华中农业大学 2014年 农药生物活性测定结业复习资料1．简述农药生物测定的概念、意义。

度量农药对生物群体、个体、活体组织或细胞产生效应大小的生物测定技术。

通常采用不同药剂剂量或浓度对测定对象产生的效应强度，来评价两种或两种以上药剂的相对效力。

2．简述农药生物测定的原理、原则。

研究药剂与生物的相关性。

1控制影响因素尽可能一致 （温度、湿度、光照等外界环境条件 ;农药的理化性状;供试生物的生理状态 ;处理方法及处理部位） 2设立对照 （空白对照、溶剂对照、标准药剂对照） 3重复测定4运用生物统计分析试验结果5供试生物应尽量选择农作物害虫、病原菌和农田主要杂草3．高通量筛选组成部分有哪些？1自动化操作系统、2高灵敏度检测系统、3分子、细胞水平的高特异性体外筛选模型、4被筛样品管理库（即样品库）、5数据采集传输处理系统。

4．何为杀虫剂生物测定？度量杀虫剂对昆虫（包括螨类和昆虫纲以外的小动物）产生效应大小的农药生物测定。

通过比较不同杀虫剂的剂量或浓度对供测昆虫产生效应强度的方法，来评价两种或两种以上杀虫剂的相对效力。

5．什么是标准目标昆虫？简述目标昆虫室内饲养定向控制的条件？是指被普遍采用的，具有一定代表性和经济意义，以及抗药力稳定均匀的农药杀虫毒力和毒效指示试虫群体。

营养条件：昆虫人工饲养必须解决饲料问题，无论是采用天然的或人工配制的饲料，必须要供应充足和及时。

饲养中的环境条件：在昆虫人工饲养过程中，控制好适宜的温度、湿度和光照条件，对昆虫的生长发育和繁殖以及饲养成败起着重要作用。

6杀虫剂毒力测定的主要内容？1初筛（杀虫剂初步毒力测定）2毒杀作用方式测定3精密毒力测定—LC50 或LD506． 杀虫剂生物测定中移取试虫的方法有哪些？一般移取法、趋光法、吸虫法、自行迁移移虫法、麻醉法。

7． 论述胃毒、触杀、熏蒸、内吸、忌避作用测定技术的基本原理及方法。

8． 简述叶片夹毒法的基本原理和实验方法。

1)试验靶标：鳞翅目幼虫（如黏虫，小菜蛾，菜青虫，甜菜夜蛾等），一般三龄以上，饥饿4~8小时，选取50头，电子天平称重，计算平均体重 （改进1：单头称重改为求平均体重） ； 2)药液配制：水溶性药剂以水溶解后用有机溶剂（丙酮）稀释，其它药剂以适合的有机溶剂（丙酮，二甲基亚砜等)溶解并稀释。

按等比或等差的方法设臵5-7个系列浓度；（改进2：设臵系列浓度梯度）夹毒叶片制作：用直径1cm 的打孔器打取叶碟，注意保湿（改进3：夹毒叶片面积减小）。

用毛细管点滴器从低浓度开始，每叶碟点滴1-2μL 药液，待溶剂挥发后与另一片涂有淀粉糊（或面粉糊）的叶片对合制成夹毒叶碟。

每处理4次重复，并设对应的有机溶剂对照（改进4：点滴药液代替喷粉 ）4)药剂处理：试虫取食完含药叶碟后，加入新鲜饲料继续饲养至调查，淘汰未食完一张完整叶碟的试虫（改进5：不定量进食改为定量给食）； 6)结果调查：记录总虫数和死虫数；7)数据统计与分析：计算各处理的试虫吞食药量（剂量以 µg （药剂）/g （虫）表示 ）和校正死亡率；使用数据处理软件SAS ，DPS ，计算毒力回归方程， LD50，LD90及95%臵信限（改进6：致死中量的计算） ； 9． 何为杀菌剂生物测定。

利用病原菌或感菌生物体对杀菌剂的反应，来确定杀菌剂效力(毒力,药效)的农药生物测定。

10．简述孢子萌发试验法、生长速率测定法、附着法、稀释法和抑菌圈测定法的基本原理和测定方法？11．简述温室盆栽试验中接菌、施药方法及药效调查方法？气流及雨水传播的病害—喷洒法、喷撒法、涂抹法、注射法、针刺法。

