本发明属于生物成像技术领域，尤其涉及一 种功能化金纳米粒子及其制备方法、金纳米粒子 二聚体的制备方法及其应用。本发明提供了一种 功能化金纳米粒子的制备方法，本发明将制备的 功能化金纳米粒子作为探针，形成金纳米粒子二 聚 体 ，并 将其 用于 测定大鼠 血清铜离子 ，为 测定 铜离子提供了一种新的方法，为金属阳离子提供 了急性中毒处理指导，本发明实现了将点击反应 化学用于暗场成像。
2
CN 109622944 A
说 明 书
1/5 页
一种功能化金纳米粒子及其制备方法、金纳米粒子二聚体的 制备方法及其应用
技术领域 [0001] 本发明涉及生物成像技术领域，尤其涉及一种功能化金纳米粒子及其制备方法、 金纳米粒子二聚体的制备方法及其应用。
背景技术 [0002] 局部表面等离子体共振(LSPR)光散射相关方法在化学、生物医药等方面的应用是 很有前景的 ，因为LSPR赋予光散射以 一种易于区 别于其他粒子散射的特征波段。基于LSPR 的暗场显微镜(DFM)是一种有前途的非破坏性和非光漂白生物成像技术。近年来，研究者们 通过DFM记录贵金属纳米粒子LSPR的波长变化，对检测生物分子或跟踪动态生物物理过程 进行了大量的工作。贵金属纳米颗粒表面的LSPR在生物医学和光电等领域得到了广泛的研 究。金纳米粒子 (AuNPs) 作为光学换能器因其独特且优异的 光学 和电 学性 质而被广泛 用于 生物分析、化学和生物传感。 [0003] 点击反应化学与代谢标记已被广泛用于选择性成像DNA、蛋白质和标记小分子。然 而，尚未有将点击反应化学用于暗场成像的报道，现有的金纳米粒子未能实现通过点击反 应化学进行生物成像研究。
3 .根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述聚乙二醇-金纳米粒子、2-氨 基乙硫醇和酯类化合物的质量比为1:10:10。
4 .根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述酰胺反应的温度为20～30℃，时 间为1～4h。
5 .权利要求1～4任一项所述制备方法制备得到的功能化金纳米粒子。 6 .一种金纳米粒子二聚体的制备方法，包括以下步骤： 将炔基功能化金纳米粒子、叠氮基功能化金纳米粒子、铜盐、抗坏血酸钠和三-(3-羟基 丙基三唑基甲基)胺混合，进行环加成反应，得到金纳米粒子二聚体； 所述炔基功能化金纳米粒子和叠氮基功能化金纳米粒子为权利要求5所述功能化金纳 米粒子或由权利要求1～4任一项制备方法制备得到的功能化金纳米粒子。 7 .根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述炔基功能化金纳米粒子和叠氮基 功能化金纳米粒子的摩尔比为1:1。 8 .根据权利要求6或7所述的制备方法，其特征在于，所述炔基功能化金纳米粒子、抗坏 血酸钠和三-(3-羟基丙基三唑基甲基)胺的摩尔比为0 .2:5:5。 9 .根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述环加成反应的温度为20～30℃， 时间为1～9h。 10 .权利要求6～9任一项所述制备方法制备的金纳米粒子二聚体在铜离子暗场成像中 的应用。
(51)Int .Cl . B22F 1/00(2006 .01) C07D 207/46(2006 .01)
(10)申请公布号 CN 109622944 A (43)申请公布日 2019.04.16
( 54 )发明 名称 一种功能化金纳米粒子及其制备方法、金纳
米粒子二聚体的制备方法及其应用 ( 57 )摘要
ห้องสมุดไป่ตู้
权利要求书1页 说明书5页 附图2页
CN 109622944 A
CN 109622944 A
权 利 要 求 书
1/1 页
1 .一种功能化金纳米粒子的制备方法，包括以下步骤： 将聚乙 二醇-金纳米粒子 、2-氨基乙 硫醇 和酯类化合物混合 ，进行酰胺反应 ，得到功能 化金纳米粒子； 所述酯类化合物中含有炔基或叠氮基； 所述功能化金纳米粒子包括炔基功能化金纳米粒子或叠氮基功能化金纳米粒子。 2 .根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述酯类化合物为化合物1或叠氮PEG4-NHS酯；所述化合物1的结构式为：
[0011]
[0012] 优选的 ，所述聚乙二醇-金纳米粒子、2-氨基乙硫醇和酯类化合物的质量比为1: 10:10。 [0013] 优选的，所述酰胺反应的温度为20～30℃，时间为1～4h。
3
CN 109622944 A
说 明 书
2/5 页
[0014] 本发明提供了上述技术方案所述制备方法制备得到的功能化金纳米粒子。 [0015] 本发明提供了一种金纳米粒子二聚体的制备方法，包括以下步骤： [0016] 将炔基功能化金纳米粒子、叠氮基功能化金纳米粒子、铜盐、抗坏血酸钠和三-(3羟基丙基三唑 基甲 基) 胺混合 ，进行环加成反应 ，得到金纳米粒子二聚体 ；所述炔基功能化 金纳米粒子和叠氮基功能化金纳米粒子为上述技术方案所述功能化金纳米粒子或由上述 技术方案所述制备方法制备得到的功能化金纳米粒子。 [0017] 优选的，所述炔基功能化金纳米粒子和叠氮基功能化金纳米粒子的摩尔比为1:1。 [0018] 优选的，所述炔基功能化金纳米粒子、抗坏血酸钠和三-(3-羟基丙基三唑基甲基) 胺的摩尔比为0 .2:5:5。 [0019] 优选的，所述环加成反应的温度为20～30℃，时间为1～9h。 [0020] 本发明提供了上述技术方案所述制备方法制备的金纳米粒子二聚体在铜离子暗 场成像中的应用。 [0021] 本发明以聚乙二醇-金纳米粒子作为原料，能够将叠氮基和炔基通过金硫键连接 到金纳米粒子上 ，得到叠氮基功能化金纳米粒子 和炔基功能化金纳米粒子 ，使 用该功能化 金纳米粒子作为探针制备的金纳米粒子二聚体能够用于测定大鼠血清铜离子，为测定铜离 子提供了一种新的 方法 ，为金 属阳离子提供了急性中毒处理指导 ，能 够实现将点击反应化 学用于暗场成像。
( 19 )中华人民 共和国国家知识产权局
( 12 )发明专利申请
(21)申请号 201910026429 .0
(22)申请日 2019 .01 .11
(71)申请人 临沂大学 地址 276000 山东省临沂市兰山区双岭路 中段临沂大学
(72)发明人 郭英姝 刘斐 胡银华 张书圣
(74)专利代理机构 北京高沃律师事务所 11569 代理人 刘奇
发明内容 [0004] 本发明的目的在于提供一种功能化金纳米粒子及其制备方法，该功能化金纳米粒 子能够实现将点击反应化学用于暗场成像。 [0005] 为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案： [0006] 本发明提供了一种功能化金纳米粒子的制备方法，包括以下步骤： [0007] 将聚乙二醇-金纳米粒子、2-氨基乙硫醇和酯类化合物混合，进行酰胺反应，得到 功能化金纳米粒子； [0008] 所述酯类化合物中含有炔基或叠氮基； [0009] 所述功能化金纳米粒子包括炔基功能化金纳米粒子或叠氮基功能化金纳米粒子。 [0010] 优选的 ，所述酯类化合物为化合物1或叠氮-PEG4-NHS酯；所述化合物1的结构式 为：