O
O CH2O
O OH
OH
HO 7 5
OH 3'
4' O
3 OH
OH
O
槲皮素
OH OH
OH OH
芦丁
项目一 芦丁的提取分离与鉴定
v 子项目一 槐米中芦丁的提取 v 子项目二 槐米中芦丁的精制 v 子项目三 水解芦丁得到槲皮素 v 子项目四 芦丁和槲皮素的鉴别
槐花
相关内容介绍
芦丁的提取分离与鉴定
槐米
天然药物化学实训
项目一 槐米中芦丁的提取分离
与鉴定
实训目的
v 能够运用碱溶酸沉法和结晶法的操作技术对 槐米中的芦丁进行提取分离
v 能够运用酸水解的操作技术对槐米中芦丁进 行水解
v 能够运用纸色谱、薄层色谱法和化学法鉴别 芦丁、槲皮素和糖类化合物
实训结果
得到两个单体化合物
OH OH
HO
O
OH OH O
自的原理有什么不同？ 4、黄酮类薄层色谱中常用到AlCl3乙醇溶液显色？显色
后一般呈什么颜色？ 5、薄层色谱的操作要点有哪些？
子项目三 芦丁 和槲皮素的鉴别
糖 的 鉴 定
残渣
芦丁的提取分离与鉴定
水解所得滤液20ml
用饱和Ba(OH)2调PH值至中 性，折叠滤纸过滤
滤液 蒸干，放冷 加2-3ml乙醇溶解
试剂
盐酸-镁粉反应 Molish反应 FeCl3反应
试验记录
试验现象 芦丁
黄酮母核
性
将样品溶液1ml，加入少许镁粉振摇，滴加几
反 滴浓盐酸，1-2min内，观察颜色变化。
应
Molish反应
苷类
将样品溶液1ml，加入等体积10%α-萘酚溶 液，倾斜试管，摇匀，沿管壁滴加浓硫酸，注意 观察两界面产生的变化。
芦丁的提取分离与鉴定
子项目一 槐米中芦丁的提取
提
取
槐花米 （30g）
加0.4%硼砂沸 水200ml
搅拌下加 入石灰乳
调节 pH8-9
加热
保持微 沸20min
补充水 分，保证 pH值
趁热用棉花
在60-70度下，用
滤过
浓盐酸调pH3-4
滤液
静置
残渣
子项目二 槐米中芦丁的精制
思考问题
1、以热水重结晶法精制芦丁的依据是什么？ 2、重结晶的操作要点有哪些？
打破玻璃器皿和试备 要赔偿！
实验规则
5、保持室内整洁：学生进入实验室必须穿戴工作衣 帽。实验完毕应将本组实验台、实验架等整理洁净方 可离开。实验小组轮流值日，主要负责实验室内、走 廊地面、门窗的卫生整洁，以及废物缸的清倒工作， 将水、电门窗关好，经指导教师验收后再离开实验 室。 6、写好实验报告：实验报告是考查学生分析总结实验 资料能力和写作能力的重要方面，亦是评定实验成绩 的主要依据
苷元成分？
芦丁的提取分离与鉴定
子项目三 水解芦丁得到槲皮素
注意观察整个过程的现 象！为什么为出现这种 情况？
精制芦丁1.5g
加入2%硫酸100ml， 加热回流30min，放 冷静置，抽滤
滤液 作糖的检识用
沉淀 粗品槲皮素
子项目四 芦丁和槲皮素的鉴别
思考问题
1、纸色谱的原理及操作要点？ 2、黄酮类化合物有哪些显色方法，各针对哪类黄酮？ 3、黄酮类薄层色谱中，经常用到的吸附剂有哪几类？各
实验规则
3、杜绝差错事故：称取药品时，要在拿取、称量和 放回时进行核对。称量完毕应盖好瓶塞，放回原 处。实验成品应写明名称、规格、配制者、配制时 间及班组号，交实验指导教师验收。
实验规则
4、爱护仪器药品：实验仪器、药品应妥善保管、存 放和使用。如有破损缺少，必须立即报告实验指导 教师，并填写仪器药品报损表，然后到准备室补 领。实验小组合用的仪器药品，每次实验前应检查 核对后再取用。实验指导教师对破损缺少的仪器药 品应查明原因，按本院校对仪器药品破损处理办法 提出处理意见。
芦丁的提取分离与鉴定
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OH
OH
HO
O
OH OH O
O
O CH2O
O OH
用于治疗毛细管脆弱引 起的出血病，并用作高 血压的辅助治疗剂。
OH OH
OH OH
芦丁
相关内容介绍
芦丁的提取分离与鉴定
OH
OH