种子传染的病害—拌种法或浸种法。

土壤传染的病害—土壤接种法、蘸根接种法、根部切伤接种法。

)1测定药剂的保护效果：先喷药，后接菌。

2测定药剂的治疗效果：先接菌，待病菌入侵后（1-2天）再施药。

3) 测定药剂的内吸作用：先喷药，后接菌。

4) 测定药剂的持效期：一次施药后，间隔1天，2天，4天，6天，8天或更长时间分期接种病原菌。

5) 测定抗雨淋作用：先喷药，用喷雾装臵降水淋洗一定时间以模拟降雨，然后接菌。

1调查发病普遍率：以病害发生的普遍与否表示药剂的效果，计算调查总株（或总叶）数中发病百分率。

适用于某些土壤和种子传染的苗期病害、全株性病害。

2计数法：适用于叶斑类病害。

调查每一叶上的病斑数,求得平均每叶病斑数,并以此比较发病情况,计算防治效果。

3分级计数法：将病害分级调查后，计算病情指数及防治效果。

12．什么是除草剂生物测定？度量除草剂对杂草生物效应大小和对作物安全性的农药生物测定。

通常采用不同剂量的除草剂对供试杂草（或作物）产生效应强度的相对比较方法，以评价一种或多种除草剂的相对效力（或安全性）。

13．简述除草剂生物测定的分类、原理及生物测定方法。

（光合作用抑制剂原理相应方法）14．何为植物激素的生物测定？利用敏感植物某些性状反应作指标，对生理活性物质进行定性或定量的农药生物测定。

15．简述植物激素生物测定技术的分类，各常用测定方法的基本原理。

16．论述农药对非靶标生物的毒性类型及测定技术。

//1000ug g mg L uL g ⨯⨯每克质量昆虫吞食药液量（）处理药液的质量浓度（）滴加药液体积（）＝昆虫质量（）17．农药对靶标生物的急性毒性测定试验中，染毒的途径有哪些？（只需简述）1）经口(胃肠道)接触：灌胃：是将化合物配制成一定浓度，装入注射器等定量容器，经过导管注入胃内。

在每一试验系列中，同物种实验动物灌胃体积应一致，以单位体重计算所给予的毫升数，即ml/kg或ml/g。

吞咽胶囊：将一定剂量受试化合物装入药用胶囊内，强制放到动物的舌后后咽部迫使动物咽下。

此种方式剂量准确，尤其适用于易挥发、易水解和有异味的化合物。

家兔及猫、狗等大动物可用此法。

2）经呼吸道接触（吸入接触）静式吸入：系将实验动物臵于一个有一定体积的密闭容器内，加入定量的易挥发的液态化合物或一定体积的气态化合物，在容器内形成所需要的受试化合物浓度的空气环境。

动式吸入：是指实验动物处于空气流动的染毒柜中，染毒柜装臵备有新鲜空气补入与含受试化合物空气排出的动力系统和随时补充受试化合物的配气系统。

3）经皮肤接触经皮肤吸收：目前多选用家兔、豚鼠和大鼠。

定性试验：考察一个外来化合物能否经皮吸收引起中毒。

小鼠或大鼠的浸尾试验是常用的定性试验方法。

定量试验：是在实验动物已脱好毛的部位定量涂布受试化合物，以求该化合物经皮吸收的剂量－反应关系，求经皮LD50。

局部作用试验：常用皮肤斑贴法或兔耳法。

4）注射途径接触受试物采用注射途径进行外来化合物的急性毒性试验，主要用于比较毒性研究，以及化合物的代谢、毒物动力学和急救药物筛选等研究。

18．何为农药田间药效试验？在田间条件下评价农药对靶标生物（病、虫、草等）效应的试验技术。

是一种综合评价药剂使用价值的多因子综合试验。

19．论述农药田间药效试验的要求、原则、试验方法及药效调查方法。

要求1）试验目的明确 2）试验条件有代表性 3）试验结果可靠并具有可重复性原则1）选择有代表性的试验地并设臵重复2）运用局部控制3）采用随机排列20．简述转基因抗虫棉抗虫性的鉴定方法。

