第一单元生物技术与生物工程
第一章基因工程和蛋白质工程第一节基因工程的原理
一、选择题(共7小题，每小题4分，共28分)
1．下列关于限制酶的说法正确的是()。
A．限制酶广泛存在于各种生物中，微生物中很少分布
B．一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列
C．不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性末端
D．限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键
解析此题主要考查限制酶的有关知识。
限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的，并不是广泛存在于各种生物中；一种限制酶能识别双链DNA的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，DNA 分子经限制酶切割后会形成黏性末端或平末端。
答案 B
2．用基因工程技术可使大肠杆菌合成人的蛋白质。
下列叙述不正确的是()。
A．常用相同的限制性内切酶处理目的基因和质粒
B．DNA连接酶和RNA聚合酶是构建重组质粒必需的工具酶
C．可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒
D．导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达
解析基因工程中限制性内切酶和DNA连接酶是构建重组质粒必需的工具酶；质粒作为载体必须具有标记基因；导入的目的基因不一定能够表达成功，还要进行修饰或处理。
答案 B
3．利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需要的产品。
下列选项中能说明目的基因完成了在受体细胞中表达的是A．棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因
B．大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及mRNA
C．山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNA序列
D．酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白
解析在基因工程中，判断外源基因是否“表达”常用的方法是看有无目的基因产物产生。
答案 D
4．DNA连接酶的重要功能是()。
A．DNA复制时母链与子链之间形成氢键
B．黏性末端互补碱基之间形成氢键
C．将两DNA片段之间的缝隙连接起来
D．A、B、C都不正确
解析DNA连接酶的作用是恢复被限制酶切开了的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
答案 C
5．要检测目的基因是否成功插入了受体DNA中，需要用基因探针，基因探针是指()。
A．用于检测疾病的医疗器械
B．用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子
C．合成β球蛋白的DNA
D．合成苯丙羟化酶的DNA片段
解析基因探针是指已知的DNA片段(实际上是单链)，为便于对杂交的结果进行检测，需要对其作放射性同位素或荧光分子标记。
答案 B
6．下列有关基因工程的叙述正确的是()。
A．限制酶只在获得目的基因时才用
B．重组载体的构建是在细胞内完成的
C．质粒都可作为载体
D．蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料
解析如果以质粒为载体，首先要用一定的限制酶切割质粒，使质粒出现一个切口，露出黏性末端，然后用同一种限制酶切割目的基因，使其产生相同的黏末端，所以载体的切割也要用到限制酶。
重组质粒的形成是在生物体外完成的。
只有具备符合相关条件的质粒才能作为载体。
答案 D
7．关于DNA重组技术中基本工具的叙述，正确的是()。
A．限制性内切酶的作用部位是特定的两个核苷酸之间的氢键
B．目的基因经限制性内切酶切割后一定会形成黏性末端
C．DNA连接酶用来连接两个核苷酸之间的磷酸二酯键
D．质粒DNA分子上一定含有抗四环素基因
解析限制酶的作用部位是两个核苷酸之间的磷酸二酯键，而不是氢键。
被限制酶切开后的DNA可以形成黏性末端，也可能形成平末端。
有的质粒上可能含有一些其他抗性基因。
答案 C
8．(10分)为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。
我国科学家应用耐盐基因培育
出了耐盐水稻新品系。
(1)获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的________处，DNA连接酶作用于____________处(填a 或b )。
(2)将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和________法。
(3)为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的____________作探针进行分子杂交检测，又要用____________的方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。
本题综合考查了基因工程的工具和基因工程的一般程序。
限制性内切酶的切点选择很严格，只会切断某段特定DNA序列中的某个特定位点—磷酸二酯键，而DNA连接酶可以将该键连接起来。
重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法除了农杆菌转化法外，还有基因枪法和花粉管通道法。
转基因是否成功，可测定是否有转基因产物产生，也可通过改变条件观察植物性状的变化来加以确定。
答案(1)aa(2)基因枪(或花粉管通道)(3)耐盐基因(目的基因)一定浓度盐水浇灌(移栽到盐碱地中) 9．(12分)(实际应用题)下图为重组DNA分子构建的示意图，回答以下问题：
(1)图中，数字1、2、3、4代表______________，过程A、B和C所需要的工具分别是______________、______________和____________。
(2)写出结构5、6和7的名称5．________；6.________；7.________。
(3)进行A过程和B过程使用的工具必须是___________________________，它们均从________中分离和提纯。
(4)图中整个操作环境是。
A．细胞内B．细胞外C．细胞内和细胞外
(5)结构5主要来自于________(生物)，在基因工程中所起的作用是__________ _____________________________________。
解析根据图解可知，结构5、6、7分别代表质粒、含有目的基因的DNA片段和重组质粒，过程A和B表示用同一种限制酶对质粒和外源DNA片段进行切割。
在此判断的基础上，对三种基本工具的相关问题做出解答。
答案(1)限制酶的切割位点限制酶限制酶DNA连接酶(2)质粒含有目的基因的外源DNA片段重组质粒(3)同一种限制酶原核生物(4)B
(5)细菌与含有目的基因的DNA片段拼接成重组DNA分子，作为分子运输车将目的基因导入受体细胞中。