3' 4'
HO
O
性状：黄色针状结晶（稀乙醇）。
7
溶解度：冷乙醇中1:300，热乙醇中
5
3
实训报告格式
参照书P139和P216页， 具体要求老师再规定！
提
取
与
精
制
滤液
芦丁的提取分离与鉴定
第一次实验所得滤液
抽滤，少量水洗涤沉淀 沉淀（粗品芦丁）
重结晶
取粗制芦丁3g,加蒸馏水 400ml,煮沸10分钟后，趁热 抽滤
残渣
滤液 冷却，静置
精制芦丁（备用）
减压抽滤装置
子项目三 水解芦丁得到槲皮素
思考问题
1、影响酸水解速度的因素有哪些？ 2、如何进行苷类酸水解操作，如何分离得到
OH
1:23。可溶于甲醇、丙酮、乙酸乙 酯、冰乙酸、吡啶，不溶于水、氯
OH O
仿、乙醚、苯和石油醚等。
槲皮素
子项目一 槐米中芦丁的提取
思考问题
1、加入硼砂目的是什么？ 2、为什么要加入石灰水，在芦丁的提取中能
起到什么作用？ 3、酸沉pH值为什么不宜过低？ 4、以热水重结晶法精制芦丁的依据是什么？ 5、重结晶的操作要点有哪些？
样品
颜色
芦丁 槲皮素
实验记录
直接观察
日光
UV
AlCl3 喷雾 日光 UV
Rf值
实验规则
1、预习实验内容：要明确实验目的与要求。对处方 中药物性质、配制原理、操作步骤、操作关键 等，做到“心中有数”，并合理安排实验时间。
2、遵守实验纪律：应保持实验室内肃静，不得无故 迟到或早退，不得擅离实验操作岗位，甚至高声 谈笑。如发生差错事故或异常现象，应随时报告 指导教师，查明原因，及时解释。注意安全，严 防火灾、烧伤或中毒事故发生。
FeCl3反应
酚羟基
将样品溶液1ml，加入1～2滴2%Fecl3溶液， 观察现象。
芦丁的提取与定性反应
薄 样品：分别取精制的芦丁、槲皮素适量，加95%乙 层 醇溶解成每1ml含1mg的溶液，备用。 色 谱 展开剂：醋酸乙酯-甲酸-水（8：1：1） 鉴 显色剂：2%AlCl3乙醇溶液，105℃加热至斑点 别 清晰，置紫外灯(365nm)下观察。
槐花为豆科植物槐Sophora japonica L．的干燥 花及花蕾
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芦丁的提取分离与鉴定
v 性能：苦，性微寒。 v 功效：凉血止血、清肝泻火
v 应用：用于便血、痔血、血痢、崩漏、吐血、 衄血、肝热目赤、头痛眩晕等。
主要含有芦丁、槲皮素，还含少量皂苷类及多 糖、粘液质等。近代研究表明槐米含芦丁可高 达23.5%，槐花开放后降至13.0%。
供试品溶液 纸色谱
芦丁的提取分离与鉴定
糖
标准品：葡萄糖、鼠李糖
的
展开剂：正丁醇-乙酸-水（4：1：5）上层液
纸
显色剂：苯胺—邻苯二甲酸试剂。
色 谱
105℃烘10min显色(显棕色或棕红色斑点)
鉴
定
标本缸
新华一号滤纸
芦丁的提取分离与鉴定
糖 标准品：葡萄糖、鼠李糖
的 纸 色
展开剂：正丁醇-乙酸-水（4：1：5）上层液 显色剂：苯胺—邻苯二甲酸试剂。
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OH OH
芦丁的提取分离与鉴定
HO
O
OH OH O
O
O CH2O
O OH
OH OH
OH OH
芦丁
性状：浅黄色粉末或极细微淡黄色针 状结晶。 溶解度：在冷水中1:10000，沸水中 1:200；冷乙醇中1:200，沸乙醇中 1:60。沸甲醇中1:7。 酸碱性：芦丁分子中具有较多酚羟 基，显弱酸性，易溶于碱液中，酸化 后又可析出。
谱
105℃烘10min显色(显棕色或棕红色斑点)
鉴
定 试验记录：
粘附纸色谱，并计 算斑点的Ｒf值
１２
３
芦丁的提取分离与鉴定
定 性 芦丁供试品溶液：取精制芦丁约5mg，用5ml甲醇 反 使溶液，备用。 应 槲皮素供试品溶液：取粗槲皮素约5mg，用5ml甲
醇使溶液，备用。
其余试剂：镁粉、浓盐酸、10%α-萘酚溶液、浓硫酸、2% 三氯化铁乙醇溶液