（提取重点就好）1 形态鉴定抗虫棉株部分器官或整个植株通常具有某些特异性结构而对某些害虫产生驱避或耐害的特性。

可以利用其形态学的表征来鉴定棉株是否为抗虫植株。

2分子鉴定是指在分子水平上对转基因棉花的鉴定。

具体做法是在实验室内将目标棉株的DNA或RNA提取出来，然后通过PCR技术和探针技术进行基因片段的Southern杂交或Northern杂交，从而检测转基因抗虫棉的方法。

DNA分子水平上的检测:PCR检测、Southern杂交RNA水平上的检测、反转录PCR (RT-PCR)、S1核酸酶保护法蛋白质水平上的检测：免疫试纸条法、western杂交3生化鉴定是指在实验室内通过对转基因棉花中的外源基因的生化代谢产物进行定性或定量分析，来鉴定棉花抗虫性的方法。

1）对目的基因代谢产物的生化分析：该方法直接从目的基因表达产物出发，分析目标棉株抗虫性强弱。

它不仅可以鉴定出是否已将外源抗虫基因导入到棉花植株内，而且还可以检测出外源抗虫基因在棉株内表达的强弱。

酶联免疫吸附测定法(ELISA)试纸条法、免疫法。

2）利用标记基因进行鉴定在植物遗传转化过程中，为有效筛选转化细胞，人们在导入外源目标基因的同时，往往将某一易于筛选或鉴定的基因片段与目的基因拼接在一起。

然后通过该基因片段的检测或筛选来推断目的基因存在与否。

标记基因分两大类:一是选择标记基因，一是报告基因。

4 生物鉴定是通过棉花害虫在某些特定生态条件下的反应和群体的变化来实现，一般又分为室内喂养、网室鉴定和田间自然感虫鉴定3种方式。

名词解释、选择、填空（共50分）、实验题（10分）、简答题（20分）、论述题（20分）农药生物测定复习题农药生物测定：是指运用特定的试验设计，利用生物的整体或离体的组织、细胞对农药（或某些化合物）的反应，并以生物统计为工具，分析供试对象在一定条件下的效应，来度量（判断或鉴别）某种农药的生物活性。

初步综合杀虫毒力试验：将较高浓度（或剂量）的农药，大量而均匀地直接喷撒于目标昆虫群体及其饲料上，作用一定时间，以充分发挥供试杀虫剂的综合毒力。

负温度系数的杀虫剂：在一定温度范围内，杀虫剂的毒效随温度的降低而升高，称为负温度系数的杀虫剂。

如溴氰菊酯对伊蚊幼虫的毒力在10℃时比30℃时大7倍。

正温度系数的杀虫剂：在一定温度范围内，杀虫活性随温度升高而增强。

如敌百虫。

标准目标昆虫：指被普遍采用的、具有一定代表性和经济意义以及抗药力稳定均匀的农药杀虫毒力和毒效指示试虫群体。

杀虫剂内吸毒力：药剂可通过植物根、茎、叶等部位吸收到植株内部，随着植物体液输导，当害虫取食植物或刺吸汁液时，药剂进入虫体并将之杀死。

熏蒸毒力：在适当气温下，利用有毒气体、液体或固体挥发产生的蒸气来毒杀害虫（或病菌）。

熏蒸毒力测定：测定杀虫剂从昆虫气孔或气门进入呼吸系统而引起试虫中毒致死的熏杀毒力。

化学保护：用药剂处理植物和植物环境，在病菌侵入寄主植物前发挥药效，保护植物不受病菌侵染的措施。

化学治疗：在病原菌侵入植物之后使用杀菌剂消灭病菌，使植物不再发病。

将药剂内吸到植物内部起作用。

化学免疫：植物通过药剂的作用，使植物具有对病菌的抵抗能力，避免或减轻病菌的侵害。

杀菌剂的离体活性测定：只包括病原菌和药剂而不包括寄主或寄主植物的培养皿内测定方法，通常根据病菌与药剂接触后的反应，如孢子不萌发、不长菌丝等来作为毒力评判的标准。

杀菌剂的活体活性测定：包括病原菌、药剂和寄主植物在内的活性测定，通常以寄主植物的发病情况（普遍程度、严重程度）来评判药剂的毒力。

致死中量(LD50)(medium lethal dosage)：指杀死供试昆虫群体内50%的个体所需要的药剂剂量。