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其它NOS抑制剂
• 双氢吡啶拮抗剂和钙通道激动剂(BYk8644)是 一种非钙依赖性NOS抑制剂。能抑制内毒素诱 导巨噬细胞产生NOS。钙拮抗剂硝苯吡啶同样 能够抑制体内和体外非钙依赖性NOS的活性。
• 转移生长因子-β2剂量依赖性地抑制白介素1β和TNF-α刺激GC的形成和NOS的诱导。
—对cNOS无抑制作用。
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氨基胍 (aminoguanidine)
• 是一种iNOS的选择性抑制剂，抑制作 用大于精氨酸类似物，
• 它对iNOS的抑制作用明显大于cNOS。
• 它能明显延缓内毒素休克引起的循环衰 竭，改善内毒素血症中老鼠的成活率；
• 通过抑制iNOS的活性，使NO的合成减 少，抑制内毒素血症引起的血压下降和 对去甲肾上腺素的血管低反应性
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异硫脲类似物（被硫替代的）：如
硫-甲基异硫脲(SMT)、硫-氨乙基异硫脲 (SAETU)、硫-乙基异硫脲(SETU)、硫异丙基异硫脲( SIPTU)
都是NOS抑制剂。
• 前两者是iNOS的强大抑制剂。抑制作用 明显>L-NMA，但对血管内皮细胞NOS 的抑制作用L-NMA
• 显著地改善急性心肌梗塞后的左室功能， 增加心肌的血流供应。
• cGMP水平升高
—调节离子通道
—依赖于cGMP的蛋白激酶
—激活cGMP的磷酸二酯酶
—抑制cGMP的磷酸二酯酶
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NO的细胞毒性
• 病理状态下，NO短暂升高，一方面，它对人 体可起到有益作用（抗菌、抗寄生虫、抗病毒 或杀伤肿瘤）；另一方面，不加控制的高水平 NO则对人体有害：
—ONOO-
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NOS抑制剂研究进展
左旋精氨酸(L-arg)类似物：如 L-NMA, L-NCPA， L-NAA, L-NAHA, L-NAME, L-NMME等都是NOS 的竞争性抑制剂。
其中L-NAME和L-NAA是iNOS的选择性抑制剂，对 白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导 产生的心肌收缩能力衰退具有明显的保护作用。
+
—与一些酶的铁-硫中心结合，影响线粒体电子 传递、柠檬酸循环和DNA合成。
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NOS分类及分布
• 应用蛋白质生化和分子克隆技术已分离出至少3 种独立的NOS基因，并以组成或克隆的先后顺序 命名为： ①神经型（ncNOS）或称I型NOS：脑、平滑肌、 骨骼肌、肝细胞以及胰、胃、肾等 ②巨噬细胞型（iNOS）又称免疫型或II型NOS： 巨噬细胞、肥大细胞、神经胶质细胞、单核细胞、 内皮细胞以及心肌细胞 ③内皮型（ecNOS）或III型NOS：血管内皮细胞
*NO及NO前体可以反馈性抑制主动脉EC中的NOS，而不影响NO对 VSM的直接舒张作用 NO作用机制
• NO弥散进入VSM细胞内，通过与鸟苷酸环化酶(GC)中血红素卟啉环 中的Fe2+结合，将卟啉环中的Fe2+ 拉出表面，引起GC构型发生改变 而激活，从而使三磷酸鸟苷（GTP）转变为环磷酸鸟苷（cGMP）， 导致细胞内cGMP水平升高。
ONOO-
+
氧化性及对细胞的毒性作用均明显强于NO素
引起NO合成和释放的刺激主要有两种：
• 化学性刺激（如Ach、缓激肽等）；
• 机械性刺激（如血管张力、剪应力、EC变形及血液脉冲流动等）：
剪应力加大可激活位于EC表面的机械性感受器，使NOS活性增强。
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NOS在细胞内存在形式
NOS是一种含铁的单胺氧化酶，根据对Ca2+的 依赖性，在细胞内的存在形式分为：
• 结构型NOS(cNOS)：活性受Ca2+和CaM浓度 的调控；主要分布于血管内皮细胞、血小板， 神经组织中次之。
• 诱导型NOS (iNOS)：活性与Ca2+浓度无关， 但需要脂多糖（LPS）和细胞因子如IL-1和 IFN-激活后才能表达。也可被塞米松、皮质 类固醇、雌激素、生长转化因子、IL-4、IL-8 及IL-10所抑制。
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糖皮质激素：
—能抑制各种细胞中由内毒素或细胞因子 诱导的NOS的活性，包括内皮细胞、血 管平滑肌细胞、巨噬细胞、中性粒细胞 和肝细胞等。
—能显著地抑制心肌梗塞中iNOS的表达 和转录，降低心肌细胞中cGMP水平， 降低过量NO对心肌细胞的毒性作用，对 心肌的收缩功能起代偿作用。
cyclase，GC) → cGMP↑ → 调节脑血流量和 促进神经细胞的生长发育；
• 过量的NO →细胞损伤。当突触前膜受刺激释 放Glu →激活突触后膜上的NMDA受体→ Ca2+内流↑↑ →激活一氧化氮合酶→产生过量 的NO →细胞毒性。
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1、γ-氨基丁酸(GABA)
• GABA在神经组织中的形成是通过突触中的谷氨酸脱羧酶 的脱羧作用而产生的, 其降解是氨基丁酸转氨酶催化实现 的。
• 亚甲蓝，一种GC抑制剂，它同样抑制NOS的 活性，改善脓毒性休克的血流动力学。
• 环胞霉素，一种免疫抑制剂，可有效地抑制 iNOS基因和iNOS酶活性。
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• 3、一氧化氮（NO）
• 大量研究表明， NO在脑缺血或缺血再灌注
损伤中有神经保护和神经毒两种倾向。
• 少量的NO→激活鸟苷酸环化酶(guanylate
• 作用机制：使细胞膜对Cl- 的通透性↑→突触后神经元放电 速率↓→神经元活动↓ 。
史嘉伟等在研究GABA对血管平滑肌的作用时发现： 5-HT 可使血管收缩；而GABA可使收缩的血管舒张,此作用对脑 血管较外周血管明显,可能与受体的密度有关。
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（一）GABA受体
• 根据受体对激动剂及拮抗剂的敏感性, 可将GABA 受体主 要分为A 、B 、C 三个亚型。
•L-Arg，L-OH-Arg和含精氨酸的小分子多肽是合成NO的前 体。
•在组织中，L-Arg以还原型辅酶II（NADPH）作为电子供体。
•生成的NO以扩散的形式到达并进入靶细胞。
化学性质活泼：其T1/2仅2-5sec； 易与氧反应，生成新的毒性自由基
可被O2-灭活而生成过氧化亚硝酸阴离子(ONOO-)。 在酸性条件下：