药物分析 第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
四、含量测定
（一）亚硝酸钠滴定法 (2) 加过量HCl加速反应：
①重氮化速度加快； ②重氮盐在酸性介质中稳定； ③防止生成氨基偶氮化合物。
Ar-N2+Cl- + H2N-Ar
Ar-N=N-NH-Ar + HCl
一般摩尔比为Ar-NH2 : HCl = 1 : 2.5~6 。
Ch.P2010中的苯佐卡因、盐酸普鲁卡因和盐酸 普鲁卡因胺及其制剂可直接采用本法；醋氨苯砜 及注射液水解后用本法。
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NHCOR + H2O
H+ △
还原
NO2 + 6[H]
NH2 + RCOOH
NH2 + 2H2O
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药物分析
第八章
对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
游奎一
湘潭大学化工学院
药物分析 第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
本章主要内容
第一节 结构与性质 第二节 鉴别试验 第三节 特殊杂质与检查 第四节 含量测定
药物分析 第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
学习要求
一、掌握对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药 物的结构和性质，代表性药物的鉴别、检查和 含量测定的基本原理与方法。
Ar-NH2
HCl NaNO2
重氮盐 OH-
-萘酚
橙黄~猩红色
生成偶氮染料
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（一）重氮化-偶合反应 直接反应：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、 盐酸普鲁卡因胺、
对氨基水杨酸钠 等
间接反应：对乙酰氨基酚、非那西丁、醋氨苯砜、贝诺酯
但盐酸利多卡因、盐酸布比卡因由于它们的空间位阻 效应，很难发生重氮化-偶合反应。
3. 弱碱性：除苯佐卡因外，其余均含有叔胺氮的侧链，故具 有弱碱性。
4.与金属离子发生沉淀反应：利多卡因和布比卡因酰氨 基上氮可与Cu2+,Co2+生成有色配位化合物沉淀。
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5.吸收光谱特性：对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类药物分子结构中 均含有苯环及相应的取代基与脂肪胺侧链，具有特征的紫外吸 收光谱和红外光谱行为。
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（一）重氮化-偶合反应
1.苯佐卡因和盐酸普鲁卡因 ChP（2000） [鉴别] （1）本品显芳香第一胺类的鉴别反应（附录Ⅲ）
取供试品约50mg，加稀盐酸1m1，必要时缓缓煮沸 使溶解，放冷，加0.1mo1/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加 碱性β-萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙黄到 猩红色沉淀。
二、酰苯胺类药物的基本结构与典型药物
（一）基本结构与典型药物
NH R1
酰化 O
NH C
R3
R1
NH C R2
O R4
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（一）酰苯胺类药物的基本结构与典型药物
CH3 NHCO
C4H9 N
CH3
HCl
盐酸布比卡因
NHCOCH2N(C2H5)2
CH3
CH3
四、含量测定
3. 指示终点的方法(实验装置见书P250)
(1) 永停滴定法 溶液 检流计 V 终点前： 无过量 无电流 V
HNO2 终点时：有过量 有电流（使指针偏离零
HNO2 (2) 外指示剂法
用KI-淀粉指示剂 指示终点的原理：
NH2
H2O2
CONHCH2CH2N(C2H5)2
芳 酰 胺
NH2
NH2
FeCl3
Fe
CON(OH)CH2CH2N(C2H5)2
羟 肟 酸
CON(OH)CH2CH2N(C2H5)2 3 紫红，暗棕色，棕黑色
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（二）与重金属离子反应
3. 与汞离子反应
为什么要检查？
杂质来源： 水解产生、脱羧、氧化
H2N
COOH -CO2 H2N
[O]
O=
=O
怎样检查？ 采用HPLC进行检查。
黄色
流动相：磷酸二氢钾-甲醇=68:32 检测波长：279nm
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三、特殊杂质检查
