示植物法鉴定草莓是否含有病毒？(7分)指示植物法：将一些对病毒反应敏感、症状特征显著的植物作为指示植物（又称鉴别寄主），利用病毒在其他植物上产生的枯斑作为鉴别病毒种类的方法。

这种方法条件简单，操作方便，为一种经济而有效的鉴定方法，鉴别草莓是否含病毒常用的是小叶嫁接法。

具体方法是取被鉴定草莓生长成不久的新叶，除去两边小叶，中央小叶带1～1.5厘米长的叶柄，削成锲形做成接穗，指示植物（林丛草莓、深红草莓）则除去中间的小叶，在叶柄一侧用刀切入1～1.5厘米，接入接穗，用毛线包扎好，涂上少量的白色凡士林以防干燥。

若带有病毒，嫁接后1～2个月在新展开的二叶片、匍匐茎或老叶上，会出现病斑，若无则说明被鉴定苗是无病毒苗。

试卷2一、填空题(每空1分,共20分)1、在分离原生质体酶溶液内，需加入一定渗透稳定剂，其作用是保持原生质体膜的稳定，避免破裂。

2、花药是植物的生殖器官，用其进行组织培养可培养出完整单倍体植物。

3、选用驯化基质主要考虑透气性和保湿性问题4、组织培养的特点包括培养材料经济、培养条件人为控制，周年生产和生长周期短，繁殖率高三个方面。

5、从单个细胞或外植体形成的愈伤组织，大致要经历启动期（诱导期）、分裂期和分化期。

6、非洲菊的叶片_丛生______故没有直立的茎，在组织培养的继代过程中用__？___法繁殖。

7、脱毒培养的常用两种方法是热处理脱毒和微茎尖培养脱毒。

8、6-BA /NAA 的高低决定着外植体的发育方向，其比值高时诱导愈伤组织或器官分化出不定芽，比值低时诱导根分化。

9、草莓属于蔷薇科植物，组织培养草莓主要使其____？_____。

10、矮牵牛属于十字花科植物，组织培养中常用花药或花粉作外植体。

二、判断题：（）1、非洲菊常用茎尖作为外植体接种（）2、湿热灭菌时灭菌时间与培养容器的关系是：容器越大灭菌时间应越长。

（）3、愈伤组织就是由伤口处产生的愈合组织（）4、MS0培养基是没有激素的培养基。

（）5、升汞靠氯气灭菌，次氯酸钙靠汞离子来灭菌。

1、错（花托是非洲菊组织培养中较为合适的外植体材料）2、错3、错4、错5、错三、名词解释1、细胞全能性：植物每一个具有完整细胞核的体细胞，都含有植物体的全部遗传信息，在适当条件下，具有发育成完整植株的潜在能力。

2、灭菌：用理化方法杀死物体表面和孔隙内一切微生物或生物体。

3、White培养基：由White为培养番茄根尖而设计，无机盐量较低，但提高了MgSO4的浓度和增加了硼素，使用广泛，适合生根培养、胚胎培养等的一种培养基。

4、指示植物：一定区域范围内能指示生长环境或某些环境条件的植物种、属或群落。