(二)盐酸利多卡因注射液中2,6-二甲基苯胺的检查
HO
NHCOCH3
对乙酰氨基酚（扑热息痛）
CH3CONH
O S O
醋氨苯砜
NHCOCH3
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（二）主要理化性质
1.芳伯氨基特性：重氮化－偶合反应；芳醛缩合成Schiff碱；易 氧化变色等。盐酸丁卡因无此特性。
2. 水解特性：分子结构中的酯键或酰胺键易水解，除盐酸 丁卡因外水产物为对丁基苯甲酸外，上述均 为对氨基苯甲酸。
CH 3
+Co2+
CH3
NCOCH2N(C2H5)2
CH3
Cu CH3
(C2H5)2NCH2CON
CH3 蓝紫色
CH3
NCOCH2N(C2H5)2 (C2H5)2NCH2CON
CH3
Co
CH3
亮绿色
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（二）与重金属离子反应
2. 羟肟酸铁盐反应 基于普鲁卡因胺分子中的 芳酰胺结构。
采用HPLC进行检查。
(三)盐酸罗哌卡因光学纯度的检查
盐酸罗哌卡因有两种对映体，一个是R构型，一个是S构型。 其中R-盐酸罗哌卡因对心脏毒性大，要限制其含量，其限量 是0.5%。
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四、含量测定
（一）亚硝酸钠滴定法 Ar-NH2; Ar-NHCOR; Ar-NO2均可采用此法。 即：具游离芳伯氨基的药物可用本法直接测定。具 潜在芳伯氨基的药物，如具酰胺基药物（对乙酰氨 基酚等）经水解，芳香族硝基化合物（如无味氯霉 素）经还原，也可用本法测定。
CH3(CH2)3NH
COOCH2CH2N(C2H5)2 HCl
丁卡因虽无芳伯氨基，但分子中的芳香仲胺在酸性溶液
中可与NaNO2反应生成N－亚硝基化合物的乳白色沉淀。
NHC4H9
C4H9N-NO
+ HNO2 COOCH2CH2(C2H5)2
+ H2O
COOCH2CH2(C2H5)2 乳白色
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(五) 紫外特征吸收光谱法
1. 在λmax 处测定供试液的吸光度。
例如：盐酸布比卡因在0.01mol/L%盐酸中于λmax =263nm
和λmax =271nm测定最大吸收，其吸光度分别为0.53～0.58与0.43～0.48
2. 在规定的浓度测定λmax
例如：醋氨苯砜5μg/ml; 最大吸收。
在λmax
H2N
COOC2H5
苯佐卡因
H2N
. COOCH2CH2N C2H5 2 HCl
盐酸普鲁卡因
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H3C (H2C)3 HN
COOCH2CH2N(CH3)2 . HCl
盐酸丁卡因
H2N
CONHCH2CH2N(C2H5)2 HCl
盐酸普鲁卡因胺
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黄色沉淀 黄色沉淀
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(五) 制备衍生物测熔点
2. 硫氰酸盐衍生物的制备：盐酸丁卡因
NHC4H9
NH4SCN
COOCH2CH2N(C2H5)2.HCl
NHC4H9
COOCH2CH2N(C2H5)2 .HSCN 熔点为131℃ 白色结晶
强酸制弱酸
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（一）重氮化-偶合反应
NH2
COOCH2CH2N(C2H5)2
OH [H2O]
NHCOCH3
NaNO2+HCl
Ar-NH2
Ar-N2+Cl -
OH
OH-
Ar-N=N OH
猩红或红色
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特例： 盐酸丁卡因：
NH2
NH2
HCl
HCl
NH2 + HOCH2CH2N(C2H5)2
COONa NH2. HCl
COONa
COOH
COOH
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(三) 水解产物反应
2. 苯佐卡因的鉴别 苯佐卡因 + NaOH 乙醇 乙醇 + I2 + NaOH CHI3（碘仿臭气，黄色沉淀）
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(四) 制备衍生物测熔点
1. 三硝基苯酚衍生物的制备：盐酸利多卡因和盐酸布比卡因
H3C
. NHCOCH2N(C2H5)2 O2N CH3
OH NO2
熔点为228℃～232℃
. CH3
C4H9 O2N
N
NHCO
NO2
OH NO2
CH3
NO2
熔点为194℃
盐酸利多卡因 + H2NO3 + H2NO3 + Hg(NO3)2 红色或橙黄色
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